第6题:
问答题
什么叫大肠菌群?请简要叙述大肠菌群的测定方法。
正确答案:
大肠群菌是指一群需氧及兼性厌氧,在37℃能分解乳糖产酸、产气的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌。
大肠菌群常用的检验方法为三步法:乳糖胆盐发酵试验、分离培养、证实试验(乳糖发酵试验)。
1.检样稀释
①以无菌操作将检样25g(mL)放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8000r/min~10000r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。
②用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。
③另取1ml灭菌吸管,按上述操作依次作10倍递增稀释液。
④根据食品卫生要求或对检验样品污染情况估计,选择三个稀释度,每个稀释度,接种3管。
2.乳糖发酵试验
将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管;1mL及1mL以下者,用单料乳糖发酵管。
每一个稀释度接种3管,置36℃±1℃温箱内,培养24h±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产生者,则按下列程续进行。
3.分离培养
将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36℃±1℃温箱内,培养18h~24h,然后取出,观察菌落形态并做革兰氏染色和证实试验。
4.证实试验
在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置36℃±1℃的温箱内培养24h±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌,即报告为大肠菌群阳性。
5.报告
根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)食品中大肠菌群的MPN值。
解析:
暂无解析