问答题简述几种细胞因子免疫学测定方法及其优缺点。

第1题：

第2题：

简述几种DNA测序的方法，比较优缺点。

正确答案: 1.Sanger双脱氧连终止法；2.Maxam-Gilbert化学降解法；3.DNA自动测序化。
Maxam-Gilbert法所能测定的长度要比Sanger法短一些，它对放射性标记末端250个核苷酸以内的DNA序列效果最佳。Sanger法需要单链模板和特异寡核苷酸，并需获得大肠杆菌DNA聚合酶IKlenow片段的高质量酶制剂，而Maxam-Gilbert法只需简单化学试剂。随着M13噬菌体和噬菌粒载体的发展，也由于现成的合成引物唾手可得及测序反应日臻完善，双脱氧链终止法如今远比Maxam-Gilbert法应用得广泛。化学降解较之链终止法具有一个明显的优点：所测序列来自原DNA分子而不是酶促合成所产生的拷贝。因此，利用Maxam-Gilbert法可对合成的寡核苷酸进行测序，可以分析诸如甲基化等DNA修饰的情况。由于Sanger法既简便又快速，因此是现今的最佳选择方案。事实上，目前大多数测序策略都是为Sanger法而设计的。

第3题：

细胞因子的生物学测定优缺点有哪些?

正确答案: 优点：①灵敏度高，较免疫测定方法敏感，可达pg水平；②测定的是细胞因子的生物活性。其缺点是：①特异性差；②测定操作繁琐；③易受干扰。

第4题：

细胞因子的主要检测方法包括（）。

• A、用ELISA检测细胞因子及其受体
• B、用依赖性细胞株检测相应的细胞因子
• C、用分子杂交技术检测细胞因子mR-NA的表达
• D、用PCR技术检测细胞因子
• E、用免疫学方法检测细胞因子活性水平

正确答案:A,B,C,D

第5题：

简述花卉繁殖的方法及其优缺点？

正确答案: 1）有性繁殖即种子繁殖，是最进化的繁殖方式，产生的后代具有丰富的变异和遗传，提供了选择的可能性2）无性繁殖也叫营养繁殖，通常包括分生、扦插、嫁接、压条、孢子繁殖等；无性繁殖有扩大种源，选育优良无性的作用3）组织培养：大大提高了繁殖的系数，但成本较高

第6题：

浅埋隧道有几种施工方法及其分类？并简单说明优缺点？

正确答案: 浅埋隧道有下列四种：
1）明挖法（放坡开挖，悬臂支护开挖，围护有支撑开挖）
优点：可机械化施工，速度较快，施工较简单，质量有保证，安全可靠。
缺点：开挖及回填土方量大，对于有支撑的围护，支撑工艺较复杂
2）地下连续墙，又可分为现浇地下连续墙，预制地下连续墙，排桩地下连续墙
优点：地下连续墙既可作基坑开挖的围护结构，也可作为地下结构的一部分，由于其墙体刚度大，防渗性能好，能适应软土质条件，工程施工对周围土体扰动小，对周围建筑物影响也小，施工时振动小，噪音低，在狭窄场地也能安全施工。
缺点：在钻孔或挖槽中要用泥浆护壁，防止坍塌，应随不同地质条件选用不同的挖槽机械，及护壁措施；有的需大型吊装设备，或施工速度较慢。
3）盖挖法
优点：结构水平位移小；结构板可作为基坑开挖的支撑，节省临时支撑；缩短占道时间，减少对地面的干扰；受外界气候影响小。
缺点：出土不方便，板、墙、柱施工按头多，防水处理；功效低速度慢；结构框架形成之前，中间立柱能够支承的上部荷载有限。
4）浅埋暗挖法
优点：是参考新奥法的基本原理，开挖中用多种辅助措施加固围岩，充分调动围岩的自承能力，及时支护，封闭成环，与围岩共同形成联合支护体系，能有效地抑制围岩过大变形。
缺点：应与其他方法进行经济技术比较，施工中必须严格控制地表的变形沉陷；要求要刚性支护或地层改良；亦可按不同地质条件通过试验段的施工来指导设计施工。

第7题：

阿司匹林含量测定通常采用哪几种方法？各有何优缺点？

正确答案:（1）直接酸碱滴定法：优点是简便、快速；缺点是酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定），酸性杂质干扰（如水杨酸）。不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定。
（2）水解后剩余滴定法：优点是消除了酯键水解的干扰；缺点是酸性杂质干扰。
（3）两步滴定法：其优点是消除了酯键水解的干扰和酸性杂质干扰。
（4）HPLC法：优点是具有分离杂质的能力。

第8题：

应用免疫学方法检测细胞因子，可（）

• A、直接测定细胞因子的含量
• B、间接测定细胞因子的含量
• C、直接定性特定的细胞因子
• D、间接定性特定的细胞因子
• E、测定特定细胞因子的活性

正确答案:A

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

阿司匹林及其制剂的含量测定通常采用哪几种方法？各有何优缺点？

正确答案: （1）直接酸碱滴定法：优点是简便、快速；缺点是酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定），酸性杂质干扰（如水杨酸、醋酸），不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于水杨酸检查合格的原料药的含量测定。
（2）水解后剩余滴定法：优点是消除了酯键水解的干扰；缺点是酸性杂质干扰。
（3）两步滴定法：优点是消除了酯键水解的干扰和酸性杂质或添加的酸性稳定剂的干扰。适用于阿司匹林片剂及阿司匹林肠溶片。
（4）HPLC法：优点是具有分离杂质的能力；缺点是阿司匹林峰与水杨酸峰的分离度应符合要求。适用于阿司匹林肠溶胶囊、泡腾片、栓剂等。

第15题：

ELISA用于细胞因子测定优缺点有哪些?

正确答案: ELISA方法的优点是特异、简便、可同时测定大量标本、易于标准化以及实验废弃物易于处理等，是目前临床上最常用的细胞因子免疫测定方法。其缺点是，测定的是细胞因子的免疫反应性，而不是细胞因子的生物活性。因此，不具生物活性的细胞因子前体分子、分解片断、聚合物以及其与结合蛋白或可溶性受体的结合物，ELISA方法仍可以测到。

第16题：

简述施加预应力的方法及其优缺点。

正确答案:1、先张法：张拉钢筋在浇灌混凝土之前。
优点：张拉工序简单，结构上无永久性锚具，能批量生产；
缺点：需要较大台座和固定设备，一次性投资大，预应力多为直筋。
2、后张法：张拉钢筋在浇灌混凝土之后。
优点：预应力筋可布置成各种形状，多用于运输不便，只能现场施工的大型构件；
缺点：永久性锚具，钢材用量大，张拉工具复杂，施工时间长。

第17题：

简述几种土壤管理制度及其优缺点。

正确答案: 土壤管理制度又称土壤管理方法，主要指土壤表面的耕作技术。
清耕法。
优点：植物间通风透光性好，采收产品较干净。
缺点：①水土流失严重，尤其是有坡度的种植园，更为严重。②长期清耕，土壤有机质含量降低快，增加了对人工施肥的依赖。③犁底层坚硬，不利于土壤透气与渗水，影响植物根系生长。④种植园无草化，生态条件恶化，植物害虫的天敌减少。⑤多次中耕除草，劳动
强度大，费工。
免耕法。
优点：①由于土壤不耕作，保持了土壤的自然结构，通气性好，有利于水分渗透，并减少了地面径流和水分的蒸发。②土层较坚硬，吸热、放热快，能减轻辐射霜冻危害。同时便于人工操作和机械作业。③用除草剂1~2次/年，不用锄草，节省劳力，提高工效。④无杂草竞争，根系分布在疏松的层次内，根系发育好，营养供应强。产量高，品质好。
缺点：存在除草剂污染、浓度和种类选择限制、土壤有机质降低快和依赖人工施肥等。
生草法。
优点：①防止或减少水土流失，保肥、保水、保土。②增加土壤有机质含量，改进土壤结构性能，提高土壤肥力。③生草后，土壤中植物所需的一些营养元素有效性提高，和这些元素有关的缺素症得到克服。④生草有利于种植园有良好的生态平衡，从而减少农药的投入和农药对环境的污染，同时，生草条件下缓和种植园地表温度的季节和昼夜变化，有利于植物根系的生长和吸收活动。⑤生草园便于机械作业，省人力。⑥生草园对雨季的涝害轻。     缺点：多年连作使土表有板结层，影响透气与渗水，生草第一年灭除杂草较费工，有的病害有加重情况。
覆盖法。
塑料薄膜覆盖。优点：提高地温、控制杂草、提高肥效和减少水分蒸腾。缺点：土壤需肥量增加、对降雨利用率低。
秸秆覆膜。优点：增加土壤有机质含量、保肥保水、改善土壤结构性能。缺点：易招鼠害和火灾、植物天敌数量少、春季地温上升慢。
沙石覆盖。优点：增温保墒、提高土壤肥力、防止水土流失和减轻病虫害。

第18题：

简述食品冷却方法及其优缺点？

正确答案:冷风冷却：一般用于果蔬等预冷却，适用面广，缺点费时较长，有干耗。
冷水冷却：可直接或间接冷却食品，冷却速度快，空间少，避免干耗。缺点外观受损，难以储藏。
接触冰冷却：冷却速度快，食品温度不低于0度，产品表面湿润，主要用于鱼冷却。
真空冷却：适于很大表面积的食品。冷却速度最快，缺点有水分蒸发。

第19题：

简述几种细胞因子免疫学测定方法及其优缺点。

正确答案:细胞因子的免疫学测定方法包括：
①ELISA法，具有特异、简便、易于标准化等优点，可同时检测大量标本，是细胞因子测定的首选方法。此外，无生物学活性的细胞因子前体、分解片段以及与相应受体的结合物也可用此法检测。其缺点是，敏感性偏低、不能判断细胞因子的生物学活性。
②流式细胞仪法，主要用于细胞内细胞因子和细胞表面黏附分子的检测，能简单、快速地进行单个细胞水平的细胞因子或黏附因子的检测，精确判断不同细胞亚群的细胞因子和膜分子的表达情况。
③酶联免疫斑点试验法，便于观察和计数分泌细胞因子的细胞，一个斑点代表一个细胞因子分泌细胞，斑点的颜色深浅程度与细胞分泌的细胞因子量相关。

第20题：

免疫测定方法用于细胞因子检测优缺点有哪些?

正确答案: (1)主要优点是：①特异性高。使用特异的单克隆抗体，可用于单一细胞因子的检测；②测定操作简便，无须维持依赖性细胞株。
(2)主要缺点是：①所测定的只是细胞因子的蛋白含量，与其生物活性不一定成正比；②测定结果与所用的抗体的来源及亲合力有很大关系，使用不同来源和亲合力的单抗，对同一标本测定得到的结果可能不同；③测定下限不如生物活性测定方法，一般约为100pg；④如标本中存在细胞因子的可溶性受体，其可能会影响特异抗体对细胞因子的结合；⑤标本中存在的各种细胞因子结合蛋白如自然存在的抗细胞因子抗体、血清中可结合细胞因子的载体蛋白如血清白蛋白和α2-巨球蛋白等有可能对细胞因子免疫测定产生干扰。

第21题：

第22题：

第23题：

第24题：