单选题PCR反应3个步骤依次为（　　）。A 延伸、退火、变性B 退火、延伸、变性C 变性、延伸、复性D 延伸、变性、退火E 变性、退火、延伸

第1题：

第2题：

简述PCR扩增包括3个步骤。

正确答案:A.DNA变性：通过加热使靶DNA双链解离成两条单链。
B.引物与靶DNA退火：降低温度至适当水平，促使两个引物根据碱基互补的原理分别结合至靶DNA两条链的3’末端。
C.引物延伸：在DNA聚合酶催化下，引物沿着靶DNA3’末端向5’末端延伸。

第3题：

简述PCR的步骤。PCR是如何使得特异性DNA片段以几何级数倍增的？

正确答案: PCR分三步：
①双链模板DNA变性。双链解开成单链。
②退火。
即引物与单链DNA两端互补序列配对，形成DNA聚合反应中的模板与引物的关系。没有引物的帮助，所有的DNA聚合酶都无能力从头合成一条新链。
③链的延伸。
DNA聚合酶从引物3’-OH端开始进行聚合酶反应，直至完全产生两条互补的新链。
三个反应阶段结束后，又可以开始下一次的循环，引物链的延伸产物与原来的模板DNA经加热变性后，也作为模板DNA和另一个引物互补，在DNA聚合酶作用下又发生引物链的延伸反应。这样反复循环数十次，可使特异性DNA片段以几何级数倍增。

第4题：

PCR反应的基本步骤是（）。

• A、退火、变性、延伸
• B、退火、延伸、变性
• C、变性、退火、延伸
• D、变性、延伸、退火
• E、延伸、变性、退火

正确答案:C

第5题：

什么是PCR，请试述PCR技术的原理，以及PCR的反应过程？

正确答案:P.CR就是聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction）。
原理：双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。
反应过程：首先。双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子；然后，加入到反映混合物中的引物和模板DNA的特定末端相结合；戒指，DNA聚合酶以单链DNA为模板，利用反应混合物中的三种核苷三磷酸，在引物的3’-OH端合成新生的DNA互补链。

第6题：

PCR反应包括三个基本步骤：（）、（）和（）。

正确答案:变性；退火；延伸

第7题：

PCR原理是什么？其基本步骤如何？解释各步骤的目的。

正确答案:类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链；重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”。

第8题：

什么是PCR扩增法，其原理、操作步骤、反应过程和意义？

正确答案: PCR技术是一种用于体外扩增位于两端已知序列之间的DNA区段的分子生物学技术。
PCR原理：PCR技术的实质为体内DNA复制的体外模拟。即使双链DNA热变性而分开成为单链DNA，退火后在低温下，两个与模板互补的引物与单链DNA配对结合，再在中温下利用TAGDNA聚合酶的聚合活性和热稳定性进行聚合（延伸）反应。每经过一次变性、退火和延伸为一个循环，所扩增的特定DNA序列数是按几何指数增长。
PCR技术操作步骤为：
①反复将目的基因片段进行热变性处理，令其双股链解开；
②进行反链杂交、退火、形成单链；
③用TagDNA聚合酶沿DNA链全程合成出两股双链DNA分子；
④然后开始第二个反应周期。每个反应周期，特异性目的基因可扩增一倍。用n代表反应周期数，则特异性DNA目的基因片段便按2^n指数扩增下去，一直扩增至所需数量为止。
PCR反应过程：
①DNA的变性：DNA双链在加热或碱性条件下，双链的氢键断裂为单链DNA，一般解链温度为85-95℃；
②引物与单链DNA退火结合：单链DNA在温度逐渐降低时，重新与其互补的引物或另一条单链结合形成双链，称为退火；
③引物延伸：以目标DNA为模板，以引物为固定起点，以四种脱氧核苷三磷酸为底物在DNA聚合酶的作用下，由5’端向3’端的方向进行DNA复制。
意义：PCR技术能在短时间内大量扩增目的基因DNA片段，且全部操作已实现自动化，这一技术不仅广泛应用于基因重组操作中的基因扩增及其检出，而且在研究火花的致癌基因、等会基因序列变异，以及分子生物学、医学、食品、农业、化工的许多领域中都得到广泛的应用。

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

PCR反应过程分为三个步骤，即（），（）和（）。

正确答案:变性；退火；延伸

第15题：

PCR反应一般分为几个步骤？各步骤有什么特点？

正确答案: A.变性：双链DNA变成单链DNA。变性温度的高低由G+C含量决定；变性时间由DNA链长度决定。常规PCR变性条件为94～95度45s。
B.退火，将温度下降至适宜温度，使引物与模板DNA退火结合；退火是使引物和模板DNA复性。复性过程采取的温度（Ta）至关重要。复性温度过高，引物不能与模板很好地复性，扩增效率很低；复性温度太低，引物将产生非特异性复性，导致非特异性的DNA片段的扩增。退火温度通常在比理论计算的引物和模板的熔解温度低3～5℃的条件下进行。
C.延伸：寡核苷酸引物的延长，一般在耐热DNA聚合酶的最适温度下进行。对于Taq酶，为72～78度。
D 循环数：PCR扩增所需的循环数取决于反应体系中起始的模板拷贝数以及引物延伸和扩增的效率。
一般扩展条件：94℃60s 37℃60s 72℃120s，共25-30个循环。

第16题：

简述PCR原理及其基本反应步骤。

正确答案:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板互补的DNA链。

第17题：

简述PCR的操作步骤。

正确答案: 标准的PCR过程分为三步：
D.NA变性：（90℃-96℃）双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA
退火：（25℃-65℃）系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。
延伸：（70℃-75℃）在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端→5′端延伸，合成与模板互补的DNA链。

第18题：

简述PCR扩增步骤。

正确答案: 变性；退火；延伸。

第19题：

PCR反应包括（）、（）和（）三个步骤。

正确答案:变形；复性；延伸

第20题：

PCR包括三个步骤（），（），（）。

正确答案:变性；退火；延伸

第21题：

第22题：

第23题：

第24题：