探针的标记法有哪些？

第1题：

第2题：

下列关于探针标记方法的叙述哪项正确？（）

• A、末端标记的探针常用于杂交分析
• B、酶促标记法是最常用的标记方法，产生比化学标记法高的敏感性
• C、末端标记的探针比均匀标记的探针有更高的活性
• D、酶促标记法简便、快速、标记均匀
• E、均匀标记的探针主要用于DNA的测序

正确答案:B

第3题：

探针的种类和优缺点有哪些？

正确答案: 1、cDNA探针：通过逆转录获得cDNA后，将其克隆于适当的克隆载体，通过扩增重组质粒而使cDNA得到大量的扩增。提取质粒后分离纯化作为探针使用。它是目前应用最为广泛的一种探针。
2、基因组探针：从基因组文库里筛选得到一个特定的基因或基因片段的克隆后，大量扩增、纯化，切取插入片段，分离纯化为探针。
3、寡核苷酸探针：根据已知的核酸顺序，采用DNA合成仪合成一定长度的寡核苷酸片段作为探针。
4、RNA探针：采用基因克隆和体外转录的方法可以得到RNA或反义RNA作为探针。

第4题：

切口平移（nick translation）标记探针的主要步骤有哪些？

正确答案: （1）DNaseI造成切口；
（2）DNA聚合酶III的5′→3′外切核酸酶进行切割；
（3）DNA聚合酶III的5′→3′合成酶进行修补；
（4）在修补过程中，随着切口（nick）的移动，将放射性的底物掺入到双链DNA中。

第5题：

制备基因探针的方法有哪些？

正确答案: 制备方法：
（1）缺口平移法
（2）随机引物标记法
（3）生物素标记法（标记方法可分为参入法、末端标记法和光化学法）
（4）酶标记法
（5）半抗原标记法

第6题：

第7题：

第8题：

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

核酸探针的种类有哪些？各有什么特点？

正确答案: A.基因探针根据标记方法不同可粗分为放射性探针和非放射性探针两大类。
B.根据探针的核酸性质不同又可分为DNA探针，RNA探针，cDNA探针及寡核苷酸探针等几类。
C.DNA探针还有单链和双链之分
各自特点：
DNA探针：最常用的核酸探针；主要特点有：
1.这类探针多克隆在质粒载体中，可以无限繁殖，取之不尽，制备方法简便。
2.DNA探针不易降解。一般可有效抑制DNA酶活性。
3.DNA探针的标记方法较成熟，有多种方法可供选择。（多为某一基因的全部或部分序列，或某一非编码序列，须是特异的）
cDNA探针：互补于mRNA的DNA分子（一般都为编码序列）。cDNA是由RNA经逆转录酶催化产生的不含有内含子序列，尤其适合于基本表达的检测。
RNA探针：主要用于研究目的，而不是用于检测。高杂交效率，但也易降解、标记方法复杂（标记效率低）。
寡核酸探针：
1.链短、序列复杂度低、分子量小，所以和等量靶位点完全杂交的时间比克隆探针短。
2.寡核苷酸探针可识别靶序列内1个碱基对变化。
3.一次可大量合成寡核苷酸探针，价格低廉，可用酶学或化学方法修饰以进行非放射性标记物的标记。

第14题：

下列标记探针的方法中最简单有效的方法是（）。

• A、代谢标记法
• B、磷酸化法
• C、切口平移法
• D、体外转录法
• E、引物延伸法

正确答案:D

第15题：

三棱镜的标记方法有（）。

• A、老式德国标记法
• B、新式美国标记法
• C、60度标记法
• D、360度标记法

正确答案:D

第16题：

下列关于探针标记方法的叙述正确的是（）

• A、酶促标记法是最常用的标记方法，产生比化学标记法高的敏感性
• B、酶促标记法简便、快速、标记均匀
• C、末端标记的探针比均匀标记的探针有更高的活性
• D、末端标记的探针常用于杂交分析
• E、均匀标记的探针主要用于DNA的测序

正确答案:A

第17题：

什么是基因探针？制备基因探针的方法有哪些？

正确答案: 基因探针（probE.是一段与目的基因互补的核酸序列：DNA或RNA，用来待测样品DNA或RNA进行核酸分子杂交，可判断两者的同源程度。
制备方法：
（1）缺口平移法
（2）随机引物标记法
（3）生物素标记法（标记方法可分为参入法、末端标记法和光化学法）
（4）酶标记法
（5）半抗原标记法

第18题：

第19题：

第20题：

第21题：

第22题：

第23题：