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  • 第1题:

    什么叫基因组文库?cDNA文库?有什么区别?


    正确答案: 基因组文库(genomic DNA library):指将基因组DNA通过限制性内切酶部分酶解后所产生的基因组DNA片段随机的同相应的载体重组、克隆,所产生的克隆群体代表了基因组DNA所有的序列。
    cDNA文库(cDNA library):指只包括在特定组织或细胞类型中已经被转录成mRNA的所有的基因序列。
    区别:
    ①重组DNA片段来源不同
    基因组文库:来源于某特定生物个体的基因组DNA
    cDNA文库:来源于细胞中表达出的mRNA
    ②使用范围不同
    基因组文库:开展人类基因组计划研究,构建物理图谱等
    cDNA文库:研究某特定细胞中基因组表达状态及表达基因的功能鉴定

  • 第2题:

    什么叫文库的代表性?


    正确答案:是指文库中包含的重组cDNA分子是否能完整地反映出来源细胞中表达的全部信息(即mRNA种类),是体现文库质量的最重要指标。

  • 第3题:

    简述在基因组文库中通常提高文库代表性的两种策略。


    正确答案: 1.用机械切割法或限制性内切核酸酶切割法随机断裂DNA,以保证克隆的随机性;
    2.增加文库重组克隆的数目,以提高覆盖基因组的倍数。

  • 第4题:

    什么是基因文库?cDNA文库是用于哪类生物细胞的基因制备?


    正确答案:基因工程中,将某种生物全部基因组的遗传信息,贮存在可以长期保存的稳定重组体中,以备需要时能够随时应用它分离所需要的目的基因,这种保存基因组遗传信息的材料,称为基因组文库。cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。

  • 第5题:

    什么是基因组文库(genomiclibrary)?构建基因组文库,涉及哪些基本过程?它同遗传学上的基因库有什么不同?


    正确答案: 基因组文库是用基因工程的方法,人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或黏粒作为载体,包括下列过程:
    (1)高分子量染色体DNA的制备;
    (2)体外重组连接;
    (3)包装蛋白的制备;
    (4)重组体的体外包装;
    (5)将重组DNA导人寄主细胞;
    (6)筛选。基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。基因库(genepool)是指在进行有性生殖的某一群体中,能进行生殖的个体所含总的遗传信息。在基因组文库的构建中,由于使用的载体不同,分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、YAC文库、BAC文库等。

  • 第6题:

    什么是基因组文库(genomic library)?构建基因组文库涉及哪些基本过程?它同遗传学上的基因库有什么不同?


    正确答案:基因组文库是用基因工程的方法,人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或粘粒作载体,包括下列过程:
    (1)大片段高分子量染色体DNA的制备;
    (2)体外重组连接;
    (3)包装蛋白的制备;
    (4)重组体的体外包装;
    (5)将重组DNA导入寄主细胞;
    (6)在基因组文库的构建中,由于使用的载体不同,分为噬菌体载体和粘粒载体构建基因组文库、YAC文库、BAC文库等。基因组文库和遗传学上的基因库是完全不同的概念。基因库(gene pool)是指在进行有性生殖的某一群体中,能进行生殖的个体所含总的遗传信息。

  • 第7题:

    什么是cDNA文库法?它的构建流程是什么?


    正确答案: cDNA:指体外用逆转录酶催化,以mRNA为模板合成的互补DNA。
    cDNA文库:汇集某生物成熟mRNA为模板逆转录而成cDNA序列的的重组DNA群体.Λ噬菌体和质粒为载体构建。
    操作程序
    (1)总RNA的提取;注意抑制RNA酶的活性,盐酸胍,二乙基焦碳酸;
    (2)mRNA的分离:选用高度分化的组织,末端带有polyA;
    (3)cDNA双链的合成;
    (4)cDNA与载体的连接;
    (5)噬菌体的包装以及转染或质粒的转化。

  • 第8题:

    单选题
    根据构建方法的不同,基因文库分为基因组文库、cDNA 文库等。在下列文库中,()属 cDNA 文库。
    A

    YAC文库

    B

    MAC文库

    C

    扣减文库

    D

    BAC文库


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    问答题
    什么是基因组文库(genomic library)?构建基因组文库涉及哪些基本过程?它同遗传学上的基因库有什么不同?

    正确答案: 基因组文库是用基因工程的方法,人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或粘粒作载体,包括下列过程:
    (1)大片段高分子量染色体DNA的制备;
    (2)体外重组连接;
    (3)包装蛋白的制备;
    (4)重组体的体外包装;
    (5)将重组DNA导入寄主细胞;
    (6)在基因组文库的构建中,由于使用的载体不同,分为噬菌体载体和粘粒载体构建基因组文库、YAC文库、BAC文库等。基因组文库和遗传学上的基因库是完全不同的概念。基因库(gene pool)是指在进行有性生殖的某一群体中,能进行生殖的个体所含总的遗传信息。
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    问答题
    什么是cDNA文库?同基因组文库有何差别?

    正确答案: (1)cDNA是指以mRNA为模板,在逆转录酶的作用下形成的互补DNA。以细胞的全部mRNA逆转录合成的cDNA组成的重组克隆群体称为cDNA文库。
    基因组文库指的是将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞,进行克隆得到的所有重组体内的基因组DNA片段的集合,它包含了该生物的所有基因。
    (2)基因组文库与cDNA文库的差别:
    ①基因组文库中包含了甩有的基因,而cDNA文库只包含表达的基因,缺乏内元和调节序列,因此在研究基因结构时没有多大用处。
    ②cDNA文库代表了mRNA的来源,其中一些特定的转录本丰富而另一些很少,所以存在丰度的差别;而基因组文库在理论上均等地代表了所有基因序列。
    ③从不同细胞类型制备的cDNA文库包含一些共同序列和独特序列,可用于分离差别表达的基因;基因组文库中不能。
    ④基因组文库由于含有不表达序列,因此比cDNA文库大。
    ⑤mRNA在不同的组织之间存在丰度的差异,因此cDNA文库的在构建时对于mRNA含量较少的就比较困难,而基因组文库不存在这样的问题。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    问答题
    什么叫文库的代表性?

    正确答案: 是指文库中包含的重组cDNA分子是否能完整地反映出来源细胞中表达的全部信息(即mRNA种类),是体现文库质量的最重要指标。
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    问答题
    什么是cDNA文库(complement DNA library)?同基因组文库有何差别?

    正确答案: 选用适合的载体,将合成的 cDNA 重组导人寄主细胞,经筛选得到的 cDNA 克隆群称为 cDNA 文库。cDNA文库与基因组文库的主要差别是:
    (1)基因组文库克隆的是任何基因,包括未知功能的 DNA序列,cDNA 文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因,包括调节基因;
    (2)基因组文库克隆的是全部遗传信息,不受时空影响;cDNA 文库克隆的是不完全的编码DNA序列,因它受发育和调控因子的影响;
    (3)基因组文库中的编码基因是真实基因,含有内含子和外显子;而 cDNA 克隆的是不含内含子的基因。
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    什么叫文库的库容量?有什么意义?


    正确答案: 文库的库容量:它是指构建出的原始cDNA文库中所包含的独立的重组子克隆数。
    意义:它是衡量文库代表性好坏的量化指标。

  • 第14题:

    什么是基因文库?什么是c-DNA文库?


    正确答案:用DNA重组技术将某种生物的总DNA用特定的限制性内切酶切割成一个个片段,然后将这些片段随机地连接在某些质粒或其他载体上,再将它们转移到适当的宿主细胞中,通过细胞的增殖而构成各个片段的无性繁殖系(克隆),当这些克隆多到可以包括某种生物的全部基因时,这一批克隆的总体就称为该种生物的基因文库。
    把一个细胞中某以时刻所有mRNA为模板,反转录合成它们的互补DNA(cDNA)。然后所有的cDNA克隆至大量载体上导入大量细菌,而得到的一个cDNA集合体,就称为cDNA文库。

  • 第15题:

    什么是基因组文库法?其构建方法是怎样的?


    正确答案: 采用限制性酶将基因组DNA切成片段,每一DNA片段都与一个载体分子拼接成重组DNA。将所有的重组DNA分子都引入宿主细胞并进行扩增,得到分子克隆的混合体。简单的说就是汇集某一基因组所有DNA序列的重组DNA群体。以λ噬菌体和柯斯质粒为载体构建。
    其具体的构建方法:
    (1)从生物体提取大片断的基因组DNA;
    (2)用适当的限制性内切酶(常为4碱基识别位点)进行部分酶切或超声波打断基因组DNA;
    (3)在琼脂凝胶电泳上或蔗糖梯度离心筛选适当长度的DNA片断(根据载体的要求);
    (4)载体的酶切、回收;
    (5)将处理好的基因组DNA片断与载体连接;
    (6)将重组子导入宿主细胞;
    (7)文库的鉴定、收集、保存。

  • 第16题:

    什么叫代表性露点?如何选取代表性露点?


    正确答案: 在适当地点适当时间选定的地面露点值所对应的可降水量能反映暴雨期间输入雨区水汽量的多少,这个地面露点值称为暴雨代表性露点。
    选取代表性露点的方法:在暖湿空气的入流方向大暴雨区边缘选取几个测站(一般4~5个),并取群站露点的平均值;每个测站代表性地面露点的选取,是包括最大24h暴雨期及前24h共48h内选取的持续12h最高露点值。

  • 第17题:

    什么是基因文库?基因组文库与cDNA文库制备方法有何区别?


    正确答案: 通过克隆技术将大分子DNA编码的全部或者绝大多数基因或基因组进行扩增后的DNA片段混合物,称为基因文库或DNA文库、克隆库。分为基因组文库和cDNA文库两种。
    基因组DNA文库的制备:从生物组织细胞提取出全部DNA,用物理方法(超声波、搅拌剪力等)或酶法(限制性核酸内切酶的不完全酶解)将DNA降解成预期大小的片段,然后将这些片段与适当的载体(常用噬菌体、粘粒或YAC载体)连接,转入受体细菌或细胞,这样每一个细胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子,而且可以繁殖扩增,许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合体,就是基因组文库。
    cDNA文库的制备:提取出组织细胞的全部mRNA,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,许多细胞一起组成包含着某细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。

  • 第18题:

    基因文库和cDNA文库有何不同,为什么要建立cDNA文库?


    正确答案:基因文库是指整套由基因组DNA片段插入克隆载体获得的分子克隆之总和。cDNA文库是指细胞全部mRNA逆转录成cDNA并被克隆的总和。cDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。  真核生物的基因是断裂的,需经RNA转录后加工过程才使编码序列拼接在一起;真核生物的基因不能直接在原核生物中表达,只有加工成熟的mRNA经逆转录合成的cDNA接上原核生物表达控制元件,才能在原核生物中表达;另外,真核生物细胞中只有一小部分mRNA进行表达,mRNA的稳定性差。因此,需要构建cDNA文库,用于基因表达等方面的研究。

  • 第19题:

    cDNA文库有什么特点?其制备的流程如何?


    正确答案:某种生物基因组转录的全部mRNA经反转录产生的cDNA片段分别与克隆载体重组,并将其引入到相应的宿主细胞中(一般为E.coli.)繁殖和扩增,理论上此群体就包含有该物种的全部mRNA信息,称该生物基因组的cDNA文库。
    特点:可得到表达序列信息;可直接用于外源基因的表达;可用于表达产物的分析;但是由于只能克隆表达性基因,其信息不全,不能得到全部基因的信息;同时由于真核生物基因表达经过加工,cDNA文库不能提供内含子信息等。
    基本步骤有4步:
    第一,细胞总RNA的提取和mRNA分离;
    第二,第一链cDNA合成;
    第三,第二链cDNA合成;
    第四,双链cDNA克隆进质粒或噬菌体载体并导入宿主中繁殖。

  • 第20题:

    问答题
    什么叫代表性露点?如何选取代表性露点?

    正确答案: 在适当地点适当时间选定的地面露点值所对应的可降水量能反映暴雨期间输入雨区水汽量的多少,这个地面露点值称为暴雨代表性露点。
    选取代表性露点的方法:在暖湿空气的入流方向大暴雨区边缘选取几个测站(一般4~5个),并取群站露点的平均值;每个测站代表性地面露点的选取,是包括最大24h暴雨期及前24h共48h内选取的持续12h最高露点值。
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    问答题
    什么叫基因组文库?cDNA文库?有什么区别?

    正确答案: 基因组文库(genomic DNA library):指将基因组DNA通过限制性内切酶部分酶解后所产生的基因组DNA片段随机的同相应的载体重组、克隆,所产生的克隆群体代表了基因组DNA所有的序列。
    cDNA文库(cDNA library):指只包括在特定组织或细胞类型中已经被转录成mRNA的所有的基因序列。
    区别:
    ①重组DNA片段来源不同
    基因组文库:来源于某特定生物个体的基因组DNA
    cDNA文库:来源于细胞中表达出的mRNA
    ②使用范围不同
    基因组文库:开展人类基因组计划研究,构建物理图谱等
    cDNA文库:研究某特定细胞中基因组表达状态及表达基因的功能鉴定
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    问答题
    什么是基因组文库(genomic library)?构建基因组文库,涉及哪些基本过程?它同遗传学上的基因库有什么不同?

    正确答案: 基因组文库是用基因工程的方法,人工构建的含有某一生物基因组 DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体 DNA或黏粒作为载体,包括下列过程:
    (1)高分子量染色体 DNA的制备;
    (2)体外重组连接;
    (3)包装蛋白的制备;
    (4)重组体的体外包装;
    (5)将重组 DNA导人寄主细胞;
    (6)筛选。
    基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。基因库(gene p001)是指在 进行有性生殖的某一群体中,能进行生殖的个体所含总的遗传信息。在基因组文库 的构建中,由于使用的载体不同,分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、YAC 文库、BAC 文库等。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    基因文库和cDNA文库有何不同,为什么要建立cDNA文库?

    正确答案: 基因文库是指整套由基因组DNA片段插入克隆载体获得的分子克隆之总和。cDNA文库是指细胞全部mRNA逆转录成cDNA并被克隆的总和。cDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。  真核生物的基因是断裂的,需经RNA转录后加工过程才使编码序列拼接在一起;真核生物的基因不能直接在原核生物中表达,只有加工成熟的mRNA经逆转录合成的cDNA接上原核生物表达控制元件,才能在原核生物中表达;另外,真核生物细胞中只有一小部分mRNA进行表达,mRNA的稳定性差。因此,需要构建cDNA文库,用于基因表达等方面的研究。
    解析: 暂无解析

  • 第24题:

    问答题
    什么叫文库的库容量?有什么意义?

    正确答案: 文库的库容量:它是指构建出的原始cDNA文库中所包含的独立的重组子克隆数。
    意义:它是衡量文库代表性好坏的量化指标。
    解析: 暂无解析