下列有关连接反应的叙述，错误的是（）。A、连接反应的最佳温度为37℃B、连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C、连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD、接酶通常应过量2-5倍

题目

下列有关连接反应的叙述，错误的是（）。

  • A、连接反应的最佳温度为37℃
  • B、连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%
  • C、连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mM
  • D、接酶通常应过量2-5倍
相似考题

1.关于酶最适pH的叙述，错误的是A．与底物浓度有关B．与缓冲液的浓度有关C．与缓冲液的种类有关D．与酶的浓度有关E．为该酶的等电点

2.有关酶活性测定的反应体系的叙述，正确的是 A.底物浓度达到Km即可 B.反应时间须在120分钟以上 C.反应体系中不应该用缓冲溶液 D.反应温度一般为37?40°C E.反应体系必须加激活剂

3.DNA连接反应中的注意事项。

4.有关酶活性测定的反应体系的叙述，正确的是A、底物浓度达到Km即可B、反应时间须在120分钟以上C、反应体系中不应该用缓冲溶液D、反应温度一般为37～40℃之间E、反应体系必须加激活剂

更多“下列有关连接反应的叙述，错误的是（）。A、连接反应的最佳温度为37℃B、连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C、连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD、接酶通常应过量2-5倍”相关问题

  • 第1题：

    下列哪些因素对保证较高连接效率是有利的（）

    • A、高纯度DNA。
    • B、载体与目的基因摩尔数之比为1：1。
    • C、载体与目的基因摩尔数之比为1：3~5。
    • D、连接反应体系中DNA浓度较高。
    • E、连接反应体系中DNA浓度较低。

    正确答案:A,C,D

  • 第2题：

    关于DNA复制中连接酶的叙述错误的是（）

    • A、参与随从链的生成
    • B、连接双链中的单链缺口
    • C、催化相邻的DNA片段以3′，5′－磷酸二酯键相连
    • D、连接反应需要ATP参与
    • E、催化相邻的DNA片段以5′，3′－磷酸二酯键相连

    正确答案:E

  • 第3题：

    关于DNA复制中连接酶的叙述，错误的是（）。

    • A、催化相邻的DNA片段以5’，3’-磷酸二酯键相连
    • B、连接反应需要ATP或NAD+参与
    • C、催化相邻的DNA片段以3’，5’—磷酸二酯键相连
    • D、催化反应中首先与ATP生成中间体

    正确答案:A

  • 第4题：

    影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些？


    正确答案: （1）DNA的纯度
    （2）DNA甲基化的程度
    （3）酶切消化反应的温度
    （4）DNA的分子结构
    （5）核酸内切限制酶的缓冲液

  • 第5题：

    双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于（）

    • A、DNA的聚合反应
    • B、DNA的连接反应
    • C、DNA的降解反应
    • D、特殊的DNA连接酶
    • E、聚合单体2’和5’位的脱氧

    正确答案:A

  • 第6题：

    一段转化炉辐射段上方猪尾管的主要作用是（）。

    • A、连接反应管与上集气管
    • B、连接反应管与下集气管
    • C、延长反应物的停留时间
    • D、补尝炉管的热膨涨

    正确答案:D

  • 第7题：

    下列关于大肠杆菌DNA连接酶的叙述中，正确的是（）。

    • A、需NADP+参与
    • B、连接反应不需要消耗能量
    • C、需NAD+参与
    • D、需ATP供能
    • E、具有5′→3′聚合活性

    正确答案:D

  • 第8题：

    单选题
    下列关于大肠杆菌DNA连接酶的叙述中，正确的是（）。
    A

    需NADP+参与

    B

    连接反应不需要消耗能量

    C

    需NAD+参与

    D

    需ATP供能

    E

    具有5′→3′聚合活性


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    问答题
    连接反应的一般原则是什么？

    正确答案： 为了获得最大效率的连接，反应体系越小越好，一般10μl；
    连接反应中，载体和插入的目的片段的摩尔比一般为1：1或1：3。DNA浓度约为10ng/μl。
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    一段转化炉辐射段上方猪尾管的主要作用是（）。
    A

    连接反应管与上集气管

    B

    连接反应管与下集气管

    C

    延长反应物的停留时间

    D

    补尝炉管的热膨涨


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    填空题
    平末端连接法（blunt end ligation）的连接效率比黏性末端连接的效率低得多，所以通常在连接反应体系中适量添加促进大分子凝聚的凝聚剂，以提高平末端 DNA连接的效率。常用的凝聚剂是（）。

    正确答案： PEG8000
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    影响 DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些？

    正确答案： 影响 DNA连接酶催化连接反应的因素有很多，但温度对连接反应的影响较大。黏性末端链通常以 12℃～15℃最好，这种温度有利于末端退火和连接酶的活性稳定。温度高了难以进行末端退火，低于上述温度会降低连接酶的活性。平末端连接以室温为宜，因为平末端连接不存在 DNA的退火问题，但是温度高于 30℃，连接酶特别不够稳定。平末端连接时连接酶的浓度要比黏性末端连接时高 10～100倍。DNA中有残存的 tRNA 不会抑制 DNA连接酶的活性，但是，如果 NaCl 的浓度高于 150mmol／L，则对连接反应有强的抑制作用。 另外反应体系中有 NH4+离子的存在，对 E．coli DNA连接酶具有激活作用E．coliDNA 连接酶需要 NAD+作辅助因子，而 T4DNA连接酶需要 ATP。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    常用的DNA连接酶有两种，即（）和（），它们可催化带（）匹配的双链DNA分子之间的连接反应


    正确答案:大肠杆菌DNA连接酶；T4DNA连接酶；粘性末端

  • 第14题：

    连接反应


    正确答案: 在双螺旋DNA单链上，连接缺口处两个相邻碱基形成磷酸二脂键（也可用于连接RNA平末端连接）。

  • 第15题：

    下列有关连接反应的叙述，错误的是（）

    • A、连接反应的最佳温度为37℃
    • B、连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%
    • C、连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mM
    • D、连接酶通常应过量2-5倍

    正确答案:A

  • 第16题：

    限制酶切割后的产物连接反应效果差，可能原因是（）

    • A、限制酶去除不完全
    • B、平端连接
    • C、核酸外切酶污染
    • D、连接反应温度低于16℃
    • E、从限制酶消化中带来太高浓度的磷酸盐或其他盐类

    正确答案:A,B,C,E

  • 第17题：

    提高重组率的方法包括（I加大外源DNA与载体的分子之比II载体分子除磷III连接酶过量IV延长连接反应时间）（）

    • A、I+II
    • B、I+II+III
    • C、I+III+IV
    • D、II+III+IV

    正确答案:A

  • 第18题：

    DNA连接酶催化的连接反应需要能量，大肠杆菌的能量来源是（），动物细胞则以（）为能源。


    正确答案:NAD+；ATP

  • 第19题：

    问答题
    DNA连接反应中的注意事项。

    正确答案： （1）连接及反应温度；
    （2）防止粘末端的自身环化应采取以下措施：
    ①控制载体与外源DNA分子的浓度与比例；
    ②用碱性磷酸酶处理载体防止自身环化；
    ③定向克隆；
    （3）用λDNA和科斯质粒的载体时的连接；①λDNA载体应考虑两个参数：插入分子左右臂的比例，两者的浓度；②科斯质粒常用两种方法连接，一种是用碱性磷酸酶处理，另一种是多酶反应进行的克隆。
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    填空题
    常用的DNA连接酶有两种，即（）和（），它们可催化带（）匹配的双链DNA分子之间的连接反应

    正确答案： 大肠杆菌DNA连接酶,T4DNA连接酶,粘性末端
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    填空题
    DNA连接酶催化的连接反应需要能量，大肠杆菌的能量来源是（），动物细胞则以（）为能源。

    正确答案： NAD+,ATP
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    名词解释题
    连接反应

    正确答案： 在双螺旋DNA单链上，连接缺口处两个相邻碱基形成磷酸二脂键（也可用于连接RNA平末端连接）。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    下列有关连接反应的叙述，错误的是（）。
    A

    连接反应的最佳温度为37℃

    B

    连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%

    C

    连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mM

    D

    接酶通常应过量2-5倍


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

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