原生质体融合方法及原理是什么？
题目
原生质体融合方法及原理是什么？
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第1题：
生物育种的方法可分为原生质体融合和基因工程改造。
正确答案:正确 -
第2题：
简述X平板法培养植物原生质体的原理和方法。
正确答案: 为了减少一部恩细胞和组织所产生的有害物质对其他存活细胞的影响，将一定量的活性炭加到培养基，以改善细胞或组织的生长与细胞群落的形成。
将固体平板分成四块，在2和4中加入储备培养基（含1%活性炭），1和3不加活性炭培养原生质体。 -
第3题：
什么叫植物原生质体？如何进行植物原生质体的融合？
正确答案: 脱去细胞壁的细胞叫原生质体，两亲本菌株的选择和遗传标记的制作（选择不同的营养缺陷型；原生质体的制备（高渗条件）；原生质体再生（测定再生率）；融合（PEG、离心沉淀、电脉冲等）；融合子的检出（直接检出法和间接检出法）；实用性菌株的筛选。 -
第4题：
人工获得一个杂种植株，需要下列哪项步骤（）
- A、分离原生质体；诱导原生质体融合；组织培养；得到杂种植株
- B、分离原生质体；原生质体融合；杂种植株
- C、获取细胞；原生质融合；组织培养；杂种植株
- D、获取细胞；原生质直接融合；组织培养
正确答案:A -
第5题：
酵母菌原生质体融合育种的原理及操作步骤？
正确答案: 原理：
原生质体融合就是用酶法将细胞膜外侧的细胞壁除掉，制备成无细胞壁的球状细胞体即原生质体，将两种来源于微生物细胞A和B的原生质体，在融合诱导剂的存在下等量混合起来，可使原生质体表面形成电极性，相互之间容易吸引、脱水黏合而形成聚合物，进而使原生质体收缩变形，紧密接触处的膜先形成原生质桥，逐渐增大而实现融合。融合的原生质体在适当条件下可再生出细胞壁而形成一个新细胞。
操作步骤：
①标记菌株的筛选和稳定性验证。
②酵母原生质体制备。
③等量原生质体加聚乙二醇促进融合。
④涂布于再生培养基，再生出菌落。
⑤选择性培养基上划线生长，分离验证，挑取融合子进一步试验、保藏。
⑥生产性能筛选。 -
第6题：
简述原生质体融合的定义及意义。
正确答案: 两个带有不同遗传标记（营养缺陷、抗药性、温度敏感、色素等）的亲本通过酶解作用，使其细胞壁脱除或部分脱除，制成原生质体，并在高渗条件下混合，用聚乙二醇（PEG）促进其发生融合，接着两亲本遗传物质交换，从而实现遗传重组。然后高渗条件下，重新生成细胞壁，在筛选培养基上生长筛选出具有理想性状的融合子。
意义：打破了微生物种属间的界限，使远源杂交成为可能。 -
第7题：
试述酵母菌原生质体融合育种的原理及操作步骤？
正确答案:原理：原生质体融合就是用酶法将细胞膜外侧的细胞壁除掉，制备成无细胞壁的球状细胞体即原生质体，将两种来源于微生物细胞A和B的原生质体，在融合诱导剂的存在下等量混合起来，可使原生质体表面形成电极性，相互之间容易吸引、脱水黏合而形成聚合物，进而使原生质体收缩变形，紧密接触处的膜先形成原生质桥，逐渐增大而实现融合。融合的原生质体在适当条件下可再生出细胞壁而形成一个新细胞。
操作步骤：
①标记菌株的筛选和稳定性验证。
②酵母原生质体制备。
③等量原生质体加聚乙二醇促进融合。
④涂布于再生培养基，再生出菌落。
⑤选择性培养基上划线生长，分离验证，挑取融合子进一步试验、保藏。
⑥生产性能筛选。 -
第8题：
问答题原生质体融合方法及原理是什么？正确答案： 化学法诱导融合：在无菌条件下按比例混合双亲原生质体→滴加PEG溶液，摇匀，静置→滴加高钙高pH溶液，摇匀，静置→滴加原生质体培养液洗涤数次→离心获得原生质体细胞团→筛选、再生杂合细胞。
物理法诱导融合：将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后，插入微电极，接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲，则使原生质体质膜被击穿而发生融合。解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题简述微生物原生质体融合育种的方法。正确答案： 1、标记菌株的筛选2、原生质体的制备3、原生质体的再生试验4、原生质体的融合5、融合子的选择——融合子的遗传分析6、优良菌株的筛选解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题简述X平板法培养植物原生质体的原理和方法。正确答案： 为了减少一部恩细胞和组织所产生的有害物质对其他存活细胞的影响，将一定量的活性炭加到培养基，以改善细胞或组织的生长与细胞群落的形成。
将固体平板分成四块，在2和4中加入储备培养基（含1%活性炭），1和3不加活性炭培养原生质体。解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题简述原生质体融合的定义及意义。正确答案： 两个带有不同遗传标记（营养缺陷、抗药性、温度敏感、色素等）的亲本通过酶解作用，使其细胞壁脱除或部分脱除，制成原生质体，并在高渗条件下混合，用聚乙二醇（PEG）促进其发生融合，接着两亲本遗传物质交换，从而实现遗传重组。然后高渗条件下，重新生成细胞壁，在筛选培养基上生长筛选出具有理想性状的融合子。
意义：打破了微生物种属间的界限，使远源杂交成为可能。解析： 暂无解析 -
第12题：
填空题原生质体融合中杂种细胞的鉴定方法包括（）、（）、（）和（）。正确答案： 形态性状、染色体计数、同工酶、分子标记解析： 暂无解析 -
第13题：
原生质体融合技术的一般程序包括（）、（）、原生质体的再生和融合子的筛选。
正确答案:原生质体的制备；原生质体的融合 -
第14题：
原生质体融合的步骤怎样？融合成功的标志是什么？
正确答案:步骤：先质膜融合，再核融合。
标志：细胞壁的再生。 -
第15题：
植物原生质体融合
正确答案: 脱壁植物细胞通过物理、化学等因子的诱导，两个原生质体合并在一起形成融合细胞的过程。 -
第16题：
原生质体融合要经过哪些过程？
正确答案:1、选择亲株为了获得高产优质的融合子，首先应该选择遗传性状稳定且具有优势互补的两个亲株。
2、原生质体制备去除细胞壁是制备原生质体的关键。一般都采用酶解法去壁。根据微生物细胞壁组成和结构的不同，需分别采用不同的酶，如溶菌酶，纤维素酶，蜗牛酶等。
3、原生质体融合早期的原生质体融合实验中，曾采用离心力作用使两种细胞的原生质体紧紧挤在一起以帮助融合，或者在冷的渗透稳定剂中使原生质体密集凝聚，但这些方法的效果不佳。
4、原生质体再生原生质体再生就是使原生质体重新长出细胞壁，恢复完整的细胞形态结构。 -
第17题：
原生质体纯化的两种方法是什么？
正确答案: 上浮法：是将酶解的原生质体与蔗糖溶液（23％左右）混合。
下沉法：是先将原生质体与13％的甘露醇混合，（1分）然后加到23％的蔗糖溶液顶部，形成一个界面。
两种方法中，均在1000g下离心5-10分钟，会在蔗糖溶液顶部形成一条原生质体带。用吸管将带轻轻地吸出来，用培养基悬浮离心，然后稀释到104-l05个／ml，用于培养。 -
第18题：
Protoplast fusion（原生质体融合）
正确答案: 用酶分别酶解两个两个出发菌株的细胞壁，在高渗环境中释放出原生质，将他们混合，在助溶剂或电场作用下使他们互相凝聚，发生细胞融合，实现遗传重组 -
第19题：
问答题体细胞杂交即原生质体融合的具体环节是什么？正确答案： 原生质体的分离和培养；原生质体间的融合；融合后杂种细胞的选择；诱导杂种细胞产生愈伤组织和再生植株。解析： 暂无解析 -
第20题：
问答题酵母菌原生质体融合育种的原理及操作步骤？正确答案： 原理：
原生质体融合就是用酶法将细胞膜外侧的细胞壁除掉，制备成无细胞壁的球状细胞体即原生质体，将两种来源于微生物细胞A和B的原生质体，在融合诱导剂的存在下等量混合起来，可使原生质体表面形成电极性，相互之间容易吸引、脱水黏合而形成聚合物，进而使原生质体收缩变形，紧密接触处的膜先形成原生质桥，逐渐增大而实现融合。融合的原生质体在适当条件下可再生出细胞壁而形成一个新细胞。
操作步骤：
①标记菌株的筛选和稳定性验证。
②酵母原生质体制备。
③等量原生质体加聚乙二醇促进融合。
④涂布于再生培养基，再生出菌落。
⑤选择性培养基上划线生长，分离验证，挑取融合子进一步试验、保藏。
⑥生产性能筛选。解析： 暂无解析 -
第21题：
填空题原生质体融合技术的一般程序包括（）、（）、原生质体的再生和融合子的筛选。正确答案： 原生质体的制备,原生质体的融合解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题试述酵母菌原生质体融合育种的原理及操作步骤？正确答案： 原理：原生质体融合就是用酶法将细胞膜外侧的细胞壁除掉，制备成无细胞壁的球状细胞体即原生质体，将两种来源于微生物细胞A和B的原生质体，在融合诱导剂的存在下等量混合起来，可使原生质体表面形成电极性，相互之间容易吸引、脱水黏合而形成聚合物，进而使原生质体收缩变形，紧密接触处的膜先形成原生质桥，逐渐增大而实现融合。融合的原生质体在适当条件下可再生出细胞壁而形成一个新细胞。
操作步骤：
①标记菌株的筛选和稳定性验证。
②酵母原生质体制备。
③等量原生质体加聚乙二醇促进融合。
④涂布于再生培养基，再生出菌落。
⑤选择性培养基上划线生长，分离验证，挑取融合子进一步试验、保藏。
⑥生产性能筛选。解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题原生质体培养有哪些常用方法？用哪些方法可以实现原生质体融合？正确答案： 培养方法可以分为固体培养法和液体培养法两大类，后来又由此派生出一些不同形式的原生质体培养方法。常用的有液体浅层培养法、固体平板法、悬滴培养法等。
原生质体融合有自发融合、诱导融合。其中诱导融合的方法有：硝酸钠法、多聚化合物法、高pH高Ca++法、聚乙二醇法、还有电融合等方法。解析： 暂无解析