提高PCR反应的特异性一般可以使用哪几种方法？

题目

提高PCR反应的特异性一般可以使用哪几种方法？

相似考题

1.关于PCR技术的扩展，下列叙述错误的是A、多重PCR是在一次反应中加入多种引物，同时扩增一份DNA样品中的不同序列B、筑巢法PCR可以大大提高PCR的效率，但PCR特异性降低C、利用反向PCR，可以扩增已知序列区间以外的序列D、利用不对称PCR，可以获得大量单链DNAE、共享引物PCR是利用3条引物来扩增两种不同的DNA序列，这种PCR常用于细菌学鉴定，确定同一种细菌的不同种类

2.PCR扩增仪升降温速度快有很多优点，以下哪一项应除外A、缩短反应时间B、提高工作效率C、消除位置的边缘效应D、缩短非特异性反应时间E、提高反应特异性

3.以下关于梅毒螺旋体核酸检测－聚合酶链反应(PCR)的认识,错误的是()。A、PCR检测TP DNA，特异性很强，敏感性很高B、当前诊断梅毒的PCR仍存在引物的非特异性、对血清(全血)、CSF等敏感度低C、PCR检测可作为判愈检测D、PCR方法易受标本中的组织和细胞碎片等物质抑制E、当皮损开始愈合分泌物减少，血清学试验阳性反应时，采用PCR方法不合适

4.抗原抗体反应必须有电解质参与，当电解质超出最佳反应浓度时，可以A、提高反应的敏感性B、降低反应的敏感性C、抗原抗体不发生反应D、降低反应的特异性E、提高反应的特异性

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  • 第1题：

    PCR引物长度一般为15～30个核苷酸。过短影响PCR的特异性，过长会提高相应退火温度，使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成。


    正确答案:正确

  • 第2题：

    实时荧光定量PCR的优点包括（）。

    • A、实时监控PCR反应的进程
    • B、特异性高于普通PCR
    • C、灵敏度高
    • D、在单管中实现扩增和检测分析

    正确答案:A,B,C,D

  • 第3题：

    对于一般的培训活动，需求的预测可以采用哪几种方法？


    正确答案: ①业务分析；
    ②组织分析；
    ③工作分析；
    ④调查分析；
    ⑤绩效考评；
    ⑥评价中心。

  • 第4题：

    Mg2+在PCR反应中的作用，错误的是（　）

    • A、提高TaqDNA聚合酶活性
    • B、稳定PCR反应体系
    • C、当dNTP的浓度为200nmol/L时，MgCl2浓度一般为1.5mmol/L较合适
    • D、在PCR中发挥作用的是结合Mg2+
    • E、Mg2+浓度过低使酶活力升高，还会使酶催化非特异性扩增

    正确答案:D,E

  • 第5题：

    什么是PCR，有什么特点，扩增反应有哪几个步骤？


    正确答案: PCR即聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)，具有特异、敏感、快速等特点。扩增反应包括3个步骤，变性、退火（复性）、延伸3个步骤。

  • 第6题：

    选购瓷器一般可以采取哪几种方法？


    正确答案:1、通过“看、听、比、试”检验瓷器的质量。
    2、艺术瓷还应从成型、釉色、画工、烧成次数、作品数量及作者知名度等方面对艺术瓷的价值予以评价。

  • 第7题：

    实时荧光定量RT-PCR是（）。

    • A、可以实现初始模板拷贝数的定量
    • B、SYBR GreenⅠ特异性强
    • C、原理利用了临界点循环
    • D、利用PCR最终产物量高低进行定量
    • E、特异的分子信标探针可以提高定量的准确性

    正确答案:A,C,E

  • 第8题：

    一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为（）。

    • A、普通PCR仪
    • B、梯度PCR仪
    • C、原位PCR仪
    • D、荧光PCR仪
    • E、实时PCR仪

    正确答案:B

  • 第9题：

    多选题
    实时荧光定量RT-PCR是（）。
    A

    可以实现初始模板拷贝数的定量

    B

    SYBR GreenⅠ特异性强

    C

    原理利用了临界点循环

    D

    利用PCR最终产物量高低进行定量

    E

    特异的分子信标探针可以提高定量的准确性


    正确答案： D,A
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    问答题
    选购瓷器一般可以采取哪几种方法？

    正确答案： 1、通过“看、听、比、试”检验瓷器的质量。
    2、艺术瓷还应从成型、釉色、画工、烧成次数、作品数量及作者知名度等方面对艺术瓷的价值予以评价。
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    提高PCR反应的特异性一般可以使用哪几种方法？

    正确答案： A.引物设计：引物长度、碱基配对是否严格、GC%含量、退火温度、引物浓度与纯度、稳定性、是否为简并性引物等；
    B.使用热启动：在变性完成之后再加入DNA聚合酶（或聚合酶才有活性），这样可以提高特异性，因为DNA聚合酶在低温时也有活性，可能引起非特异的扩增；
    C.镁离子浓度：不同的模板和引物有不同的镁离子浓度，应进行预实验进行探索；较高的镁离子浓度会提高产量，同时降低特异性；dNTP浓度较高时应适当提高镁离子浓度；
    D.促进PCR的添加剂：降低DNA熔解温度，从而有助于引物退火并辅助DNA聚合酶延伸通过二级结构区，可提高特异性和产率；
    E.使用巢式PCR：降低扩增多个靶位点的可能性，提高特异性。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    什么是PCR，有什么特点，扩增反应有哪几个步骤？

    正确答案： PCR即聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)，具有特异、敏感、快速等特点。扩增反应包括3个步骤，变性、退火（复性）、延伸3个步骤。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    PCR反应的特异性与（）直接相关。

    • A、模版的质量
    • B、DNA聚合酶的质量
    • C、引物的特异性
    • D、退火温度

    正确答案:A,B,C,D

  • 第14题：

    提高PCR特异性的方法包括（）。

    • A、增强引物特异性
    • B、提高退火温度
    • C、提高模版质量
    • D、使用热启动聚合酶

    正确答案:A,B,C,D

  • 第15题：

    使用ERASE命令删除的实体能否被恢复，如果可以，有哪几种方法？


    正确答案: 使用删除命令删除的实体能被恢复，主要有以下几种方法：
    1、使用UNDO命令来恢复
    2、可以使用编辑→撤消来进行恢复
    3、Ctrl+Z

  • 第16题：

    在PCR反应中，导致非特异性扩增的因素包括（）、（）和（）等。


    正确答案:引物长度；引物浓度；dNTP浓度

  • 第17题：

    使用热启动DNA聚合酶可以增加PCR反应的特异性。（）


    正确答案:正确

  • 第18题：

    提高反应压力有哪几种方法？


    正确答案:有两种方法，提高系统压力或提高氢浓度以提高氢分压。

  • 第19题：

    除下列哪项外都是聚合酶链反应（PCR）技术用于检测结核菌的优点（）

    • A、敏感性高
    • B、特异性强
    • C、比培养法时间缩短
    • D、PCR阳性可以确诊结核病
    • E、阳性率高于涂片与培养

    正确答案:D

  • 第20题：

    在进行DNA重组实验中，首先要获得目的基因，一般不使用下面哪种方法（）。

    • A、从细胞内部总DNA提取分离目的基因
    • B、构建基因文库，从中调取目的基因
    • C、以mRNA为模板，逆转录合成互补的DNA片段
    • D、利用PCR特异性地扩增所需要的目的基因

    正确答案:A

  • 第21题：

    问答题
    对于一般的培训活动，需求的预测可以采用哪几种方法？

    正确答案： ①业务分析；
    ②组织分析；
    ③工作分析；
    ④调查分析；
    ⑤绩效考评；
    ⑥评价中心。
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    判断题
    PCR引物长度一般为15～30个核苷酸。过短影响PCR的特异性，过长会提高相应退火温度，使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 错
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    填空题
    在PCR反应中，导致非特异性扩增的因素包括（）、（）和（）等。

    正确答案： 引物长度,引物浓度,dNTP浓度
    解析： 暂无解析

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