如何提高PCR DNA聚合酶的保真性？

第1题：

第2题：

第3题：

PCR中使用的DNA聚合酶有哪几种，各具有哪些特点？

正确答案: A.Klenow片段：为DNA聚合酶Ⅰ的片段，有聚合酶活性和3’~5’外切酶活性（最适37℃）；
B.Taq酶：耐热DNA聚合酶，可耐受93～95摄氏度（最适74-75℃），是PCR普及的关键。它避免了不断补加DNA聚合酶的繁琐操作，提高了退火和延伸的温度，减少了非特异性产物和DNA二级结构对PCR的干扰，提高了PCR的特异性、敏感度和产量。它没有3’~5’外切酶活性，无校对功能，点突变较多。依赖镁离子。
C.Stoffel片段：第二代耐热DNA聚合酶，去除Taq酶的5’~3’外切酶活性，将97.5摄氏度的半衰期提高到20min，而Taq酶只有5min；对复合PCR（2个或以上模板位点的PCR）更有效；
D.VentTMDNA多聚酶：耐受100摄氏度以上高温达2h；具有校对功能（3’~5’外切酶活性）。
E.RTth 逆转录酶：有依赖于RNA的耐热DNA聚合酶活性和依赖于DNA的耐热DNA聚合酶活性，这两种活性分别依赖于锰离子和镁离子。

第4题：

以下关于PCR的说法错误的是（）

• A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶
• B、应用PCR技术可以进行定点突变
• C、PCR的引物必须完全和模板互补配对
• D、PCR反应中，仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增

正确答案:C

第5题：

DNA复制过程中，母链遗传信息必须准确地传到子链，即复制的保真性，下列哪种情况可造成复制的失真（）。

• A、AT、GC配对
• B、DNA聚合酶选择配对碱基
• C、DNA聚合酶即时校读
• D、DNA聚合酶依赖模板
• E、DNA聚合酶Ⅲ缺乏ε亚基

正确答案:E

第6题：

对DNA复制的保真性，错误说法是（）。

• A、DNA聚合酶对碱基配对具有选择作用
• B、DNA聚合酶对模板具有识别作用
• C、DNA聚合酶具有5’→3’聚合酶活性
• D、DNA聚合酶具有3’→5’外切酶活性
• E、DNA聚合酶具有内切酶活性

正确答案:E

第7题：

下列哪个有关PCR的陈述是不对的（）。

• A、PCR需要DNA聚合酶
• B、PCR一般需要在高温下进行
• C、PCR需要一段RNA引物
• D、PCR需要DNA模板

正确答案:C

第8题：

PCR技术使用的耐高温的DNA聚合酶是什么？是从哪里找到的？

正确答案:PCR技术使用的耐高温的DNA聚合酶是TaqDNA聚合酶。是从美国黄石公园的一个热泉中的细菌体内找到的。

第9题：

PCR利用热稳定性的DNA聚合酶，因为扩增的每步中双链DNA必须加热变性。

正确答案:正确

第10题：

在进行易错PCR时，添加一定浓度的锰离子，其作用是（）

• A、降低DNA聚合酶对模板的特异性
• B、提高DNA聚合酶对模板的特异性
• C、增强DNA聚合酶的稳定性
• D、提高DNA聚合酶的活力

正确答案:C

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

第15题：

可用于PCR的酶是：（）。

• A、DNA连接酶
• B、DNA聚合酶
• C、解旋酶
• D、引发酶

正确答案:B

第16题：

热稳定的DNA聚合酶是PCR反应的基础。（）

正确答案:正确

第17题：

一个典型的PCR反应需要（）。

• A、引物
• B、模板
• C、dNTP
• D、DNA聚合酶

正确答案:A,B,C,D

第18题：

在基因工程中，RT-PCR反应中使用的酶包括（）。

• A、依赖DNA的RNA聚合酶
• B、依赖DNA的DNA聚合酶
• C、限制性内切核酸酶
• D、DNA连接酶
• E、反转录酶

正确答案:E

第19题：

使用热启动DNA聚合酶可以增加PCR反应的特异性。（）

正确答案:正确

第20题：

PCR反应过程中需使用（）。

• A、限制性核酸内切酶
• B、DNA连接酶
• C、DNA聚合酶
• D、DNA修饰酶

正确答案:C

第21题：

链末端终止法中的PCR循环测序法采用的DNA聚合酶是（）

• A、大肠埃希菌DNA聚合酶
• B、Klenow片段
• C、测序酶
• D、序列酶
• E、TaqDNA聚合酶

正确答案:E

第22题：

第23题：