简述PCR扩增包括3个步骤。

第1题：

第2题：

PCR扩增的一个循环包括的三个步骤有（）。

• A、预变性
• B、变性
• C、退火
• D、延伸

正确答案:B,C,D

第3题：

PCR的特点不包括（）。

• A、只需微量模板
• B、只需数小时
• C、扩增产物量大
• D、底物必须标记
• E、变性、复性、延伸三个步骤循环进行

正确答案:D

第4题：

简述PCR的操作步骤。

正确答案: 标准的PCR过程分为三步：
D.NA变性：（90℃-96℃）双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA
退火：（25℃-65℃）系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。
延伸：（70℃-75℃）在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端→5′端延伸，合成与模板互补的DNA链。

第5题：

简述PCR扩增的原理。

正确答案: 用随即排列的10聚体寡核苷酸单链为引物，以研究对象的基因组DNA为模板进行DNA扩增。
反应程序为：将模板DNA在94℃变性解链，然后在36℃的温度下使引物和模板退火，如果某两个引物与模板的结合位点之间距离在可扩增的范围之内，而且分别位于互补的两条单链上，同时引物的3′端相对，当温度提高到72℃时，耐高温的DNA聚合酶进行扩增。
以上步骤经30－45循环后，产物经琼脂糖凝胶电泳，EB染色后可用紫外光进行检测。

第6题：

简述PCR扩增步骤。

正确答案: 变性；退火；延伸。

第7题：

关于聚合酶链反应（PCR）的叙述错误的是（）

• A、PCR技术是一种体外DNA扩增技术
• B、PCR技术能够快速特异地扩增任何目的基，因或DNA
• C、PCR方法进行的基因扩增过程类似于体内
• D、PCR方法需要特定的引物
• E、PCR技术需要在恒温环境进行

正确答案:E

第8题：

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

简述PCR基因扩增仪的温度控制包括包括温度的准确性、均一性以及升降温度等方面。

正确答案: （1）准确性是指样品孔温度与设定温度的一致性；
（2）均一性是指样品孔间的温度差异，关系到不同样品孔之间反应结果的一致性；
（3）升降温的速度升降温速度快，可以缩短反应进行的时间，提高工作效率，并提高PCR反应特异性。

第15题：

在荧光定量PCR中，如果扩增的片段较小，通常把退火与延伸步骤合并。（）

正确答案:正确

第16题：

简述PCR基因扩增仪的实际应用。

正确答案:PCR基因扩增仪广泛应用于医学领域，主要包括：感染性疾病的分子诊断和研究;遗传性疾病的分子诊断和研究;恶性肿瘤的分子诊断和研究; PCR扩增仪在移植配型上的应用;PCR扩增仪在法医学上的应用;PCR扩增仪在分子生物学中其他领域的应用。

第17题：

PCR基因扩增仪的温度控制包括哪些方面？

正确答案: PCR基因扩增仪的温度控制是决定PCR反应能否成功的关键，主要包括温度的准确性、均一性以及升降温速度等方面。
（1）温度的准确性是指样品孔温度与设定温度的一致性；
（2）温度的均一性是指样品孔间的温度差异，关系到不同样品孔之间反应结果的一致性；
（3）升降温的速度：升降温速度快，可以缩短反应进行的时间，提高工作效率，并提高PCR反应特异性。
对梯度PCR仪来说，除此以外，还必须考虑仪器在梯度模式和标准模式下是否具有同样的温度特性。

第18题：

对基因重排采用的基因诊断方法包括（）。

• A、核酸杂交
• B、直接PCR扩增
• C、PCR-SSCP
• D、PCR-RFLP
• E、RT-PCR

正确答案:A,B

第19题：

什么是PCR扩增法，其原理、操作步骤、反应过程和意义？

正确答案: PCR技术是一种用于体外扩增位于两端已知序列之间的DNA区段的分子生物学技术。
PCR原理：PCR技术的实质为体内DNA复制的体外模拟。即使双链DNA热变性而分开成为单链DNA，退火后在低温下，两个与模板互补的引物与单链DNA配对结合，再在中温下利用TAGDNA聚合酶的聚合活性和热稳定性进行聚合（延伸）反应。每经过一次变性、退火和延伸为一个循环，所扩增的特定DNA序列数是按几何指数增长。
PCR技术操作步骤为：
①反复将目的基因片段进行热变性处理，令其双股链解开；
②进行反链杂交、退火、形成单链；
③用TagDNA聚合酶沿DNA链全程合成出两股双链DNA分子；
④然后开始第二个反应周期。每个反应周期，特异性目的基因可扩增一倍。用n代表反应周期数，则特异性DNA目的基因片段便按2^n指数扩增下去，一直扩增至所需数量为止。
PCR反应过程：
①DNA的变性：DNA双链在加热或碱性条件下，双链的氢键断裂为单链DNA，一般解链温度为85-95℃；
②引物与单链DNA退火结合：单链DNA在温度逐渐降低时，重新与其互补的引物或另一条单链结合形成双链，称为退火；
③引物延伸：以目标DNA为模板，以引物为固定起点，以四种脱氧核苷三磷酸为底物在DNA聚合酶的作用下，由5’端向3’端的方向进行DNA复制。
意义：PCR技术能在短时间内大量扩增目的基因DNA片段，且全部操作已实现自动化，这一技术不仅广泛应用于基因重组操作中的基因扩增及其检出，而且在研究火花的致癌基因、等会基因序列变异，以及分子生物学、医学、食品、农业、化工的许多领域中都得到广泛的应用。

第20题：

第21题：

第22题：

第23题：