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第1题：
杂交瘤细胞株的保存方法是( )。
A、室温保存
B、4℃冰箱保存
C、-20℃冻存
D、-70℃冻存
E、液氮冻存(-190℃)
参考答案：E
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第2题：
细胞长期冻存时，冻存液中必须加入DM-SO，浓度为A:10%
B:20%
C:30%
D:5
E:1%答案：A解析：冻存液中DMSO的比例为10%，用新鲜牛血清配制。 -
第3题：
复苏是以一定的复温速率将冻存的培养物恢复到常温的过程。在冷冻复苏中应遵循什么原则：（）
- A、速冻速溶
- B、慢冻慢溶
- C、慢冻速溶
- D、速冻慢溶
- E、以上都不是
正确答案:C -
第4题：
简述动物细胞融合的基本过程。
正确答案: 取数量（107-108个/ml）的两种亲本细胞充分混合，离心除去上清液，取下层细胞悬液0.1ml，逐滴加入
0.4ml37℃的40%PEG溶液，37℃静置90s，缓慢加入5-10ml无血清培养液，轻摇离心管4-5次，离心去上清液，按每0.1ml融合混合液加25ml完全培养基，以每孔0.1ml分装于96孔培养板及每孔0.5ml分装于24孔培养板上，于37℃ CO2培养箱中培养之。 -
第5题：
简述肉在冻藏过程中的变化。
正确答案: （1）冰结晶生长：在冻藏过程中，微细的冰结晶会逐渐减少、消失，而大的冰结晶逐渐成长，变得更大。
（2）干耗：在冻藏室内，由于冻结食品表面的温度、室内空气的温度和空气冷却器蒸发管表面的温度三者之间存在着温度差，因而也形成了水蒸汽压差。
（3）解冻时的液汁损失：液滴产生的原因主要是由于肉质组织在冻结过程中产生冰结晶及东藏过程中冰结晶成长所受到的机械损伤。当损伤比较严重时，肉质间的缝隙大，内部冰晶融化的水就能通过这些缝隙自然地向外流出，这称为流出液滴。 -
第6题：
常规细胞冻存过程是什么？
正确答案: 4℃2h，-20℃2h，放入液氮长期保存。如使用商品化冻存盒，直接放于-80℃过夜，第二天从冻存盒取出，放入液氮保存。 -
第7题：
动物细胞冻存和复苏的原则是什么？
正确答案: 慢冻快融。 -
第8题：
单选题（）是保藏细胞（病毒）株最常采用的方法。A真空冷冻干燥
B-20℃冻存
C-80℃冻存
D液氮超低温冻存
正确答案： C解析： 真空冷冻干燥的菌（毒）种保存时间较长，可保持存活数十年以上，对贮存温度要求不高，贮藏成本相对较低，是菌（毒）种资源保藏中最常用的一种保藏手段。液氮超低温是保藏细胞（病毒）株最常采用的方法。 -
第9题：
单选题下列处理方法，容易使标本中病毒灭活的是（ ）。A加热
B保存于冻存液置于低温
C保存于含有DMSO的冻存液并置于低温
D避免样品反复冻融
E保存于含有丙三醇的冻存液并置于低温
正确答案： E解析：
病毒标本保存方法包括：低温保存、置于保存液保存（如DMSO、丙三醇等）；加热和反复冻融易使标本中病毒失活。 -
第10题：
问答题简述动物细胞的冻存过程。正确答案： 用常规方法消化分散细胞，离心收集（800r/min），按每毫升5*10^6个细胞浓度添加保护剂（甘油或DMSO），然后以1ml量分装于2ml的保存瓶中，在0~4摄氏度预冻2~4小时，摇匀，置于-70摄氏度冰箱冻存。解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题简述肉在冻藏过程中的变化。正确答案： （1）冰结晶生长：在冻藏过程中，微细的冰结晶会逐渐减少、消失，而大的冰结晶逐渐成长，变得更大。
（2）干耗：在冻藏室内，由于冻结食品表面的温度、室内空气的温度和空气冷却器蒸发管表面的温度三者之间存在着温度差，因而也形成了水蒸汽压差。
（3）解冻时的液汁损失：液滴产生的原因主要是由于肉质组织在冻结过程中产生冰结晶及东藏过程中冰结晶成长所受到的机械损伤。当损伤比较严重时，肉质间的缝隙大，内部冰晶融化的水就能通过这些缝隙自然地向外流出，这称为流出液滴。解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题简述制备动物细胞微囊化的简单过程。正确答案： 动物细胞与海藻酸溶液混合搅拌，经过微囊发生器将微球滴入氯化钙溶液中，形成凝胶，然后再用聚赖氨酸处理，使微球表面成膜，最后用柠檬酸处理去除球内的钙离子，以便球内的海藻酸成液态，动物细胞得以悬浮在其中。解析： 暂无解析 -
第13题：
细胞长期冻存时，冻存液中必须加入
A、10%
B、20%
C、30%
D、5%
E、1%
参考答案：A
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第14题：
细胞冻存
正确答案:是将培养细胞在加或者不加冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速度将培养物降至某一温度，并在此温度下对其长期保存。 -
第15题：
细胞冻存跟复苏的基本原则是（）
- A、快冻快融
- B、慢冻快融
- C、快冻慢融
- D、慢冻慢融
正确答案:B -
第16题：
简述制备动物细胞微囊化的简单过程。
正确答案:动物细胞与海藻酸溶液混合搅拌，经过微囊发生器将微球滴入氯化钙溶液中，形成凝胶，然后再用聚赖氨酸处理，使微球表面成膜，最后用柠檬酸处理去除球内的钙离子，以便球内的海藻酸成液态，动物细胞得以悬浮在其中。 -
第17题：
简述动物细胞培养过程生长曲线四个时期及特点。
正确答案: （1）潜伏期：有生长活动而无细胞分裂；（2）指数生长期：细胞数目成倍增长，细胞活力最佳（3）平衡期：细胞不再分裂增殖（4）衰退期：代谢物累积，PH降低，细胞中毒性改变甚至死亡 -
第18题：
下列关于细胞冻存及复苏过程的描述错误的是（）
- A、细胞冻存的原则为快速冻存
- B、冻存液中含有8％二甲基亚砜
- C、每只冻存管中以冻存（1～1.5）×105个细胞为宜
- D、冻存的细胞提前一天换全培养液
- E、复苏时将冻存细胞从液氮中取出迅速投入42℃温水中速溶
正确答案:A -
第19题：
（）是保藏细胞（病毒）株最常采用的方法。
- A、真空冷冻干燥
- B、-20℃冻存
- C、-80℃冻存
- D、液氮超低温冻存
正确答案:D -
第20题：
问答题简述细胞冻存、复苏和运送的方法。正确答案： （1）细胞冻存方法：预先配制冻存液（含20%血清培养基、10%DMSO）；取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入新鲜培养液，低速离心5分钟；弃上清液，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液，分装至冻存管中。密封后标记冻存细胞名称，日期，细胞状态也可标记，冻存者姓名。（细胞冻存是慢冻的过程：4℃1小时，-20℃1小时，-80℃过夜，液氮中保存）
（2）细胞复苏方法（快融）：从液氮中取出冷冻管，迅速投入37～38℃水浴中，使其融化（1分钟左右）。5分钟内用培养液稀释至原体积的10倍以上。低速离心10分钟。去上清，加新鲜培养液培养刚复苏的细胞。
（3）细胞运送方法：
①冻存运送：液氮中；
②充液法：细胞传代后贴壁，瓶内充满培养液，密闭封口，保温携带。解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题常规细胞冻存过程是什么？正确答案： 4℃2h，-20℃2h，放入液氮长期保存。如使用商品化冻存盒，直接放于-80℃过夜，第二天从冻存盒取出，放入液氮保存。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题简述细胞冻存与复苏要点与注意事项。正确答案： 细胞冻存要点
（1）冷冻过程要缓慢.需要冷冻保存的细胞先在4℃冰箱中放置30-60分钟；然后转入-20℃，放置30分钟；然后再转入-80℃放置16-18小时（或过夜）；最后放入液氮中长期保存.有条件的地方，可用程控降温仪，按每分钟-1到-3℃速度降温，一直到-80℃以下，然后直接放入液氮中长期保存.
（2）冻存细胞必须处在对数生长期，活力大于90%，无微生物污染.
（3）细胞浓度控制在：1×107-5×107/ml.
（4）使用高浓度血清或蛋白保护剂.一般情况下，用于冷冻保存完全细胞生长培养液中血清浓度大于20%.
（5）使用合适的细胞冷冻保护剂，以保护细胞在冷冻过程中免受冰晶破坏.目前，最常用的冷冻保护剂是DMSO（二甲基亚砜），使用终浓度为5-10%.但是，有些细胞系不能用DMSO作为冷冻保护剂，如人白血病细胞系HL-60.因为，DMSO能诱导HL-60细胞分化.在这种情况下，可选用其它冷冻保护剂，如甘油（glycele），羟乙基淀粉等.
注意事项
（1）细胞在冷冻过程中在-20℃冰箱内放置时间不可超过1小时，以防止冰晶过大而破坏细胞.也可跳过-20℃这一步骤直接放入-80℃冰箱中，但这样做细胞存活率要低一些.
（2）DMSO稀释时会释放大量热量.因此，DMSO不能直接加到细胞液中，必须事先配制.
（3）DMSO必须是细胞培养级别的.新买的DMSO本身处于无菌状态，第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管或瓶中，4℃保存.避免反复冻融造成DMSO裂解产生有害物质.并可减少污染机会.如要过滤DMSO，必须选用耐DMSO的尼龙滤膜.细胞冷冻保存液主要成分：冷冻保护剂，基础培养液，血清或蛋白.解析： 暂无解析 -
第23题：
单选题下列关于细胞冻存及复苏过程的描述不正确的是（）。A冻存的细胞提前一天更换全部培养液
B细胞冻存的原则为快速冻存
C每只冻存管中以冻存（1～1.5）×106个细胞为宜
D冻存液中含有8％二甲基亚砜
E复苏时将冻存细胞从液氮中取出迅速投入42℃温水中速溶
正确答案： A解析： 冻存细胞时，要注意缓慢逐步降温。先将细胞悬液加入冻存管，封好口，冰水浴置-20℃冰箱过夜，次日转入-80℃冰箱，24～48小时后再转入液氮罐中。