用于产酶的植物细胞的来源有哪些？

第1题：

常见的产酶微生物有哪些？

正确答案: 细菌、放线菌、酵母菌和霉菌

第2题：

简述植物细胞培养产酶的工艺条件控制。

正确答案:一、培养基；
（1）生长和代谢需要大量无机盐；
（2）需要多种维生素和植物生长激素；
（3）需求的氮源一般为无机氮源；
（4）一般以蔗糖为碳源、浓度为2-5%。
二、培养温度和pH；
（1）适宜温度在20℃-25℃，酶合成温度因植物种类而异；
（2）要求稳定的pH，一般控制在pH5.8-6.1最好。
三、通气和搅拌；耗氧速率较慢，细胞比较大，较脆弱，对剪切力敏感，所以，通气和搅拌不能太强烈。
四、其他；
（1）光照：对一些植物酶有诱导作用或抑制作用。
（2）刺激物：在酶合成时期，适当添加。

第3题：

试述植物细胞培养产酶的工艺条件及其控制。

正确答案:（1）植物细胞培养的工艺流程：
①外植体的选择与处理；
②植物细胞的获取：直接分离法、愈伤组织诱导法、原生质体再生法；
③细胞悬浮培养；
④分离纯化。
（2）植物细胞培养的培养基：
①特点：需要大量无机盐、多种维生素和植物生长激素、无机氮源、蔗糖为碳源；
②常用：MS培养基（无机盐浓度较高，为较稳定的离子平衡溶液，营养成分的种类和比例较适宜，可以满足植物细胞的营养要求，其中硝酸盐的浓度比其他培养基高，故广泛应用于植物细胞、组织和原生质体培养）、B5培养基、White培养基、KM-8P培养基。
（3）温度的控制，通常不低于20度不高于35度。
（4）pH的控制：培养基一般是5.5~5.8之间。
（5）溶解氧的调节控制。
（6）光照的控制。
（7）前体的添加。
（8）刺激剂的应用。

第4题：

植物细胞培养产酶有何特点？

正确答案:提高产率、缩短周期、易于管理，减轻劳动强度、提高产品质量、其他。

第5题：

利用植物细胞培养产酶，一般控制温度在（），PH值为（）；而利用动物细胞培养产酶，一般控制温度在（），PH值为（）。

正确答案:25℃左右；5.0-6.0；36.5℃左右；7.0-7.6

第6题：

动植物细胞培养产酶有何特点？

正确答案:植物：1.提高产率；2.缩短周期；3.易于管理、减轻劳动强度；4.提高产品质量；5.其他.
动物：1.细胞生长速度慢（需添加抗生素）；2.细胞体积大，无细胞壁保护，对剪切力敏感；3.反应过程成本高，产品价格贵；4.细胞具有锚地依赖性；5.原代细胞一般繁殖50代

第7题：

问答题

试述植物细胞培养产酶的工艺条件及其控制。

正确答案：（1）植物细胞培养的工艺流程：
①外植体的选择与处理；
②植物细胞的获取：直接分离法、愈伤组织诱导法、原生质体再生法；
③细胞悬浮培养；
④分离纯化。
（2）植物细胞培养的培养基：
①特点：需要大量无机盐、多种维生素和植物生长激素、无机氮源、蔗糖为碳源；
②常用：MS培养基（无机盐浓度较高，为较稳定的离子平衡溶液，营养成分的种类和比例较适宜，可以满足植物细胞的营养要求，其中硝酸盐的浓度比其他培养基高，故广泛应用于植物细胞、组织和原生质体培养）、B5培养基、White培养基、KM-8P培养基。
（3）温度的控制，通常不低于20度不高于35度。
（4）pH的控制：培养基一般是5.5~5.8之间。
（5）溶解氧的调节控制。
（6）光照的控制。
（7）前体的添加。
（8）刺激剂的应用。

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第8题：

单选题

进行细胞培养必须先将细胞从动植物机体内分离出来，下列方法哪一项不正确（）

A

超高速差速离心技术既可用于动物也可用于植物细胞

B

胰蛋白酶只可用于动物细胞

C

果胶酶只可用于植物细胞

D

要获得原生质体必需用果胶酶和纤维素酶

正确答案： A

解析：暂无解析

第9题：

填空题

利用植物细胞培养产酶，一般控制温度在（），PH值为（）；而利用动物细胞培养产酶，一般控制温度在（），PH值为（）。

正确答案： 25℃左右,5.0-6.0,36.5℃左右,7.0-7.6

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第10题：

问答题

简述产酶细胞应具备哪些条件

正确答案：（1）酶的产量高：
（2）容易培养和管理；
（3）产酶性能稳定；
（4）利于酶产品的分离纯化；
（5）安全可靠。

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第11题：

问答题

举例说明植物细胞培养产酶的工艺流程。

正确答案：植物细胞培养产酶的工艺过程一般包括愈伤组织的诱导，细胞悬浮培养和酶的分离纯化三个阶级，现以大蒜细胞培养生产超氧化物歧化酶（SOD.为例，说明其工艺过程。
（1）愈伤组织的诱导：选取结实、饱满、无病虫害的大蒜蒜瓣，在4℃冰箱中放置3周，以打破休眠。去除外皮，先用70%乙醇消毒20秒，再用0.1%氯化汞消毒10min，成0.5cm3左右的小块，植入含有3mg/L2，4-D和1.2mg/L6-BA的半固体MS培养基中，25℃、600lux/12h/d光照的条件下培养18d，诱导得到愈伤组织，每18d继代一次。
（2）细胞悬浮培养：将上述在半固体MS培养基上培养18d的愈伤组织，在无菌条件下转入含有3mg/L2，4-D和1.2mg/L6-BA的液体MS培养基中，加入灭菌的玻璃珠，25℃、600lux、12h/d的光照条件下振荡培养10~12d，使愈伤组织分散成为小细胞团或单细胞。然后再无菌条件下，经过筛网将小细胞团或单细胞转入含有3mg/L2，4-D和1.2mg/L6-BA的液体MS培养基中，25℃、600lux、2h/d光照的条件下培养18d。
（3）酶的分离纯化：细胞培养完成后，收集细胞，经过细胞破碎，用pH7.8的磷酸缓冲液提取、有机溶剂沉淀等，分离得到超氧化物歧化酶。

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第12题：

问答题

固定化细胞发酵产酶有哪些特点？

正确答案：固定化细胞发酵产酶与游离细胞发酵产酶相比，具有下列显著特点：
（1）提高酶产率：细胞经过固定化后，在一定的空间范围内生长繁殖，细胞密度增大，因而使细胞反应加速，从而提高酶产率。例如，固定化枯草杆菌生产淀粉酶，在分批发酵时，其体积产酶率达到游离细胞的122%，在连续发酵时，产酶率更高。再如，转基因大肠杆菌细胞生产酰胺酶，经过固定化后的细胞比没有选择压力时游离细胞的产酶率提高10~20倍。
（2）可以反复使用或连续使用较长时间：固定化细胞固定在载体上，不容易脱落流失，所以固定化细胞可以进行半连续发酵，反复使用多次；也可以在高稀释的条件下连续发酵较长时间。例如，固定化细胞进行酒精、乳酸等厌氧发酵，可以连续使用半年或者更长的时间；固定化细胞发酵产生淀粉酶等，也可以连续地使用30d以上。
（3）基因工程菌的质粒稳定，不易丢失：基因工程菌经过固定化后，由于有载体的保护作用，质粒的结构稳定性和分裂稳定性都显著提高。
（4）发酵稳定性好：细胞经过固定化后，由于受到载体的保护作用，使细胞对温度、PH的适应范围增宽；对蛋白酶和酶抑制剂等的耐受能力增强，所以能够比较稳定地进行发酵生产。这一特点使固定化细胞发酵的操作控制变得相对容易，并有利于发酵生产的自动化。
（5）缩短发酵周期，提高设备利用率：固定化细胞，如果经过预培养，转入发酵培养基以后，很快就可以发酵产酶，而且能够较长时间维持产酶特性，所以可以缩短发酵周期，提高设备利用率。若不经预培养，第一批发酵时，周期与游离细胞基本相同，但是第二批以后，其发酵周期将明显缩短。例如，固定化黑曲霉细胞半连续发酵生产糖化酶，第一批发酵时，周期为120h，与游离细胞发酵周期相同，但是从第二批发酵开始，发酵周期缩短至60h。若采用连续发酵，则可以在高稀释的条件下连续稳定地产酶，这就更加提高设备利用率。
（6）产品容易分离纯化：固定化细胞不溶于水，发酵完成后，容易与发酵液分离，而且发酵液中所含的游离细胞很少，这就有利于产品的分离纯化，从而提高产品的纯度和质量。
（7）适用于胞外酶等胞外产物的生产：由于固定化细胞与载体结合在一起，所以固定化细胞一般只是用于胞外酶等胞外产物的生产。

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第13题：

简述产酶细胞应具备哪些条件

正确答案: （1）酶的产量高：
（2）容易培养和管理；
（3）产酶性能稳定；
（4）利于酶产品的分离纯化；
（5）安全可靠。

第14题：

适用于植物细胞和动物细胞培养的生物反应器有哪些？

正确答案: 适合于动物细胞的生物反应器一般有微载体式、中空纤维式、灌注培养式、旋转壁式、
适合于植物细胞的生物反应器有：鼓泡塔与气升式生物反应器、填充床式生物反应器、流化床生物反应器和膜式生物反应器机械式搅拌生物反应器等。

第15题：

生药“松贝”的植物来源有哪些？

正确答案: 卷叶贝母、暗紫贝母、甘肃贝母。

第16题：

植物细胞培养产酶

正确答案:从植物外植体中诱导获得植物细胞，再通过筛选、诱变、原生质体融合或基因重组等手段选育得到优良的产酶细胞，然后在人工控制条件的反应器中进行细胞培养，而获得所需的酶

第17题：

举例说明动植物细胞培养产酶的工艺过程？

正确答案:植物：以大蒜细胞培养生产超氧化物歧化酶为例：1.大蒜愈伤组织的诱导；2.大蒜悬浮细胞培养；3.酶的分离纯化细胞培养完成后，收集细胞，经过细胞破碎、提取、分离得到超氧化物歧化酶。
动物：以人黑色素瘤细胞培养生产组织纤溶酶原活化剂（tPA.为例：人黑色素瘤细胞培养生产tPA的工艺过程：人黑色素瘤细胞培养基的配制、人黑色素瘤细胞培养、tPA的分离纯化.

第18题：

固定化细胞发酵产酶有哪些特点？

正确答案:固定化细胞发酵产酶与游离细胞发酵产酶相比，具有下列显著特点：
（1）提高酶产率：细胞经过固定化后，在一定的空间范围内生长繁殖，细胞密度增大，因而使细胞反应加速，从而提高酶产率。例如，固定化枯草杆菌生产淀粉酶，在分批发酵时，其体积产酶率达到游离细胞的122%，在连续发酵时，产酶率更高。再如，转基因大肠杆菌细胞生产酰胺酶，经过固定化后的细胞比没有选择压力时游离细胞的产酶率提高10~20倍。
（2）可以反复使用或连续使用较长时间：固定化细胞固定在载体上，不容易脱落流失，所以固定化细胞可以进行半连续发酵，反复使用多次；也可以在高稀释的条件下连续发酵较长时间。例如，固定化细胞进行酒精、乳酸等厌氧发酵，可以连续使用半年或者更长的时间；固定化细胞发酵产生淀粉酶等，也可以连续地使用30d以上。
（3）基因工程菌的质粒稳定，不易丢失：基因工程菌经过固定化后，由于有载体的保护作用，质粒的结构稳定性和分裂稳定性都显著提高。
（4）发酵稳定性好：细胞经过固定化后，由于受到载体的保护作用，使细胞对温度、PH的适应范围增宽；对蛋白酶和酶抑制剂等的耐受能力增强，所以能够比较稳定地进行发酵生产。这一特点使固定化细胞发酵的操作控制变得相对容易，并有利于发酵生产的自动化。
（5）缩短发酵周期，提高设备利用率：固定化细胞，如果经过预培养，转入发酵培养基以后，很快就可以发酵产酶，而且能够较长时间维持产酶特性，所以可以缩短发酵周期，提高设备利用率。若不经预培养，第一批发酵时，周期与游离细胞基本相同，但是第二批以后，其发酵周期将明显缩短。例如，固定化黑曲霉细胞半连续发酵生产糖化酶，第一批发酵时，周期为120h，与游离细胞发酵周期相同，但是从第二批发酵开始，发酵周期缩短至60h。若采用连续发酵，则可以在高稀释的条件下连续稳定地产酶，这就更加提高设备利用率。
（6）产品容易分离纯化：固定化细胞不溶于水，发酵完成后，容易与发酵液分离，而且发酵液中所含的游离细胞很少，这就有利于产品的分离纯化，从而提高产品的纯度和质量。
（7）适用于胞外酶等胞外产物的生产：由于固定化细胞与载体结合在一起，所以固定化细胞一般只是用于胞外酶等胞外产物的生产。

第19题：

问答题

从植物细胞培养产酶的特点分析，为什么与植物体产酶比植物细胞产酶更有优势？

正确答案： 1.次生物质的生产是在可控制的条件下进行的，因此可以通过改变培养条件和筛选细胞系来提高次生代谢产物的产率
2.培养细胞是在无菌条件下进行的，因此可以排除病菌和虫害的影响，以及环境中的有害物质污染，从而提高产品质量。
3.植物细胞的倍增时间一般为12~60h，发酵周期为10~30d，与植物生长周期相比，大大缩短了生产周期。
4.可以进行特定的生化转化反应和探索新的合成路线，以获得新的有用物质。

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第20题：

问答题

动植物细胞培养产酶有何特点？

正确答案：植物：1.提高产率；2.缩短周期；3.易于管理、减轻劳动强度；4.提高产品质量；5.其他.
动物：1.细胞生长速度慢（需添加抗生素）；2.细胞体积大，无细胞壁保护，对剪切力敏感；3.反应过程成本高，产品价格贵；4.细胞具有锚地依赖性；5.原代细胞一般繁殖50代