如何提高用杂交筛选法进行重组噬菌斑的筛选的结果的可靠性？

题目

如何提高用杂交筛选法进行重组噬菌斑的筛选的结果的可靠性？

相似考题

1.用下列方法进行重组体的筛选，哪项说明外源基因进行了表达 ( )A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、原位菌落杂交D、Western印迹E、基因芯片技术

2.重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。将重组DNA导入大肠埃希菌最常用方法是A、磷酸钙共沉淀法B、脂质体法C、显微注射法D、噬菌体感染E、氯化钙法重组DNA技术中最常用的筛选方法是A、标志补救筛选B、插入表达筛选C、抗性筛选D、限制性内切酶酶切图谱分析E、核酸分子杂交筛选

3.与重组体的筛选无关的是A.抗药性标志选择B.分子杂交法C.酶免检测分析与重组体的筛选无关的是A.抗药性标志选择B.分子杂交法C.酶免检测分析D.克隆载体的改建E.免疫化学法

4.常用于从转化菌中筛选DNA重组体的方法不包括A、α互补筛选B、插入失活筛选C、杂交筛选D、质粒的小量快速提取E、DNA序列测定筛选

参考答案和解析
正确答案:将硝酸纤维素膜覆盖在琼脂平板表面，使之与噬菌斑直接接触，噬菌斑中大量没有被包装的游离DNA及噬菌体颗粒便一起转移到膜上。可从同一噬菌斑平板上连续印几张同样的硝酸纤维素膜，进行重复实验，而且可以使用两种或数种不同的探针筛选同一套重组子，提高结果的可靠性。
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  • 第1题：

    重组体的筛选方法有


    A.抗药标志筛选
    B.标志补救
    C.分子杂交
    D.免疫化学

    答案：A,B,C,D
    解析：

  • 第2题：

    用下列方法进行重组体的筛选，只有（）说明外源基因进行了表达。

    • A、Southem印迹杂交
    • B、Northem印迹杂交
    • C、Western印迹
    • D、原位菌落杂交

    正确答案:C

  • 第3题：

    关于环境应力筛选与可靠性统计试验关系的正确说法有（）。

    • A、环境应力筛选是可靠性统计试验的预处理工艺
    • B、任何提交用于可靠性统计试验的样本必须经过环境应力筛选
    • C、先进行可靠性统计试验，后进行环境应力筛选
    • D、不进行环境应力筛选，直接进行可靠性统计试验

    正确答案:A,B

  • 第4题：

    可以用核酸杂交筛选法进行（）的筛选。


    正确答案:重组噬菌斑

  • 第5题：

    用免疫化学法筛选重组体的原理是（）

    • A、根据外源基因的表达
    • B、根据载体基因的表达
    • C、根据mRNA同DNA的杂交
    • D、根据DNA同DNA的杂交

    正确答案:A

  • 第6题：

    如何筛选重组体？


    正确答案: （1）抗药性筛选
    这是利用载体DNA上组装的抗药性选择标记进行筛选的方法。
    常用的抗生素筛选剂：氨苄青霉素（ampicillin，Ap或Amp）；氯霉素（chloramphenicol，Cm或Cmp）；卡那霉素（kanamycin，Kn或Kan）；四环素（tetracymic，Tc或Tet）；链霉素（strentomycin，Sm或Str）。
    （2）插入失活筛选法
    检测克隆载体携带有外源DNA的通常方法是插入失活。经过抗药性筛选获得的大量转化子中既包含所需要的重组子，也包含非重组子。为了进一步筛选出重组子，可利用质粒载体的抗药性进行再次筛选。
    （3）插入表达筛选法
    与插入失活相反，插入表达法是外源目的基因插入特定载体后，能激活用于筛选操作的标记基因的表达，由此进行转化子的筛选。设计载体时，在筛选标记基因前面连接一段具有抑制作用的负调控序列，插入外源DNA将使该负调控序列失活，其下游的筛选标记基因才能表达。
    （4）环丝氨酸筛选
    这种筛选方法只使用于抗四环素的基因插入失活的重组克隆筛选。
    （5）显色反应筛选法
    显色反应可以在平板上或膜上直接显示出重组克隆，不仅方便而且灵敏。

  • 第7题：

    单选题
    分子杂交中的菌落杂交和噬菌斑杂交是指（）。
    A

    Southern杂交

    B

    Northern杂交

    C

    Western杂交

    D

    原位杂交


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    填空题
    根据噬菌斑的清晰程度筛选重组体主要是 cⅠ基因的（）。

    正确答案： 失活
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    判断题
    以λ噬菌体为载体的筛选方法比较简便，凡能形成噬菌斑的就一定是重组体。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 错
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    用下列方法进行重组体的筛选，只有（）说明外源基因进行了表达。
    A

    Southem印迹杂交

    B

    Northem印迹杂交

    C

    Western印迹

    D

    原位菌落杂交


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    用下列方法进行重组体的筛选，哪项说明外源基因进行了表达（）
    A

    Southern印迹杂交

    B

    Northern印迹杂交

    C

    原位菌落杂交

    D

    Western印迹

    E

    基因芯片技术


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    关于噬菌斑筛选法的原理，下面哪一种说法不正确？（）
    A

    噬菌斑颜色变化

    B

    cⅠ基因失活造成的噬菌斑的变化

    C

    对 IPTG的分解能力

    D

    对X-gal 的分解与否


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    如何筛选与鉴定重组体？


    正确答案: 鉴定
    （1）报告基因的检测法
    （2）目的基因分子杂交检测方法
    筛选：
    在利用载体间接转化外源基因或直接转化处理之后，大部分受体细胞是没有被转化的，这就需要采用特定的方法将转化细胞与未转化细胞区分开来。为了淘汰未转化的细胞，人们试验了各种不同的基因作为转化的报告基因（reporter gene），包括一些显性的选择标记基因，以及可用特定方法检测其蛋白质产物的基因。其中GUS基因和NPTII基因能耐受氨基末端融合、检测简单，是目前应用最多的报告基因。在植物基因工程中双子叶植物如番茄、辣椒、马铃薯的转化及部分单子叶植物的转化用NPTII基因所抗的卡那霉素（kanamycin）来筛选。

  • 第14题：

    重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。重组DNA技术中最常用的筛选方法是（）

    • A、标志补救筛选
    • B、插入表达筛选
    • C、抗性筛选
    • D、限制性内切酶酶切图谱分析
    • E、核酸分子杂交筛选

    正确答案:C

  • 第15题：

    采用蓝白斑选择法时，蓝色菌落或噬菌斑是含有重组载体的克隆。


    正确答案:错误

  • 第16题：

    分子杂交中的菌落杂交和噬菌斑杂交是指（）。

    • A、Southern杂交
    • B、Northern杂交
    • C、Western杂交
    • D、原位杂交

    正确答案:D

  • 第17题：

    DNA重组中用来筛选的方法有（）.

    • A、PCR法
    • B、平板筛选法
    • C、原位杂交技术
    • D、人工检验法

    正确答案:A,B,C

  • 第18题：

    下列能区分期望重组子的筛选方法是（）

    • A、抗药性筛选法
    • B、营养缺陷筛选法
    • C、显色筛选法
    • D、次级克隆法
    • E、菌落原位杂交法

    正确答案:E

  • 第19题：

    单选题
    用菌落杂交法筛选重组体时，（） 。
    A

    需要外源基因的表达

    B

    不需要外源基因的表达

    C

    要根据克隆基因同探针的同源性

    D

    上述说法都正确


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    名词解释题
    Plaquehybridization噬菌斑杂交

    正确答案： 指的是将噬菌斑拓印在硝酸纤维膜上变性处理后通过核酸杂交，来筛选含有特定基因的噬菌斑的方法。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    多选题
    DNA重组中用来筛选的方法有（）.
    A

    PCR法

    B

    平板筛选法

    C

    原位杂交技术

    D

    人工检验法


    正确答案： A,C
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    单选题
    重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。重组DNA技术中最常用的筛选方法是（）
    A

    标志补救筛选

    B

    插入表达筛选

    C

    抗性筛选

    D

    限制性内切酶酶切图谱分析

    E

    核酸分子杂交筛选


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    下列筛选重组体的方法中，不属于遗传学的方法是：（）。
    A

    插入失活法

    B

    显色反应选择法

    C

    噬菌斑选择法

    D

    R 环分析法


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

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