参考答案和解析
正确答案: A.Klenow片段:为DNA聚合酶Ⅰ的片段,有聚合酶活性和3’~5’外切酶活性(最适37℃);
B.Taq酶:耐热DNA聚合酶,可耐受93~95摄氏度(最适74-75℃),是PCR普及的关键。它避免了不断补加DNA聚合酶的繁琐操作,提高了退火和延伸的温度,减少了非特异性产物和DNA二级结构对PCR的干扰,提高了PCR的特异性、敏感度和产量。它没有3’~5’外切酶活性,无校对功能,点突变较多。依赖镁离子。
C.Stoffel片段:第二代耐热DNA聚合酶,去除Taq酶的5’~3’外切酶活性,将97.5摄氏度的半衰期提高到20min,而Taq酶只有5min;对复合PCR(2个或以上模板位点的PCR)更有效;
D.VentTMDNA多聚酶:耐受100摄氏度以上高温达2h;具有校对功能(3’~5’外切酶活性)。
E.RTth 逆转录酶:有依赖于RNA的耐热DNA聚合酶活性和依赖于DNA的耐热DNA聚合酶活性,这两种活性分别依赖于锰离子和镁离子。
更多“PCR中使用的DNA聚合酶有哪几种,各具有哪些特点?”相关问题
  • 第1题:

    PCR反应体系中不包括的成分是

    A、引物

    B、模板

    C、DNA聚合酶

    D、dNTP

    E、DNA酶


    参考答案:E

  • 第2题:

    在常规PCR反应中,最常选用的酶为( )。

    A.连接酶
    B.Taq DNA聚合酶
    C.拓扑异构酶
    D.引物酶
    E.T4噬菌体DNA聚合酶

    答案:B
    解析:
    PCR反应中,使用的酶为DNA聚合酶,最常用的是Taq DNA聚合酶。

  • 第3题:

    可用于PCR的酶是:()。

    • A、DNA连接酶
    • B、DNA聚合酶
    • C、解旋酶
    • D、引发酶

    正确答案:B

  • 第4题:

    热稳定的DNA聚合酶是PCR反应的基础。()


    正确答案:正确

  • 第5题:

    在基因工程中,RT-PCR反应中使用的酶包括()。

    • A、依赖DNA的RNA聚合酶
    • B、依赖DNA的DNA聚合酶
    • C、限制性内切核酸酶
    • D、DNA连接酶
    • E、反转录酶

    正确答案:E

  • 第6题:

    使用热启动DNA聚合酶可以增加PCR反应的特异性。()


    正确答案:正确

  • 第7题:

    PCR技术使用的耐高温的DNA聚合酶是什么?是从哪里找到的?


    正确答案:PCR技术使用的耐高温的DNA聚合酶是TaqDNA聚合酶。是从美国黄石公园的一个热泉中的细菌体内找到的。

  • 第8题:

    如何提高PCR DNA聚合酶的保真性?


    正确答案: (1)使用Taq DNA聚合酶时,掺入少量具有3’→5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶,错配率可降为原来的1/10;
    (2)使四种dNTP底物浓度相等;
    (3)MgCl2浓度尽可能低;
    (4)减少循环数。

  • 第9题:

    在进行易错PCR时,添加一定浓度的锰离子,其作用是()

    • A、降低DNA聚合酶对模板的特异性
    • B、提高DNA聚合酶对模板的特异性
    • C、增强DNA聚合酶的稳定性
    • D、提高DNA聚合酶的活力

    正确答案:C

  • 第10题:

    单选题
    链末端终止法中的PCR循环测序法采用的DNA聚合酶是()
    A

    大肠埃希菌DNA聚合酶

    B

    Klenow片段

    C

    测序酶

    D

    序列酶

    E

    TaqDNA聚合酶


    正确答案: E
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    名词解释题
    PCR技术(DNA聚合酶链反应)

    正确答案: DNA不需通过克隆而在体外扩增,短时间内合成大量DNA片段的技术
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    问答题
    如何提高PCR DNA聚合酶的保真性?

    正确答案: (1)使用Taq DNA聚合酶时,掺入少量具有3’→5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶,错配率可降为原来的1/10;
    (2)使四种dNTP底物浓度相等;
    (3)MgCl2浓度尽可能低;
    (4)减少循环数。
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    PCR反应的必需成分不包括

    A.dNTP
    B.RNA聚合酶
    C.DNA聚合酶
    D.DNA模版
    E.引物

    答案:B
    解析:
    PCR反应的必需成分不包括RNA聚合酶。

  • 第14题:

    在PCR反应中不需要以下哪种物质参加?()

    • A、DNA
    • B、DNA聚合酶
    • C、RNA
    • D、引物

    正确答案:C

  • 第15题:

    以下关于PCR的说法错误的是()

    • A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶
    • B、应用PCR技术可以进行定点突变
    • C、PCR的引物必须完全和模板互补配对
    • D、PCR反应中,仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增

    正确答案:C

  • 第16题:

    对DNA复制的保真性,错误说法是()。

    • A、DNA聚合酶对碱基配对具有选择作用
    • B、DNA聚合酶对模板具有识别作用
    • C、DNA聚合酶具有5’→3’聚合酶活性
    • D、DNA聚合酶具有3’→5’外切酶活性
    • E、DNA聚合酶具有内切酶活性

    正确答案:E

  • 第17题:

    下列哪个有关PCR的陈述是不对的()。

    • A、PCR需要DNA聚合酶
    • B、PCR一般需要在高温下进行
    • C、PCR需要一段RNA引物
    • D、PCR需要DNA模板

    正确答案:C

  • 第18题:

    在PCR扩增前,需要将下列哪些物质加入微量离心管中?() ①模板DNA ②模板RNA ③DNA解旋酶 ④耐高温的DNA聚合酶 ⑤引物 ⑥PCR缓冲液 ⑦脱氧核苷酸贮备液 ⑧核苷酸贮备液

    • A、①④⑤⑥⑦
    • B、①③④⑤⑥⑧
    • C、②③④⑤⑥⑦
    • D、①④⑥⑦⑧

    正确答案:A

  • 第19题:

    PCR反应过程中需使用()。

    • A、限制性核酸内切酶
    • B、DNA连接酶
    • C、DNA聚合酶
    • D、DNA修饰酶

    正确答案:C

  • 第20题:

    链末端终止法中的PCR循环测序法采用的DNA聚合酶是()

    • A、大肠埃希菌DNA聚合酶
    • B、Klenow片段
    • C、测序酶
    • D、序列酶
    • E、TaqDNA聚合酶

    正确答案:E

  • 第21题:

    PCR利用热稳定性的DNA聚合酶,因为扩增的每步中双链DNA必须加热变性。


    正确答案:正确

  • 第22题:

    判断题
    PCR利用热稳定性的DNA聚合酶,因为扩增的每步中双链DNA必须加热变性。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    PCR中使用的DNA聚合酶有哪几种,各具有哪些特点?

    正确答案: A.Klenow片段:为DNA聚合酶Ⅰ的片段,有聚合酶活性和3’~5’外切酶活性(最适37℃);
    B.Taq酶:耐热DNA聚合酶,可耐受93~95摄氏度(最适74-75℃),是PCR普及的关键。它避免了不断补加DNA聚合酶的繁琐操作,提高了退火和延伸的温度,减少了非特异性产物和DNA二级结构对PCR的干扰,提高了PCR的特异性、敏感度和产量。它没有3’~5’外切酶活性,无校对功能,点突变较多。依赖镁离子。
    C.Stoffel片段:第二代耐热DNA聚合酶,去除Taq酶的5’~3’外切酶活性,将97.5摄氏度的半衰期提高到20min,而Taq酶只有5min;对复合PCR(2个或以上模板位点的PCR)更有效;
    D.VentTMDNA多聚酶:耐受100摄氏度以上高温达2h;具有校对功能(3’~5’外切酶活性)。
    E.RTth 逆转录酶:有依赖于RNA的耐热DNA聚合酶活性和依赖于DNA的耐热DNA聚合酶活性,这两种活性分别依赖于锰离子和镁离子。
    解析: 暂无解析