简述巢式PCR。

题目

简述巢式PCR。

相似考题

1.按变温方式不同，PCR基因扩增仪可分为A、水浴式PCR仪B、梯度PCR仪C、原位PCR仪D、变温金属块式PCR仪E、变温气流式PCR仪

2.巢式PCR与普通PCR不同的是A、普通PCR比巢式PCR特异性高B、酶不同C、底物不同D、模板不同E、前者用2对引物，后者用1对引物

3.普通PCR基因扩增仪除通常的定性PCR仪外，还包括A、水浴式PCR仪B、梯度PCR仪C、原位PCR仪D、变温金属块式PCR仪E、变温气流式PCR仪

4.温度均一性较好的PCR仪为A、水浴锅PCR基因扩增仪和压缩机PCR基因扩增仪B、半导体PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪C、压缩机PCR基因扩增仪和半导体PCR基因扩增仪D、压缩机PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪E、水浴锅PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪

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  • 第1题：

    以RNA为模板的DNA扩增技术是()。

    A、原位PCR技术

    B、巢式PCR技术

    C、反向PCR技术

    D、RT-PCR技术


    答案：D

  • 第2题：

    不属于病毒核酸检测的PCR技术的是

    A.定量-PCR
    B.巢式PCR
    C.PCR-DNA
    D.HPLC
    E.RT-PCR

    答案：D
    解析：

  • 第3题：

    能使扩增灵敏度提高的方法是（）

    • A、多重PCR
    • B、巢式PCR
    • C、原位PCR
    • D、反向PCR
    • E、不对称PCR

    正确答案:B

  • 第4题：

    能对未知序列进行扩增的PCR是（）

    • A、多重PCR
    • B、巢式PCR
    • C、原位PCR
    • D、反向PCR
    • E、不对称PCR

    正确答案:D

  • 第5题：

    巢氏PCR


    正确答案:是一种变异的聚合酶链反应（PCR），使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对引物称为巢式引物（因为他们在第一次PCR扩增片段的内部）结合在第一次PCR产物内部，使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增。巢式PCR的好处在于，如果第一次扩增产生了错误片段，则第二次能在错误片段上进行引物配对并扩增的概率极低。因此，巢式PCR的扩增非常特异。

  • 第6题：

    简述易错PCR技术与常规PCR技术的异同点。


    正确答案:易错PCR技术是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应（PCR），使扩增得到的基因出现碱基配对错误，而引起基因突变的技术过程。
    易错PCR技术与常规PCR技术有很多相同之处，都是用DNA聚合酶为催化剂，使用四种脱氧核苷三磷酸为底物，都要添加镁离子，其操作过程也相同，都经过双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸三个步骤。
    （1）双链DNA的变性（解链）：将待扩增的模板DNA升温至85~95℃，使DNA双链之间的氢键断开，解离为单链DNA。
    （2）引物与单链DNA退火结合：单链DNA在温度逐步降低至50~70℃时，会与其碱基互补的引物结合形成双链，引物是经过设计后人工合成的与模板DNA某一片段互补的寡核苷酸链，长度为15~30个碱基。
    （3）引物延伸：引物结合后，将温度升高至70~75℃，在DNA聚合酶的作用下，以引物为起点，以四种脱氧核苷三磷酸为底物，以目标DNA链为模板，按照碱基配对原则，由5′-端向3′-端的方向延伸，而进行DNA复制。以上三个步骤反复进行，一般经过30次循环，即可使目的基因扩增几百万倍。
    易错PCR技术与常规PCR技术的主要不同点在于反应条件有所不同。
    （1）在易错PCR中镁离子浓度较高：常规PCR扩增时，镁离子浓度为0.5~2.5mmol/L，进行易错PCR时，在原有基础上提高镁离子的浓度，以稳定非互补的碱基对。
    （2）在易错PCR中可以添加一定浓度的锰离子，以降低聚合酶对模板的特异性，而常规PCR不用添加锰离子。
    （3）在易错PCR中四种底物（dATP、dTTP、dCTP、dGTP）的浓度比改版，即采用浓度不平衡的各种底物，是DNA聚合酶在催化基因扩增时，碱基配对错误的出现频率增加，而容易引起基因突变。

  • 第7题：

    名词解释题
    巢式PCR

    正确答案： 巢式PCR：巢式PCR有两对引物，一对引物对应的序列在模板外测，称外引物，另一对引物互补序列在同一模板的外引物的内侧，称内引物，即外引物扩增产物较长，含有内引物扩增的靶序列，经过二次PCR放大将单拷贝的目的DNA序列检出。巢式PCR最大的优点是灵敏度大大提高。
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    单选题
    不属于病毒核酸检测的PCR技术的是（）
    A

    PCR-DNA

    B

    HPLC

    C

    定量-PCR

    D

    RT-PCR

    E

    巢式PCR


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    单选题
    能使扩增灵敏度提高的方法是（）
    A

    多重PCR

    B

    巢式PCR

    C

    原位PCR

    D

    反向PCR

    E

    不对称PCR


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    多选题
    普通PCR基因扩增仪除通常的定性PCR仪外，还包括（）
    A

    水浴式PCR仪

    B

    梯度PCR仪

    C

    原位PCR仪

    D

    变温金属块式PCR仪

    E

    变温气流式PCR仪


    正确答案： E,B
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    巢式PCR与普通PCR相比（）
    A

    普通PCR比巢式PCR敏感

    B

    所用酶不同

    C

    所用底物不同

    D

    模板不同

    E

    前者用两对引物，后者用一对引物


    正确答案： A
    解析： 巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应（PCR），使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。

  • 第12题：

    多选题
    检测血清丙型肝炎病毒（HCV）核酸，可采用的方法有（）
    A

    PCR

    B

    Real-timePCR

    C

    逆转录PCR

    D

    巢式PCR

    E

    逆转录套式PCR


    正确答案： A,C
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    关于巢式PCR的叙述，正确的是

    A、巢式PCR多用于比较难于扩增或含量比较低的模板

    B、进行两轮扩增，第1次扩增的片段较第2次小

    C、两次扩增的引物相同

    D、巢式PCR比常规PCR更不容易出现污染

    E、第1次扩增的产物作为第2次扩增的引物


    参考答案：A

  • 第14题：

    巢式PCR与普通PCR相比（）

    • A、普通PCR比巢式PCR敏感
    • B、所用酶不同
    • C、所用底物不同
    • D、模板不同
    • E、前者用两对引物，后者用一对引物

    正确答案:E

  • 第15题：

    巢式PCR


    正确答案:巢式PCR：巢式PCR有两对引物，一对引物对应的序列在模板外测，称外引物，另一对引物互补序列在同一模板的外引物的内侧，称内引物，即外引物扩增产物较长，含有内引物扩增的靶序列，经过二次PCR放大将单拷贝的目的DNA序列检出。巢式PCR最大的优点是灵敏度大大提高。

  • 第16题：

    检测血清丙型肝炎病毒（HCV）核酸，可采用的方法有（）

    • A、PCR
    • B、Real-timePCR
    • C、逆转录PCR
    • D、巢式PCR
    • E、逆转录套式PCR

    正确答案:B,C,E

  • 第17题：

    不属于病毒核酸检测的PCR技术的是（）

    • A、PCR－DNA
    • B、HPLC
    • C、定量PCR
    • D、RT－PCR
    • E、巢式PCR

    正确答案:B

  • 第18题：

    名词解释题
    巢氏PCR

    正确答案： 是一种变异的聚合酶链反应（PCR），使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对引物称为巢式引物（因为他们在第一次PCR扩增片段的内部）结合在第一次PCR产物内部，使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增。巢式PCR的好处在于，如果第一次扩增产生了错误片段，则第二次能在错误片段上进行引物配对并扩增的概率极低。因此，巢式PCR的扩增非常特异。
    解析： 暂无解析

  • 第19题：

    单选题
    以下试验均为病毒核酸检测的PCR技术，除外是（）
    A

    PCR-DNA

    B

    RT-PCR

    C

    定量-PCR

    D

    HPLC

    E

    巢式PCR


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    多选题
    按变温方式不同，PCR基因扩增仪可分为（）。
    A

    水浴式PCR仪

    B

    梯度PCR仪

    C

    原位PCR仪

    D

    变温金属块式PCR仪

    E

    变温气流式PCR仪


    正确答案： C,D
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    关于传染性造血器官坏死病病原的实验室诊断的叙述正确的是（　　）。
    A

    只有PCR和嵌套式PCR都扩展出带来才是阳性

    B

    PCR无带但嵌套式PCR有带可判为阳性

    C

    PCR有带但嵌套式PCR无带可判为阳性

    D

    PCR和嵌套式PCR均有带，不可判为患有该病


    正确答案： A
    解析：
    ABC三项，对于无临床症状的鱼检测样品，由于普通PCR检查存在一定的误差，对于有些样品不一定能检出，而嵌套式PCR具有更好的特异性和灵敏性，所以只要能用嵌套式PCR可以检出则可判为阳性。D项，无临床症状但PCR和嵌套式PCR均有带，可判为患有该病。

  • 第22题：

    问答题
    简述巢式PCR。

    正确答案： 由两轮PCR和两套引物组成。首先对靶DNA进行第一步扩增，然后从第一次反应产物中取出少量作为模板进行第二次扩增，第二次PCR引物与第一步反应产物序列互补，第二次PCR扩增产物即为目的产物。提高特异性和灵敏性。外侧引物25bp，退火温度高(68℃)；内侧引物17bp，退火温度低(46℃)。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    温度均一性较好的PCR仪为（）
    A

    水浴锅PCR基因扩增仪和压缩机PCR基因扩增仪

    B

    半导体PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪

    C

    压缩机PCR基因扩增仪和半导体PCR基因扩增仪

    D

    压缩机PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪

    E

    水浴锅PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

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