单选题杂交瘤技术中细胞克隆化的常用技术为（）A 加饲养细胞B HAT培养基培养C 有限稀释法D 软琼脂培养法E 显微操作技术

第1题：

第2题：

第3题：

第4题：

第5题：

第6题：

杂交瘤技术中，常用的饲养细胞是（）

• A、脾细胞
• B、瘤细胞
• C、巨噬细胞
• D、胸腺细胞
• E、粒细胞

正确答案:C

第7题：

常用的细胞克隆化方法有哪些？简述其主要技术环节

正确答案: 主要方法有：稀释铺板法、饲养层克隆法、琼脂克隆法、毛细管克隆法、荧光激活分选法等。
稀释铺板法：也称为有限稀释法。其原理是通过适当的稀释达到分离单个细胞的目的。将培养的细胞进行计数，用培养液进行稀释到5～10个细胞/ml后，在多孔培养板（一般为96孔板）各孔内分别加入细胞悬液0.1～0.2ml，使孔内落入细胞的几率为每孔一个细胞。镜检每孔所含细胞数，标记含单个细胞的孔，培养一段时间后，凡在已标记的孔中有生长增殖的细胞群即为克隆细胞。常规使用中，一般不进行镜检，多采用多次克隆化培养得到单细胞的克隆系。
饲养层克隆法：对一些生长缓慢的细胞（如杂交瘤细胞），单个细胞或密度极低时细胞难以存活和增殖，在培养皿中加入能贴壁生长的其他细胞（称为饲养细胞），这些细胞不仅能起到饲养作用，还能清除培养体系中的死、伤细胞及其碎片。饲养细胞的存在可以促进单个细胞生长为细胞克隆，达到克隆化目的。常用的饲养细胞有成纤维细胞、胸腺细胞和巨噬细胞。巨噬细胞不仅能起饲养作用，还能清除培养体系中死、伤细胞及其碎片。
琼脂克隆法：将细胞培养在软琼脂形成的半固体培养基上，单个细胞可在半固体的培养基上增殖形成集落。常用的软琼脂法是在培养皿中先铺一层0.5%的琼脂，待凝固后再铺一层0.25%的软琼脂，加入的细胞数要在几率上使长出的集落是一个细胞的后代。长出集落后，再转移到其他培养器中进行扩增分析。
毛细管克隆法：毛细管克隆细胞法是最早的单细胞分离培养技术。其基本过程是：在倒置显微镜下，用弯头毛细管或借助显微操作仪将细胞逐个吸出，分别放入96孔板内培养形成克隆。本法虽比较精确，但过程较繁琐，成功率低，现已少采用。
荧光激活分选法：将细胞标上荧光，当细胞悬液流经激活分选仪喷嘴时形成含有单细胞的液滴，细胞受激光照射发出荧光和前向散射光。通过仪器分析，使细胞带上电荷并使细胞流动方向发生偏移，各个含单细胞的液滴被分别收集在96孔板各孔内，以达到克隆化的目的。

第8题：

单克隆抗体制备的技术包括（　）

• A、免疫脾细胞的制备
• B、骨髓瘤细胞的培养与筛选
• C、细胞融合
• D、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养
• E、阳性杂交瘤细胞的冻存

正确答案:A,B,C,D,E

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

第15题：

第16题：

第17题：

将克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价.单一的特异性抗体，这种技术为（）。

正确答案:单克隆抗体技术

第18题：

制备单克隆抗体的常用技术是（）

• A、DNA重组技术
• B、超速离心技术
• C、B淋巴细胞杂交瘤技术
• D、原位杂交技术
• E、免疫细胞化学技术

正确答案:C

第19题：

杂交瘤技术中细胞克隆化的常用技术为（）

• A、加饲养细胞
• B、HAT培养基培养
• C、有限稀释法
• D、软琼脂培养法
• E、显微操作技术

正确答案:C

第20题：

克隆化培养后的阳性杂交瘤细胞应当及时冻存，以防止这些细胞________________、_____________________、___________________。

正确答案:染色体丢失；发生变异；细胞污染

第21题：

第22题：

第23题：