参考答案和解析
正确答案: 原理:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。
特点:研究的是生理条件下蛋白质之间的相互作用;检测的是细胞裂解液中所有蛋白质与靶蛋白的相互作用;可检测依赖于修饰的蛋白质相互作用。
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  • 第1题:

    知识点:细胞检测
    可检测淋巴细胞增殖的技术是
    A. western bolt
    B.3H-7dR 入法
    C.蛋白质芯片法
    D. ELISP0T
    E.免疫共沉淀


    答案:D
    解析:
    可检测淋巴细胞增殖的方法有:液体闪烁计数器 、MTT法、ELISP0T和抗体形成细胞测定试验

  • 第2题:

    病毒的分子生物学鉴定包括病毒核酸和蛋白质测定,蛋白质测定可使用( )。

    A.免疫测定技术、电泳技术和杂交技术
    B.免疫测定技术、电泳技术和探针技术
    C.免疫测定技术、探针技术和杂交技术
    D.免疫测定技术、电泳技术和质谱技术
    E.质谱测定技术、电泳技术和杂交技术

    答案:D
    解析:
    蛋白质测定可以利用抗原抗体特异性结合使用免疫测定方法,电泳技术可以初步了解蛋白质的分子量信息,质谱技术通过测定样品离子的质荷比对蛋白质进行成分和结构分析。

  • 第3题:

    利用共沉淀法分离,对于微量组分的测定有何意义?与无机共沉淀剂相比较,有机共沉淀剂有何优点?


    正确答案:共沉淀现象在重量分析中是不利的,得设法消除,但是在微量或痕量组分的分离与分析中,却可以利用共沉淀现象分离和富集痕量组分有机共沉淀剂一般是大分子物质,它的离子半径大,表面电荷密度小,吸附离子能力弱,选择性差。

  • 第4题:

    基于质谱的蛋白质相互作用研究方法主要有()。

    • A、串联亲和纯化耦联质谱技术
    • B、噬菌体显示技术
    • C、亲和层析耦联质谱技术
    • D、生物传感器耦联质谱技术
    • E、免疫共沉淀耦联质谱技术

    正确答案:A,C,D,E

  • 第5题:

    常用的共沉淀剂分为无机共沉淀剂和有机共沉淀剂两类。


    正确答案:正确

  • 第6题:

    影响沉淀纯度的因素是()。

    • A、共沉淀
    • B、后沉淀
    • C、共沉淀和后沉淀

    正确答案:C

  • 第7题:

    串联亲和纯化耦联质谱技术


    正确答案:用于研究蛋白质在生理条件下的相互作用的一种方法。通过嵌入一段蛋白质标记,在目的蛋白的一端或中部导入蛋白质标记,这样便在没有破坏目的蛋白调控序列的基础上,使得被标记的目标蛋白其表达量与其在细胞中自然表达水平相当,避免了由于过量表达的导致非自然条件下的蛋白质相互作用。经过特异性的两步亲和纯化,在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来,然后用质谱技术或Edman降解法对得到的蛋白质复合体进行鉴定。

  • 第8题:

    简述质谱的基本原理及特点。


    正确答案:物质的分子在气态被电离,所产生的离子在高压电场中加速,在磁场中偏转,然后到达收集器,产生信号,其强度与到达的离子数成正比,所记录的信号构成质谱。
    质谱法特点:质谱法是唯一可以确定分子式的方法;灵敏度高,通常只需要微克级甚至更少的样品,便可得到质谱图;根据各类有机化合物分子的断裂规律,质谱中分子碎片离子峰提供了有关有机化合物结构的丰富的信息。

  • 第9题:

    举例说明各种形式共沉淀分离的作用原理,并比较他们的优缺点。


    正确答案: 利用共沉淀进行分离富集,主要有下列三种情况:
    ①利用吸附作用进行共沉淀分离:例如微量的稀土离子,用草酸难于使它沉淀完全。若预先加入Ca2+,再用草酸作沉淀剂,则利用生成的CaC2O4作载体,可将稀土离子的草酸盐吸附而共同沉淀下来。其中所用载体都是表面积很大的非晶型沉淀,由于表面积大,与溶液中微量组分接触机会多,容易吸附;由于非晶型沉淀聚集速度快,因而富集效率高;但选择性不高。
    ②利用生成混晶进行共沉淀分离:两种金属离子生成沉淀时,如果他们的晶格相同,就可能生成混晶而共同析出。例如痕量Ra2+,可用BaSO4作载体,生成RaSO4-BaSO4的混晶共沉淀而得以富集。这种方法选择性较好。
    ③利用有机共沉淀剂进行共沉淀分离:该共沉淀富集作用是由于形成固溶体。例如在含有痕量Zn2+的微酸性溶液中,加入硫氰酸铵和甲基紫,则Zn(SCN)42+配阴离子与甲基紫阳离子生成难溶的沉淀,而甲基紫阳离子与SCN-离子所生成的化合物也难溶于水,是共沉淀剂,就与前者形成固溶体一起沉淀下来。该法选择性较好;有利于痕量组分的富集;剩余沉淀剂易灼烧除去,不影响后续分析。

  • 第10题:

    名词解释题
    免疫共沉淀

    正确答案: 免疫沉淀是抗原和抗体之间专一性地相互作用而沉淀,从而保留下来,其是一种经典的检测蛋白质相互作用的方法。其实验过程比较简单,裂解细胞后,加入抗体,抗原被沉淀下来后洗涤,去除非特异性结合,再分析复合体。抗体可以是单克隆,也可以是多克隆。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    问答题
    简述免疫共沉淀的原理和免疫共沉淀耦联质谱技术的特点。

    正确答案: 原理:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。
    特点:研究的是生理条件下蛋白质之间的相互作用;检测的是细胞裂解液中所有蛋白质与靶蛋白的相互作用;可检测依赖于修饰的蛋白质相互作用。
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    多选题
    关于明矾除杂质的原理错误的解释是()
    A

    钾离子的吸附作用

    B

    铝离子的共沉淀作用

    C

    硫酸根离子的吸附作用

    D

    钾离子的共沉淀作用

    E

    硫酸根离子的共沉淀作用


    正确答案: A,B
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    病毒的分子生物学鉴定包括病毒核酸和蛋白质测定,蛋白质测定可使用

    A.免疫测定技术、电泳技术和质谱技术等
    B.免疫测定技术、探针技术和质谱技术等
    C.免疫测定技术、电泳技术和聚合酶链反应技术等
    D.免疫测定技术、电泳技术和杂交技术等
    E.免疫测定技术、电泳技术和探针技术等

    答案:A
    解析:
    探针技术、杂交技术和聚合酶链反应技术等用于核酸测定。

  • 第14题:

    关于明矾除杂质的原理错误的解释是()

    • A、钾离子的吸附作用
    • B、铝离子的共沉淀作用
    • C、硫酸根离子的吸附作用
    • D、钾离子的共沉淀作用
    • E、硫酸根离子的共沉淀作用

    正确答案:A,C,D,E

  • 第15题:

    简述生物传感器耦联质谱技术的基本原理。


    正确答案:生物传感器耦联质谱技术是定性和定量检测蛋白质间相互作用并对其进行鉴定的简便而快速的方法。它是以表面等离子共振(SPR)为基础的生物大分子相互作用的分析技术(BIA)与MALDI-TOF质谱技术的有机结合,其原理是采用1cm*1cm大小的生物传感芯片,该芯片以金黄色的玻璃作为支持物,上面结合有羧甲基葡聚糖聚合物,通过化学修饰可将感兴趣的蛋白质(肽)固定在葡聚糖聚合物上形成传感片,将待测蛋白质或肽溶液通过微射流卡盘流过该固相载体,那些与固相蛋白质(肽)发生相互作用的蛋白质(肽)被滞留在聚合物的表面上,由于芯片表面蛋白质含量增加从而导致入射光的折射率改变,使其表面等离子共振光的共振角发生改变,该改变与表面蛋白的含量呈线性关系,通过SPR-BIA检测系统可实时检测该变化从而实现对蛋白质间相互作用的分析。

  • 第16题:

    用洗涤的方法能有效地提高沉淀纯度的是()。

    • A、混晶共沉淀
    • B、吸附共沉淀
    • C、包藏共沉淀
    • D、后沉淀

    正确答案:B

  • 第17题:

    利用表面吸附进行共沉淀常用的共沉淀剂为Fe(OH)3、AI(OH)3三等,它们是比表面大、吸附()的肢体沉淀,有利于痕量组分的共沉淀。这种共沉淀方法选择性不高。


    正确答案:能力强

  • 第18题:

    简述吸留共沉淀与表面吸附共沉淀的主要区别。


    正确答案:吸留共沉淀与表面吸附共沉淀的主要区别在于吸留发生在沉淀内部,吸附发生在沉淀表面。

  • 第19题:

    免疫共沉淀


    正确答案:免疫沉淀是抗原和抗体之间专一性地相互作用而沉淀,从而保留下来,其是一种经典的检测蛋白质相互作用的方法。其实验过程比较简单,裂解细胞后,加入抗体,抗原被沉淀下来后洗涤,去除非特异性结合,再分析复合体。抗体可以是单克隆,也可以是多克隆。

  • 第20题:

    沉淀富集痕量组分,对共沉淀剂有什么要求?有机共沉淀剂较无机共沉淀剂有何优点?


    正确答案: 对共沉淀剂的要求主要有:一是对富集的微量组分的回收率要高(即富集效率大);二是不干扰富集组分的测定或者干扰容易消除(即不影响后续测定)。
    有机共沉淀剂较无机共沉淀剂的主要优点:一是选择性高;二是有机共沉淀剂除去(如灼烧);三是富集效果较好。

  • 第21题:

    共沉淀分离根据共沉淀剂性质可分为混晶共沉淀分离和胶体凝聚共沉淀分离。


    正确答案:错误

  • 第22题:

    问答题
    简述生物传感器耦联质谱技术的基本原理。

    正确答案: 生物传感器耦联质谱技术是定性和定量检测蛋白质间相互作用并对其进行鉴定的简便而快速的方法。它是以表面等离子共振(SPR)为基础的生物大分子相互作用的分析技术(BIA)与MALDI-TOF质谱技术的有机结合,其原理是采用1cm*1cm大小的生物传感芯片,该芯片以金黄色的玻璃作为支持物,上面结合有羧甲基葡聚糖聚合物,通过化学修饰可将感兴趣的蛋白质(肽)固定在葡聚糖聚合物上形成传感片,将待测蛋白质或肽溶液通过微射流卡盘流过该固相载体,那些与固相蛋白质(肽)发生相互作用的蛋白质(肽)被滞留在聚合物的表面上,由于芯片表面蛋白质含量增加从而导致入射光的折射率改变,使其表面等离子共振光的共振角发生改变,该改变与表面蛋白的含量呈线性关系,通过SPR-BIA检测系统可实时检测该变化从而实现对蛋白质间相互作用的分析。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    多选题
    基于质谱的蛋白质相互作用研究方法主要有()。
    A

    串联亲和纯化耦联质谱技术

    B

    噬菌体显示技术

    C

    亲和层析耦联质谱技术

    D

    生物传感器耦联质谱技术

    E

    免疫共沉淀耦联质谱技术


    正确答案: A,D
    解析: 暂无解析