对cDNA文库进行筛选的策略有哪两种？

第1题：

第2题：

第3题：

什么叫基因组文库？cDNA文库？有什么区别？

正确答案: 基因组文库（genomic DNA library）：指将基因组DNA通过限制性内切酶部分酶解后所产生的基因组DNA片段随机的同相应的载体重组、克隆，所产生的克隆群体代表了基因组DNA所有的序列。
cDNA文库（cDNA library）：指只包括在特定组织或细胞类型中已经被转录成mRNA的所有的基因序列。
区别：
①重组DNA片段来源不同
基因组文库：来源于某特定生物个体的基因组DNA
cDNA文库：来源于细胞中表达出的mRNA
②使用范围不同
基因组文库：开展人类基因组计划研究，构建物理图谱等
cDNA文库：研究某特定细胞中基因组表达状态及表达基因的功能鉴定

第4题：

使用核酸杂交方法筛选cDNA文库时使用的探针有哪几种？

正确答案:1.同源探针（差异显示技术，EST数据库）
2.简并性寡核苷酸探针
3.cDNA探针

第5题：

简述构建cDNA文库的基本操作？

正确答案:（1）细胞总RNA的提取和mRNA分离
（2）第一链cDNA和第二链cDNA合成并连接产生重组DNA
（3）将重组DNA通过载体转入适当的宿主
（4）筛选鉴别重组克隆
（5）扩增和保存文库

第6题：

什么是基因文库？cDNA文库是用于哪类生物细胞的基因制备？

正确答案:基因工程中，将某种生物全部基因组的遗传信息，贮存在可以长期保存的稳定重组体中，以备需要时能够随时应用它分离所需要的目的基因，这种保存基因组遗传信息的材料，称为基因组文库。cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。

第7题：

什么是基因文库？基因组文库与cDNA文库制备方法有何区别？

正确答案: 通过克隆技术将大分子DNA编码的全部或者绝大多数基因或基因组进行扩增后的DNA片段混合物，称为基因文库或DNA文库、克隆库。分为基因组文库和cDNA文库两种。
基因组DNA文库的制备：从生物组织细胞提取出全部DNA，用物理方法（超声波、搅拌剪力等）或酶法（限制性核酸内切酶的不完全酶解）将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适当的载体（常用噬菌体、粘粒或YAC载体）连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子，而且可以繁殖扩增，许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合体，就是基因组文库。
cDNA文库的制备：提取出组织细胞的全部mRNA，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，许多细胞一起组成包含着某细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。

第8题：

cDNA文库

正确答案:人和高等生物细胞的基因转录形成大量各种mRNA。mRNA在逆转录酶作用下，以碱基互补原则合成cDNA。含有全部cDNA的大量克隆就称为cDNA文库。

第9题：

简述cDNA文库构建步骤。

正确答案: （1）酶促合成法制取cDNA，（2）从组织或细胞中制备总RNA和mRNA，（3）合成cDNA第一条链（4）cDNA第二条链的合成

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

第15题：

下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中，不正确的是（）

• A、cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因
• B、如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同
• C、cDNA文厍中的基因都市没有启动子
• D、一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库往往只有一种

正确答案:B

第16题：

简述cDNA的扣除文库的构建。

正确答案: 将两种不同组织来源的mRNA进行比较，用扣除杂交排除相同部分，即共同表达的那部分mRNA，选出有差异的、特异表达的mRNA，构建成的cDNA文库。
构建过程：从两种不同类型的细胞T、D分别提取mRNA，T细胞mRNA逆转录合成单链的cDNA，向T细胞cDNA中过量加入D细胞总mRNA。
两者有共同序列的mRNA和cDNA形成mRNA-cDNA杂合分子，余下单链cDNA代表了仅仅存在于T细胞表达的基因信息。

第17题：

下列关于cDNA文库和该生物基因组文库的说法中，不正确的是（）

• A、cDNA文库中的基因都没有启动子，而基因组文库中的基因有启动子
• B、一种生物的基因组文库只有一种，但是cDNA文库可以有多种
• C、获得cDNA文库中的DNA和基因组文库中的DNA所需的酶相同
• D、cDNA文库中某个基因与基因组文库中某个基因控制的性状可能相同

正确答案:C

第18题：

cDNA文库和基因组文库的主要差别有哪些？

正确答案: （1）基因组文库克隆的是任何基因，包括未知功能的DNA序列；cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因，包括调节基因。
（2）基因组文库克隆的是全部遗传信息，不受时空影响；cDNA文库克隆的是不完全的编码DNA序列，因它受发育和调控因子的影响。
（3）基因组文库中的编码基因是真实基因，含有内含子和外显子，而cDNA文库克隆的是不含内含子的功能基因。

第19题：

cDNA library:cDNA文库

正确答案: 是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。

第20题：

基因文库和cDNA文库有何不同，为什么要建立cDNA文库？

正确答案:基因文库是指整套由基因组DNA片段插入克隆载体获得的分子克隆之总和。cDNA文库是指细胞全部mRNA逆转录成cDNA并被克隆的总和。cDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。  真核生物的基因是断裂的，需经RNA转录后加工过程才使编码序列拼接在一起；真核生物的基因不能直接在原核生物中表达，只有加工成熟的mRNA经逆转录合成的cDNA接上原核生物表达控制元件，才能在原核生物中表达；另外，真核生物细胞中只有一小部分mRNA进行表达，mRNA的稳定性差。因此，需要构建cDNA文库，用于基因表达等方面的研究。

第21题：

第22题：

第23题：