简述琼脂扩散法（管碟法）测定抗生素生物效价的原理及实验步骤。
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简述琼脂扩散法（管碟法）测定抗生素生物效价的原理及实验步骤。
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第1题：
β-内酰胺类抗生素经水解后用以测定含量
A．生物效价法
B．碘量法
C．中和法
D．汞量法
E．分光光度法
正确答案：BDE
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第2题：
药品检验时主要采用管碟法、浊度法检验的是A.非无菌药品的微生物检验
B.药物的效价测定
C.委托检验
D.复核检验
E.体内样品的测定答案：B解析：药品效价检验时主要采用管碟法、浊度法检验。 -
第3题：
抗生素微生物检定法中管碟琼脂扩散法包括（）。
A一剂量法
B二剂量法
C三剂量法
D四剂量法
E五剂量法
A,B,C
略 -
第4题：
管碟法精确测定抗生素效价需要满足的条件有哪些？
正确答案:（1）抑菌圈要圆且边缘清晰；
（2）抗生素浓度与抑菌圈直径的直线范围应宽；
（3）标准品与样品所作的直线应互相平行；
（4）直线的斜率、直线的截距应小。 -
第5题：
简述抗生素微生物检定法有几种？国内采用哪种方法？琼脂扩散法（管碟法）其原理是什么？
正确答案: 抗生素微生物检定法，依试验设计原理不同，可分为稀释法、比浊法、琼脂扩散法三种。目前国内采用的是后两种方法。
琼脂扩散法是利用抗生素在摊布特定试验菌的固体培养基内成球面扩散，形成含一定浓度抗生素球形区，抑制了试验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈。此法是根据抗生素在一定浓度范围内，对数剂量与抑菌圈直径（面积）呈直线关系而设计，通过检测抗生素对微生物的抑制作用，比较标准品与供试品产生抑菌圈的大小，计算出供试品的效价。 -
第6题：
用琼脂双扩散法对荧光抗体效价进行滴定，效价一般应大于（）
- A、1：4
- B、1：8
- C、1：16
- D、1：32
- E、1：64
正确答案:C -
第7题：
噬菌体的检查根据什么原理？试述单层琼脂平板法检查噬菌体和双层琼脂平板法测定噬菌体效价的方法及操作过程。
正确答案: 噬菌体侵染敏感寄主细胞后，释放出子代噬菌体，通过琼脂再扩散到周围的细胞中，继续侵染引起更多细胞裂解，从而在平板上形成一个个肉眼可见的透亮无菌近圆形的空斑，称为噬菌斑，它是噬菌体存在的一种特性标志，由此检出噬菌体的存在。单层琼脂法将指示菌液和经适当稀释的噬检液与单层培养基一起倾注平板。充分混匀并凝固后，置适温下培养约12h，观察计数。此法较简便，可用于噬菌体的效价测定。但若培养基较厚易产生上下噬菌斑重叠现象，影响计数的准确性。双层琼脂法一般采用的效价测定方法。双层琼脂法是先用含2％琼脂的固体培养基倾注底层平板，再在其上倾注一薄层半固体上层培养基，上层培养基事先已与对数期指示菌液和噬检液混合均匀。经适温培养后，便可观察计数。此法的优点是所形成的全部噬菌斑基本处于同一平面上，因而各斑大小均匀，边缘清晰易见，不发生上下噬菌斑重叠现象。此外，因上层半固体培养基较稀，使形成的噬菌斑较大，也有利于计数。因此，该法是一种被普遍采用并能精确测定效价的方法。 -
第8题：
什么是效价?简述测定噬菌体效价的双层平板法。
正确答案: 效价表示每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体粒子数。双层平板法主要步骤：预先分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底层培养基在培养皿上浇一层平板，待凝固后，再把预先融化并冷却到45℃以下，加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬菌体样品上层培养基，在试管中摇匀后，立即倒在底层培养基上铺平待凝，然后在37℃下保温。一般经10余h后即可对噬菌斑计数。 -
第9题：
问答题简述软琼脂法细胞克隆形成实验的步骤及应用。正确答案： （1）用蒸馏水分别制备出1.2％和0.7％两个浓度的低溶点琼脂糖，高压灭菌后，维持在40℃中不会凝固。
（2）取对数生长期细胞，0.25％胰酶消化并轻轻吹打，使之成为单细胞，作做细胞计数，用20％胎牛血清的DMEM培养液调整细胞密度至1×106细胞/L。然后根据实验要求作梯度倍数稀释。
（3）按1：1比例使1.2％的琼脂糖和2×DMEM培养基混合后，取3ml混合液注入直径6cm平皿中（10cm平皿中加7~10ml），冷却凝固，可作底层琼脂，置CO2温箱中备用。
（4）按1：1比例让0.7％的琼脂糖和2×DMEM培养基在无菌试管中相混以后，再向管中加入0.2ml的细胞悬液，充分混匀，注入铺有1.2％的琼脂糖底层平皿中，逐渐形成双琼脂层。待上层琼脂凝固后，置入37℃、5％CO2温箱中培养10~14天。
（5）把平皿放置在倒置显微镜下，观察细胞克隆数。计算形成率。
应用：常用于检测肿瘤细胞和转化细胞系解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题简述抗生素微生物检定法有几种？国内采用哪种方法？琼脂扩散法（管碟法）其原理是什么？正确答案： 抗生素微生物检定法，依试验设计原理不同，可分为稀释法、比浊法、琼脂扩散法三种。目前国内采用的是后两种方法。
琼脂扩散法是利用抗生素在摊布特定试验菌的固体培养基内成球面扩散，形成含一定浓度抗生素球形区，抑制了试验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈。此法是根据抗生素在一定浓度范围内，对数剂量与抑菌圈直径（面积）呈直线关系而设计，通过检测抗生素对微生物的抑制作用，比较标准品与供试品产生抑菌圈的大小，计算出供试品的效价。解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题试述抗生素管碟法测效价的基本原理。正确答案： 抗生素管碟法测效价的基本原理是利用抗生素在摊布特定试验菌的固体培养基内呈球面形扩散，形成含一定浓度抗生素球形区，抑制了试验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈。此法系根据抗生素在一定浓度范围内，对数剂量与抑菌圈直径（面积）呈线性关系，通过比较标准品与供试品产生抑菌圈的大小，计算出供试品的效价。解析： 暂无解析 -
第12题：
判断题荧光抗体活性鉴定常采用琼脂双扩散法，效价一般应大于1:16。（ ）A对
B错
正确答案： 错解析： 暂无解析 -
第13题：
抗生素微生物检定法包括（ ）。A：管碟法
B：兔热法
C：外标法
D：浊度法
E：内标法答案：A,D解析：抗生素微生物检定法
本法系在适宜的条件下，根据量反应平行线原理设计，通过检测抗生素对微生物的抑制作用，计算抗生素活性（效价）的方法。本法包括两种方法：管碟法和浊度法。 -
第14题：
药品检验时主要采用管碟法、浊度法检验的是A．非无菌药品的微生物检验
B．药物的效价测定
C．委托检验
D．复核检验
E．体内药品的检验答案：B解析：本考点为第十章的药物检验的效价、非无菌药品微生物检验及体内样品检验的方法。药品效价检验时主要采用管碟法、浊度法检验；非无菌药品微生物检验主要采用平皿法、薄膜过滤法、MPN法检验，体内样品检验时主要采用免疫法、色谱法检验。出厂检验、委托检验、抽查检验、复核检验、进口药品检验都属于药品检验的类型，掌握它们的概念。 -
第15题：
抗生素微生物检定法中，遇到如下那种情况要重新实验（）。
A除另有规定外，管碟法可性限率小于5%；
B除另有规定外，管碟法可性限率大于7%；
C计算所得的效价低于估计效价的90%；
D计算所得的效价高于估计效价的110%；
E以上都是
B,C,D
略 -
第16题：
荧光抗体活性鉴定常采用琼脂双扩散法，效价一般应大于1:16。（ ）
正确答案:正确 -
第17题：
试述抗生素管碟法测效价的基本原理。
正确答案:抗生素管碟法测效价的基本原理是利用抗生素在摊布特定试验菌的固体培养基内呈球面形扩散，形成含一定浓度抗生素球形区，抑制了试验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈。此法系根据抗生素在一定浓度范围内，对数剂量与抑菌圈直径（面积）呈线性关系，通过比较标准品与供试品产生抑菌圈的大小，计算出供试品的效价。 -
第18题：
简述抗生素微生物检定法管碟法的原理。
正确答案:系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生的抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。 -
第19题：
简述荧光法维生素B2测定原理及步骤。
正确答案:核黄素在440-500nm波长光照射下发生黄绿色荧光，在稀溶液中，荧光强度与核黄素浓度成正比。在波长525nm下测定其荧光强度。试液再加入低亚硫酸钠（Na2S2O4），将核黄素还原成无荧光的物质，然后再测定试液中残余荧光杂质的荧光强度，两者之差即为食品中核黄素所产生的荧光强度。
操作：样品均制→水解→过滤定容→氧化去杂质→净化→测定→结果计算。 -
第20题：
问答题简述琼脂扩散法（管碟法）测定抗生素生物效价的原理及实验步骤。正确答案： 管碟法原理：
抗生素在涂布特定菌的琼脂培养基内扩散，形成一定浓度抗生素的球型区，抑制试验菌生长，通过透明培养基观察抑菌圈，抗生素剂量的对数与抑菌圈面积或直径成正比。在同样条件下将已知效价的标准品溶液与未知效价的供试品溶液的剂量反应（抑菌圈）进行比较。
操作分为八步：
1.试验菌的纯化与悬液的制备
2.缓冲液、灭菌水与培养基的制备
3.标准品、供试品的称量、溶解与稀释
4.双碟的制备及放管
5.滴加药液
6.恒温培养
7.测量抑菌圈直径或面积
8.计算解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题管碟法精确测定抗生素效价需要满足的条件有哪些？正确答案： （1）抑菌圈要圆且边缘清晰；
（2）抗生素浓度与抑菌圈直径的直线范围应宽；
（3）标准品与样品所作的直线应互相平行；
（4）直线的斜率、直线的截距应小。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题什么是效价?简述测定噬菌体效价的双层平板法。正确答案： 效价表示每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体粒子数。双层平板法主要步骤：预先分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底层培养基在培养皿上浇一层平板，待凝固后，再把预先融化并冷却到45℃以下，加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬菌体样品上层培养基，在试管中摇匀后，立即倒在底层培养基上铺平待凝，然后在37℃下保温。一般经10余h后即可对噬菌斑计数。解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题简述抗生素微生物检定法管碟法的原理。正确答案： 系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生的抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。解析： 暂无解析