简述激光扫描共聚焦显微镜的工作原理。
题目
简述激光扫描共聚焦显微镜的工作原理。
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第1题：
激光扫描共聚焦显微镜
正确答案: 以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点，使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像，而焦面以外的漫射光不参加成像，改变焦平面，可获得细胞或原标本不同层次的图像，从而得到样品的三维结构图像。 -
第2题：
简述激光扫描共聚焦显微镜的特点。
正确答案: 激光扫描共聚焦显微镜是在荧光显微镜的基础上，加装了激光光源和扫描装置。与普通荧光显微镜相比，激光扫描共焦显微镜具有明显的优点：其激光光源为单色平行光，成像聚焦后焦深小，纵向分辨率高；其光学系统物象共扼，扫描后可得到信噪比极高的光学横断面，不同焦平面的光学切片经三维重建后能得到样品的三维立体结构；具有高灵敏度、高分辨率和高放大倍数等特点，减少了光淬灭的影响。 -
第3题：
电子显微镜包括（）
- A、透射电子显微镜
- B、扫描电子显微镜
- C、激光共聚焦电子显微镜
- D、荧光电子显微镜
- E、扫描隧道显微镜
正确答案:A,B -
第4题：
关于共焦激光扫描显微镜，下列哪项有误（）
- A、以单色激光作为光源
- B、激光变成点光源后聚焦到标本成为点照明
- C、点光源激光束在标本的整个焦平面进行光点扫描后在荧光屏上成像
- D、图像信息要经电脑三维重建处理
- E、所用标本须经超薄切片
正确答案:E -
第5题：
激光扫描共聚焦显微镜中，焦平面上的点同时聚焦在（）和（）。
正确答案:照明针孔；检测针孔 -
第6题：
问答题简述透射电子显微镜、扫描电子显微镜、扫描隧道显微镜和原子力显微镜的工作原理正确答案： 透射电子显微镜：从加热到高温的钨丝发射电子，在高电压作用下以极快的速度射出，聚光镜将电子聚成很细的电子束，射在试样上；电子束透过试样后进入物镜，由物镜、中间镜成像在投影镜的物平面上，这是中间像；然后再由投影镜将中间像放大，投影到荧光屏上，形成最终像扫描
扫描电子显微镜：入射电子与样品之间相互作用激发出二次电子二次电子收集极将向各方向发射的二次电子汇集起来，再经加速极加速射到闪烁体上转变成光信号经过光导管到达光电倍增管，使光倍号再转变成电信号经视频放大器放大后输出送至显像管，调制显像管的亮度在荧光屏上便呈现一幅亮暗程度不同的反映样品表面起伏程度（形貌）的二次电子像
扫描隧道显微镜：在样品与探针之间加上小的探测电压，调节样品与探针间距控制系统，使针尖靠近样品表面，当针尖原子与样品表面原子距离≤10Å时，由于隧道效应，探针和样品表面之间产生电子隧穿，在样品的表面针尖之间有一纳安级电流通过电流强度对探针和样品表面间的距离非常敏感，距离变化1Å，电流就变化一个数量级左右移动探针或样品，使探针在样品上扫描
原子力显微镜：将一个对微弱力极敏感的弹性微悬臂一端固定另一端的针尖与样品表面轻轻接触当针尖尖端原子与样品表面间存在极微弱的作用力（10-8--10-6N）时，微悬臂会发生微小的弹性形变，针尖和样品之间的作用力与距离有强烈的依赖关系（遵循胡克定律）解析： 暂无解析 -
第7题：
填空题激光扫描共聚焦显微镜的主要部件有_________、_________、_________和__________。正确答案： 激光器,扫描头,显微镜,计算机解析： 暂无解析 -
第8题：
单选题以下显微镜的光源为激光的是（）A微分干涉显微镜
B激光扫描共聚焦荧光显微镜
C扫描电子显微镜
D透射电子显微镜
正确答案： D解析： 暂无解析 -
第9题：
多选题电子显微镜包括（）A透射电子显微镜
B扫描电子显微镜
C激光共聚焦电子显微镜
D荧光电子显微镜
E扫描隧道显微镜
正确答案： C,E解析： 暂无解析 -
第10题：
名词解释题laser scanning confocal microscope;LSCM （激光扫描共聚焦显微镜）正确答案： 利用激光点作为荧光的激发光并通过扫描装置对标本进行连续扫描，并通过空间共轭光阑（针孔）阻挡离焦平面光线而成像的一种显微镜。是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。解析： 暂无解析 -
第11题：
判断题共聚焦激光扫描显微镜通过把焦点集中在两束激光汇聚的地方，使我们看到的图像更清晰。A对
B错
正确答案： 错解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题简述激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）的主要功能有哪些？正确答案： L.SCM的主要功能有：
1.细胞，组织光学切片该功能也被形象地称为“细胞CT”或“显微CT”。
2.三维图像重建。
3.对活细胞的长时间观察。
4.细胞内酸碱度及细胞离子的定量测定。
5.荧光漂白恢复技术（FRAP）它利用高强度脉冲式激光照射细胞的某一区域，造成该区域荧光分子的漂白，而该区域周围的非漂白荧光分子将以一定速率向受照区扩散，LSCM可直接对其扩散速率进行监测。FRAP可用于细胞间通讯、细胞骨架的构成、生物膜结构和大分子组装等的研究。
6.细胞间通讯的研究。7.细胞膜流动性测定和光活化技术等功能。解析： 暂无解析 -
第13题：
简述激光扫描共聚焦显微镜的结构特点及其在医学领域的主要用途。
正确答案: 激光共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置，利用计算机进行图像处理，使用紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。另外在其载物台上加一个微量步进马达，可使载物台沿着Z轴上下移动，将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上，样品的不同层面的图像都能清楚地显示，成为连续的光切图像。激光扫描共聚焦显微镜具有高灵敏度、高分辨率、高放大率等特点。在医学领域主要用于细胞三维重建、细胞定量荧光测定、细胞内钙离子、pH值和其它离子的动态分析、细胞间通讯和膜的流动性等过程的研究。 -
第14题：
关于激光扫描共聚焦显微镜，下列正确的描述包括（）
- A、以单色激光作为光源
- B、激光变成点光源后聚焦到标本成为点照明
- C、点光源激光束在标本的整个聚焦平面进行光点扫描后在荧光屏上成像
- D、所用标本需经过超薄切片
- E、图像信息要经过电脑三维重建处理
正确答案:A,B,C,E -
第15题：
激光共焦扫描显微镜不同于普通光学显微镜的结构特点是什么？
正确答案:激光扫描共焦显微镜：用激光作光源，进行逐点或逐行的快速扫描，并成像。
分辨力是普通光学显微镜的3倍，可重构样品的三维结构。而普通光学显微镜所用光源是普通光源。 -
第16题：
简述激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）的主要功能有哪些？
正确答案:L.SCM的主要功能有：
1.细胞，组织光学切片该功能也被形象地称为“细胞CT”或“显微CT”。
2.三维图像重建。
3.对活细胞的长时间观察。
4.细胞内酸碱度及细胞离子的定量测定。
5.荧光漂白恢复技术（FRAP）它利用高强度脉冲式激光照射细胞的某一区域，造成该区域荧光分子的漂白，而该区域周围的非漂白荧光分子将以一定速率向受照区扩散，LSCM可直接对其扩散速率进行监测。FRAP可用于细胞间通讯、细胞骨架的构成、生物膜结构和大分子组装等的研究。
6.细胞间通讯的研究。7.细胞膜流动性测定和光活化技术等功能。 -
第17题：
填空题激光扫描共聚焦显微镜中，焦平面上的点同时聚焦在（）和（）。正确答案： 照明针孔,检测针孔解析： 暂无解析 -
第18题：
问答题简述激光扫描共聚焦显微镜的特点。正确答案： 激光扫描共聚焦显微镜是在荧光显微镜的基础上，加装了激光光源和扫描装置。与普通荧光显微镜相比，激光扫描共焦显微镜具有明显的优点：其激光光源为单色平行光，成像聚焦后焦深小，纵向分辨率高；其光学系统物象共扼，扫描后可得到信噪比极高的光学横断面，不同焦平面的光学切片经三维重建后能得到样品的三维立体结构；具有高灵敏度、高分辨率和高放大倍数等特点，减少了光淬灭的影响。解析： 暂无解析 -
第19题：
问答题简述激光扫描共聚焦显微镜的工作原理。正确答案： 激光扫描共聚焦显微镜利用单色激光扫描束经过照明针孔形成点光源，对标本内焦平面上的每一点进行扫描，标本上的被照射点，在检测器的检测针孔处成像，由检测针孔后的光电倍增管逐点或逐线接收，迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像，照明针孔与检测针孔相对于物镜焦平面是共轭的。焦平面的点同时聚焦于照明针孔和检测针孔，焦平面以外的点不会在检测针孔处成像，这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面，克服了普通荧光显微镜图像模糊的缺点。另外在显微镜的载物台上加一个微量步进马达，可使载物台沿着Z轴上下移动，将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上，样品的不同层面的图像都能清楚地显示，成为连续的光切图像。解析： 暂无解析 -
第20题：
问答题简述激光扫描共聚焦显微镜的结构特点及其在医学领域的主要用途。正确答案： 激光共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置，利用计算机进行图像处理，使用紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。另外在其载物台上加一个微量步进马达，可使载物台沿着Z轴上下移动，将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上，样品的不同层面的图像都能清楚地显示，成为连续的光切图像。激光扫描共聚焦显微镜具有高灵敏度、高分辨率、高放大率等特点。在医学领域主要用于细胞三维重建、细胞定量荧光测定、细胞内钙离子、pH值和其它离子的动态分析、细胞间通讯和膜的流动性等过程的研究。解析： 暂无解析 -
第21题：
名词解释题激光扫描共聚焦显微镜正确答案： 以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点，使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像，而焦面以外的漫射光不参加成像，改变焦平面，可获得细胞或原标本不同层次的图像，从而得到样品的三维结构图像。解析： 暂无解析 -
第22题：
名词解释题聚焦扫描激光显微镜（confocal scanning laser microscope，CSLM）正确答案： 这种显微镜采用激光作为光源，每次仅对一个点进行照射，从而大大减少样品其他部分发出的杂散光的干扰。观察时通过激光器或载物台扫描，计算机处理，最终获得反差鲜明、高分辨率的三维立体数字图像。解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题简述激光扫描共聚焦显微镜的基本原理、特点及应用领域。正确答案： 基本原理：
激发光经过照明针孔形成光源，通过激发滤光片被分束器反射，由显微物镜聚焦到三维样品内，并在垂直于光轴的焦点平面上扫描。焦平面和焦平面上下被照射的区域所发出的荧光又被物镜收集，通过分束器和发射滤光片。在探测器前方有一共焦针孔，照明针孔和共焦针孔相对于物镜焦平面是共轭的，因此只有焦平面发出的荧光能聚焦于共焦针孔并通过针孔到达探测器PMT或CCD。焦平面以上或以下的点不能在探测针孔处成像，所以焦平面以为发出的光被针孔挡住，对共焦图像的贡献很小。这样得到的共聚焦图像基本上仅来自于焦平面上的光信息，即被焦平面切割的断层。如果逐步调节样品纵轴的位置，可产生样品的多幅断层图像，细胞或组织各个横截面的图像都能清楚的显示。这种成像方法称为共焦扫描显微镜层析成像方法。通过图像的三维重建技术，则能得到样品的三维立体图像。
特点：
1.散射背景小，图像对比度好，探测灵敏度高，成像质量好；
2.可进行三维扫描成像；
3.采用激光光源；
4.配备了功能强大的图像处理软件。
应用领域：
由于激光扫描共聚焦显微镜结合先见的数据采集、记录与处理技术，使使其在生命科学的研究中成为最先进的分子细胞生物学的分析仪器，用于观察或细胞结构及特定分子、离子的生物学变化，定量分析，以及实时定量测定等，并衍生出黏附细胞的分选、激光细胞显微外科技术、荧光漂白后恢复技术、细胞通讯技术、细胞黏膜流动性测定以及光活化技术等多个新技术和新方法。现在激光扫描共聚焦显微镜已经被广泛的用于生物学、生物化学、生理学、药理学、病理学、遗传学和组胚学以及免疫学、环境学和营养学等领域。解析： 暂无解析