DNA重组是酶在生物技术上的成功应用，请简述DNA重组的步骤？
题目
DNA重组是酶在生物技术上的成功应用，请简述DNA重组的步骤？
相似考题
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第1题：
关于重组DNA技术的叙述，错误的是
A.质粒，噬菌体均可作为栽体
B.限制性内切醉是主要工具酶之一
C.重组DNA由栽体DNA和目标DNA组成
D.重组DNA分子经转化或转染可进入宿主细胞
E.进入细胞内的重组DNA均可表达目标蛋白答案：E解析：。知识点：重组DNA技术 -
第2题：
关于重组DNA技术的叙述，错误韵是A.质粒、噬菌体可作为载体
B.限制性内切酶是主要工具酶之一
C.重组DNA由载体DNA和目标DNA组成
D.重组DNA分子经转化或传染可进入宿主细胞
E.进入细胞内的重组DNA均可表达目标蛋白答案：E解析：DNA重组技术常用的工具酶包括限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、反转录酶、多聚核酸激酶和末端转移酶，其中限制性核酸内切酶具有特别重要的意义。充当克隆载体的分子有质粒、噬菌体和病毒，它们经适当改造后成为具有自我复制、表达功能的克隆载体。将目的基因与载体DNA通过连接酶共价连接在一起，即DNA的体外重组。 -
第3题：
DNA重组的步骤包括( )A.将重组DNA导人受体细胞
B.将外源DNA与载体连接
C.培养细胞以扩增重组DNA
D.选出含有重组体的克隆答案：A,B,C,D解析：一个完整的基因克隆过程包括目的基因的获得、克隆基因载体的选择、目的基因与载体的连接、重组DNA借载体导入受体细胞、筛选含重组载体的转化细胞等。 -
第4题：
DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。DNA重组技术的应用不包括（）
- A、基因诊断
- B、基因治疗
- C、转基因和基因敲除
- D、单克隆抗体制备
- E、基因工程药物、疫苗和抗体
正确答案:D -
第5题：
DNA克隆的基本步骤是（）。
- A、构建重组DNA分子→选择增殖细胞克隆→转化→得到重组DNA克隆
- B、构建重组DNA分子→选择增殖细胞克隆→得到重组DNA克隆→转化
- C、构建重组DNA分子→转化→选择增殖细胞克隆→得到重组DNA克隆
- D、细胞克隆选择增殖→构建重组DNA分子→转化→得到重组DNA克隆
正确答案:C -
第6题：
简述DNA重组修复的步骤。
正确答案:当DNA分子的损伤面较大，来不及修复就进行复制时，损伤部位因无模板指引，复制出的子链出现缺口，这时靠组蛋白RecA的核酸酶活性将另一段健康的母链与缺口部位进行交换，填补缺口。健康母链出现的缺口，以新合成的子链为模板，借助polI和连接酶的作用，填补缺口。 -
第7题：
什么是DNA重组（基因克隆）？简述DNA重组的步骤及其用途。
正确答案:基因克隆（gene cloning）是指含有单一DNA重组体的无性系或指将DNA重组体引进受体细胞中，建立无性系的过程。一个完整的基因克隆过程包括：
（1）选择合适的目的基因和栽体；
（2）用限制性内切酶处理目的基因和栽体；
（3）连接目的基因与栽体；
（4）将重组体导入受体细胞。
（5）筛选转化细胞并扩大培养。基因克隆技术可用于构建基因组文库和cDNA文库，也可以用于克隆某一特定的基因，对其进行序列分析和功能研究。 -
第8题：
简述使用DNA重组技术生产人胰岛素的基本步骤和过程。
正确答案:（1）提取人类的胰岛素基因（或称外源基因），酶解连接到另一DNA分子上（克隆载体），形成一个新的重组DNA分子；
（2）将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化（transformation）；
（3）对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定；
（4）对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外源基因是否表达；
（5）分离提存表达的人胰岛素。 -
第9题：
问答题什么是DNA重组（基因克隆）？简述DNA重组的步骤及其用途。正确答案： 基因克隆（gene cloning）是指含有单一DNA重组体的无性系或指将DNA重组体引进受体细胞中，建立无性系的过程。一个完整的基因克隆过程包括：
（1）选择合适的目的基因和栽体；
（2）用限制性内切酶处理目的基因和栽体；
（3）连接目的基因与栽体；
（4）将重组体导入受体细胞。
（5）筛选转化细胞并扩大培养。基因克隆技术可用于构建基因组文库和cDNA文库，也可以用于克隆某一特定的基因，对其进行序列分析和功能研究。解析： 暂无解析 -
第10题：
单选题在重组DNA技术中催化形成重组体DNA分子的是（ ）。ADNA聚合酶
BDNA解链酶
CDNA连接酶
DDNA拓扑酶
EDNA内切酶
正确答案： C解析：
DNA连接酶连接DNA链3'-OH末端和另一DNA链的5'-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。 -
第11题：
问答题简述重组DNA技术上产的重组人胰岛素在临床运用上的优点。正确答案： ①供应充分
②消除了动物胰岛组织中存在病原体而导致疾病意外传播的危险
③经济适用解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题简述DNA重组修复的步骤。正确答案： 当DNA分子的损伤面较大，来不及修复就进行复制时，损伤部位因无模板指引，复制出的子链出现缺口，这时靠组蛋白RecA的核酸酶活性将另一段健康的母链与缺口部位进行交换，填补缺口。健康母链出现的缺口，以新合成的子链为模板，借助polI和连接酶的作用，填补缺口。解析： 暂无解析 -
第13题：
在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的酶是DNA（ ）A.解链酶
B.聚合酶
C.连接酶
D.内切酶答案：C解析： -
第14题：
关于重组DNA技术的叙述，错误的是A.质粒、噬菌体可作为载体
B.限制性内切酶是主要工具酶之一
C.重组DNA由载体DNA和目标DNA组成
D.进入细胞内的重组DN A均可表达目标蛋白答案：D解析： -
第15题：
简述重组DNA技术上产的重组人胰岛素在临床运用上的优点。
正确答案: ①供应充分
②消除了动物胰岛组织中存在病原体而导致疾病意外传播的危险
③经济适用 -
第16题：
关于重组DNA技术的叙述，正确的是（）。
- A、质粒、噬菌体可作为载体
- B、限制性内切酶是主要工具酶之一
- C、重组DNA由载体DNA和目标DNA组成
- D、重组DNA分子经转化或传染可进入宿主细胞
- E、进入细胞内的重组DNA均可表达目标蛋白
正确答案:A,B,C,D -
第17题：
典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤？
正确答案: a、提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形成一个新的重组DNA分子。
b、将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。
c、对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。
d、对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 -
第18题：
DNA重组的顺序是（）①用连接酶将外源DNA与载体连接。②培养细胞以扩增重组DNA。③通过转化将重组DNA引入受体细胞。④筛选出含有重组体的克隆。
- A、①②③④
- B、①④②③
- C、①③②④
- D、④①③②
正确答案:C -
第19题：
DNA重组是酶在生物技术上的成功应用，请简述DNA重组的步骤？
正确答案:1.目的基因的获得
方法有：基因文库（cDNA文库、基因组文库）、PCR（放达效应）、人工合成
2.目的基因与载体连接
方法有：——粘性末端——全同源性、定向克隆（两种酶切）
定向克隆可防止高背景的产生，因为全同源性会造成载体自连、重组子、目的基因自连三种可能，重组子可能还会出现正反插入的情况，使筛选过程复杂。
——平末端
酶切后也有可能产生平末端，也会出现高背景。
——人工接头——连接子（连入带粘性酶切位点的片断，再酶切）、普适子（一条链连上片断，成为粘性末端）、T-A克隆（PCR中使用的Taq聚合酶会根据模板延伸至后在链末尾加上一个A，可在克隆载体上加上T，使之连接）、同聚物加尾（末端转移酶加尾）
由于平末端连接效率比较低，可在其两端人工修饰
反应体系：目的基因、载体、T4连接酶、缓冲液
3.重组DNA导入受体（宿主）细胞——转化、转染、转导、感染
主要运用的是原核转化（导入感受态细菌，感受态：处于易于吸收外缘DNA的状态，方法：氯化钙法：DNA与其形成羟基-磷酸钙复合物，抗DNase水解）、真核转染。
4.选与鉴定
方法：
——遗传学（表形）——插入失活、蓝-白筛选、抗性基因（四环素Tet、氨苄青霉素Amp）
——酶切，在电泳（分子量、构想）
——PCR（特异性引物）
——核酸杂交（southernblot）
——免疫学方法（westernblot）
——DNA测序（sanger、焦磷酸测序） -
第20题：
单选题DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。 DNA重组技术的应用不包括A基因诊断
B基因治疗
C转基因和基因敲除
D单克隆抗体制备
E基因工程药物、疫苗和抗体
正确答案： D解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题简述重组DNA（基因工程）的主要步骤 。正确答案： 重组DNA的主要步骤主要包括以下四个基本步骤：
（1）目的基因的获得；
（2）目的基因与载体分子在体外进行连接反应，形成重组体；
（3）将人工重组的DNA分子导入能进行正常复制的寄主细胞，从而得到复制；
（4）重组体分子的转化子克隆的选择和筛选。解析： 暂无解析 -
第22题：
单选题关于重组DNA技术的叙述，不正确的是A重组DNA分子经转化或转染可进入宿主细胞
B限制性内切酶是主要工具酶之一
C重组DNA由载体DNA和目标DNA组成
D质粒、噬菌体可作为载体
E进入细胞内的重组DNA均可表达目标蛋白
正确答案： A解析： -
第23题：
问答题DNA重组是酶在生物技术上的成功应用，请简述DNA重组的步骤？正确答案： 1.目的基因的获得
方法有：基因文库（cDNA文库、基因组文库）、PCR（放达效应）、人工合成
2.目的基因与载体连接
方法有：——粘性末端——全同源性、定向克隆（两种酶切）
定向克隆可防止高背景的产生，因为全同源性会造成载体自连、重组子、目的基因自连三种可能，重组子可能还会出现正反插入的情况，使筛选过程复杂。
——平末端
酶切后也有可能产生平末端，也会出现高背景。
——人工接头——连接子（连入带粘性酶切位点的片断，再酶切）、普适子（一条链连上片断，成为粘性末端）、T-A克隆（PCR中使用的Taq聚合酶会根据模板延伸至后在链末尾加上一个A，可在克隆载体上加上T，使之连接）、同聚物加尾（末端转移酶加尾）
由于平末端连接效率比较低，可在其两端人工修饰
反应体系：目的基因、载体、T4连接酶、缓冲液
3.重组DNA导入受体（宿主）细胞——转化、转染、转导、感染
主要运用的是原核转化（导入感受态细菌，感受态：处于易于吸收外缘DNA的状态，方法：氯化钙法：DNA与其形成羟基-磷酸钙复合物，抗DNase水解）、真核转染。
4.选与鉴定
方法：
——遗传学（表形）——插入失活、蓝-白筛选、抗性基因（四环素Tet、氨苄青霉素Amp）
——酶切，在电泳（分子量、构想）
——PCR（特异性引物）
——核酸杂交（southernblot）
——免疫学方法（westernblot）
——DNA测序（sanger、焦磷酸测序）解析： 暂无解析 -
第24题：
单选题DNA重组的顺序是（）①用连接酶将外源DNA与载体连接。②培养细胞以扩增重组DNA。③通过转化将重组DNA引入受体细胞。④筛选出含有重组体的克隆。A①②③④
B①④②③
C①③②④
D④①③②
正确答案： C解析： 暂无解析