简述Southern印迹杂交的原理和方法。

题目

简述Southern印迹杂交的原理和方法。

相似考题

1.RFLP可以用如下方法检测()。A.Southern印迹杂交和Northern印迹杂交B.Southern印迹杂交和PCR后酶切C.PCR后酶切和斑点杂交D.Southern印迹杂交和原位杂交E.PCR后酶切和原位杂交

2.用下列方法进行重组体的筛选，哪项说明外源基因进行了表达 ( )A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、原位菌落杂交D、Western印迹E、基因芯片技术

3.直接检测细胞或组织中的DNA或RNA，常用的方法为 ( )A、菌落印迹杂交B、斑点杂交C、原位杂交D、Southern印迹杂交E、Northern印迹杂交

4.T与B淋巴细胞淋巴瘤基因诊断方法中不正确的是( )。A、反转录PCRB、Southern印迹杂交C、多聚酶链反应(PCR)扩增技术D、Northern印迹杂交E、Western印迹杂交

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  • 第1题：

    简述Southern印迹杂交。


    本题答案：是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。
    其基本原理是：
    具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。
    由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性，综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图谱。
    Southern印迹杂交是研究DNA图谱的基本技术，在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。Southern印迹杂交的基本方法是将DNA标本用限制性内切酶消化后，经琼脂糖凝胶电泳分离各酶解片段，然后经碱变性，Tris缓冲液中和和高盐下通过毛吸作用将DNA从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上、烘干固定后即可用于杂交。凝胶中DNA片段的相对位置在DNA片段转移到滤膜的过程中继续保持着，附着在滤膜上的DNA与32P标记的探针杂交，利用放射自显影术确立探针互补的每一条DNA带的位置，从而可以确定在众多消化产物中含某一特定序列的DNA片段的位置和大小。(琼脂糖凝胶电泳→硝酸纤维素膜吸印)。

  • 第2题：

    A.Northern印迹杂交
    B.亲和层析
    C.Southern印迹杂交
    D.Western印迹杂交
    E.离子交换层析

    用来鉴定RNA的技术是

    答案：A
    解析：

  • 第3题：

    固相杂交不包括（）。

    • A、Northern印迹杂交
    • B、原位杂交
    • C、吸附杂交
    • D、Southern印迹杂交

    正确答案:C

  • 第4题：

    Southern印迹杂交、Northern印迹杂交及Western免疫印迹彼此之间有哪些不同？


    正确答案: （1）检测目标物质不同：Southern印迹杂交检测的是DNA，Northern印迹杂交检测是RNA，Western免疫印迹杂交检测的是蛋白质。
    （2）所用凝胶不同：Southern印迹杂交和Northern印迹杂交用的是琼脂糖凝胶，而Western免疫印迹用的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶。
    （3）是否变性电泳不同：Southern印迹杂交是跑非变性琼脂糖凝胶电泳，电泳之后在凝胶上用NaOH处理使DNA变性，然后转印；Northern印迹杂交实在电泳上样前用甲基氢氧化银、乙二醛或甲醛使RNA变性，而不用NaOH，因为它会水解RNA的2’-OH；Western免疫印迹则是跑变性的聚丙烯酰胺电泳或非变性的聚丙烯酰胺电泳。
    （4）探针不同：Southern印迹杂交、Northern印迹杂交的探针是单链的DNA或RNA，而Western免疫印迹用的探针是特异性抗体蛋白质，而非核酸。

  • 第5题：

    用来鉴定DNA的技术是（）

    • A、Northern印迹杂交
    • B、亲和层析
    • C、Southern印迹杂交
    • D、Western印迹杂交
    • E、离子交换层析

    正确答案:C

  • 第6题：

    Southern印迹杂交是（）

    • A、检测DNA的方法
    • B、检测RNA的方法
    • C、检测蛋白的方法
    • D、检测酶的方法
    • E、既可检测DNA，又可检测RNA的方法

    正确答案:A

  • 第7题：

    常用核酸分子杂交技术不包括（）。

    • A、Southern印迹杂交
    • B、Northern印迹杂交
    • C、Western印迹杂交
    • D、菌落原位杂交
    • E、反向斑点杂交

    正确答案:C

  • 第8题：

    目前mRNA的分子生物学测定方法主要包括（）

    • A、Southern印迹杂交法
    • B、Northern印迹杂交法
    • C、RT-PCR法
    • D、原位杂交
    • E、原位PCR

    正确答案:B,C,D

  • 第9题：

    问答题
    Southern印迹杂交、Northern印迹杂交及Western免疫印迹彼此之间有哪些不同？

    正确答案： （1）检测目标物质不同：Southern印迹杂交检测的是DNA，Northern印迹杂交检测是RNA，Western免疫印迹杂交检测的是蛋白质。
    （2）所用凝胶不同：Southern印迹杂交和Northern印迹杂交用的是琼脂糖凝胶，而Western免疫印迹用的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶。
    （3）是否变性电泳不同：Southern印迹杂交是跑非变性琼脂糖凝胶电泳，电泳之后在凝胶上用NaOH处理使DNA变性，然后转印；Northern印迹杂交实在电泳上样前用甲基氢氧化银、乙二醛或甲醛使RNA变性，而不用NaOH，因为它会水解RNA的2’-OH；Western免疫印迹则是跑变性的聚丙烯酰胺电泳或非变性的聚丙烯酰胺电泳。
    （4）探针不同：Southern印迹杂交、Northern印迹杂交的探针是单链的DNA或RNA，而Western免疫印迹用的探针是特异性抗体蛋白质，而非核酸。
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    问答题
    简述Southern印迹杂交的原理和方法。

    正确答案： Southern印迹杂交是1975年Southern建立起来的一种杂交方法，属固相-液相杂交。该法的主要特点是利用毛细现象将DNA转移到固体支持物上，称为Southern转移或Southern印迹（Southernblot）。它首先用合适的限制性内切核酸酶将DNA切割，进行电泳分离后，利用干燥的吸水纸产生毛细作用，使液体经过凝胶，从而使DNA片段由液流携带从凝胶转移并结合在固体支持物表面，在通过和探针杂交来检测固体支持物表面的DNA。
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    简述Southern印迹杂交。

    正确答案： 是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。
    其基本原理是：
    具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。
    由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性，综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图谱。
    Southern印迹杂交是研究DNA图谱的基本技术，在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。Southern印迹杂交的基本方法是将DNA标本用限制性内切酶消化后，经琼脂糖凝胶电泳分离各酶解片段，然后经碱变性，Tris缓冲液中和和高盐下通过毛吸作用将DNA从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上、烘干固定后即可用于杂交。凝胶中DNA片段的相对位置在DNA片段转移到滤膜的过程中继续保持着，附着在滤膜上的DNA与32P标记的探针杂交，利用放射自显影术确立探针互补的每一条DNA带的位置，从而可以确定在众多消化产物中含某一特定序列的DNA片段的位置和大小。（琼脂糖凝胶电泳→硝酸纤维素膜吸印）。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    T与B淋巴细胞淋巴瘤基因诊断方法中错误的是

    A、Southern印迹杂交

    B、Northern印迹杂交

    C、多聚酶链反应(PCR)扩增技术

    D、反转录PCR

    E、Western印迹杂交


    参考答案：E

  • 第13题：

    简述Southern杂交的原理。


    正确答案:将从组织中得到的DNA加热变性后，用琼脂糖电泳，再转膜于硝酸纤维素膜上，用标记有同位素的DNA探针进行杂交，放射自显影，从而对DNA进行鉴定。

  • 第14题：

    下列哪项技术可以进行基因表达水平异常的检测（）。

    • A、SSCP
    • B、Northern印迹杂交
    • C、Southern印迹杂交
    • D、ASO
    • E、RFLP

    正确答案:B

  • 第15题：

    Southern印迹杂交可用于基因缺失突变型疾病的诊断。


    正确答案:正确

  • 第16题：

    用来鉴定蛋白质的技术是（）

    • A、Northern印迹杂交
    • B、亲和层析
    • C、Southern印迹杂交
    • D、Western印迹杂交
    • E、离子交换层析

    正确答案:D

  • 第17题：

    Southern印迹杂交


    正确答案:是利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与其互补的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的技术。因为该技术由Southern于1975年创建，所以称为Southern印迹杂交技术。

  • 第18题：

    检测经凝胶电泳分离后转移到膜上的RNA，常用的方法为（　）

    • A、菌落印迹杂交 
    • B、斑点杂交 
    • C、原位杂交 
    • D、Southern印迹杂交 
    • E、Northern印迹杂交

    正确答案:E

  • 第19题：

    单选题
    Southern印迹杂交是（）
    A

    检测DNA的方法

    B

    检测RNA的方法

    C

    检测蛋白的方法

    D

    检测酶的方法

    E

    既可检测DNA，又可检测RNA的方法


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    名词解释题
    Southern印迹杂交

    正确答案： 是利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与其互补的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的技术。因为该技术由Southern于1975年创建，所以称为Southern印迹杂交技术。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    Southern印迹杂交是（）。
    A

    是蛋白质的杂交检测

    B

    DNA-DNA的印迹杂交检测

    C

    RNA-蛋白质的印迹杂交检测

    D

    RNA-RNA的印迹杂交检测

    E

    RNA-DNA的印迹杂交检测


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    说明 Southern 杂交的原理和方法。

    正确答案： 1975年Southern 建立起来的一种杂交方法，属固相—液相杂交。该法的主要特点是利用毛细现象将 DNA转移到固体支持物上，称为 Southern 转移或 Southern 印迹(Southem blotting)。它首先用合适的限制性内切核酸酶将 DNA切割，进行电泳分离后，利用干燥的吸水纸产生毛细作用，使液体经过凝胶，从而使 DNA片段由液流携带从凝胶转移并结合在固体支持物表面。
    解析： 暂无解析

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