杂交步骤是什么？

第1题：

什么是杂交？杂交的遗传效应是什么？

正确答案: 杂交是两个或两个以上品种想杂交，创造出新的变异类型，然后通过育种手段将他们固定下来，以培育新品种或改进品种的缺点。

第2题：

杂交育种步骤（杂交创新——横交固定——选育提高）：

正确答案: 1、确定育种目标和育种方案
2、杂交创新阶段：采用杂交使基因重组，改变原有类型的遗传基础，创造新的理想型个体。
工作：杂交、选种、选配、培育，对亲本的选择较重要，最好为当地品种，且在此阶段已完成选配（完成的标志：理想型个体的出现）
3、理想型横交定型阶段：将理想型个体停止杂交，改用杂种群内理想型个体自群繁育，稳定遗传基础获得固定的理想型，即理想型的横交固定。工作：采用同质选配、近交，加强选择，可考虑建立品系
4、扩群提高：迅速增加理想型个体数量和扩大其分布范围，培育新品系，建立品种整体结构和提高品种品质。

第3题：

杂交的步骤技术？

正确答案: ⑴母株与花朵的选择
⑵去雄与套袋
⑶授粉
⑷杂交后的管理
⑸室内切枝杂交

第4题：

核酸打点杂交试验中可省略的步骤是（）。

A、电泳
B、核酸样品固定于NC膜
C、杂交信号检测
D、标记探针
E、制备样本核酸

正确答案:A

第5题：

整个杂交反应主要以下哪些步骤组成（）。

A、预固定
B、杂交
C、洗脱
D、固定
E、转移

正确答案:A,B,C,D,E

第6题：

从遗传学的角度看，细菌杂交与高等生物的杂交的主要区别是什么？

正确答案: 高等生物遗传物质的传递是通过减数分裂和受精作用进行的，并遵守分离规律，两亲的遗传贡献是相等的。而细菌遗传物质的传递是单向的，不遵守分离规律，两亲的遗传贡献是不相等的。

第7题：

多选题

整个杂交反应主要以下哪些步骤组成（）。

A

预固定

B

杂交

C

洗脱

D

固定

E

转移

正确答案： A,D

解析：暂无解析

第8题：

问答题

杂交育种是工业微生物育种中常用的育种方式，请用细菌为例说明杂交育种的原理和步骤。

正确答案：杂交育种（Hybridization）一般是指人为利用真核微生物的有性生殖或准性生殖，或原核微生物的接合、F因子转导、转导和转化等过程，促使两个具不同遗传性状的菌株发生基因重组，以获得性能优良的生产菌株。
细菌杂交育种，包括杂交亲本的选择，亲本菌株遗传标记的确定.不同性别菌株的制备，重组体形成和检出。
现以大肠杆菌为例介绍如下：
1.杂交亲本菌株选择、标记菌株和性别菌株的获得
（1）杂交亲本菌株，根据试验选择不同遗传特性的两亲本菌株，并且要带一定选择性标记和非选择性标记。这些携带有一定选择性标记和非选择性标记而用于杂交配对的菌株为直接亲本。
（2）标记菌株，常用的标记为营养缺陷。
（3）性别菌株的获得：F’菌株，当F’菌株和F-菌株接合并把F因子转移到F菌株中，从而使F菌株转变为F’菌株；F菌株.把F’菌株用不足以抑制其生长的低浓度（约30vg／m1）吖啶橙处理店，就可以转变为F—菌株；HJr菌株，Hfr菌株是通过F’菌株和F菌株杂交获得的。方法是将A平皿上的F’菌株菌落影印到铺有F—菌株的基本培养基B平板上，经培养后，在B平皿上因个别细胞杂交而以现重组体菌落，这样就可以在A平皿上的相应位置上获得Hfr菌株。
细菌杂交一般采用直接混合法：将两个直接亲本菌株，如Hfr菌株和F菌株分别培养至对数期，取适量移人新鲜肉汤培养液中，置于37℃下振荡培养，细胞浓度约达2x108个/m1.然后将Hfr菌株和F菌株细胞以1：10或1：20的比例混合，在37℃水浴中缓慢振荡，以利于菌株细胞间接触和接合，在注意保温和良好通气条件下培养一定时间，让亲本菌株间的染包体进行连接、交换和重组。杂交后的混合液用缓冲液稀释，分离到基本培养基上或其他选择性培养基上，培养后可得到各种原养型的重组体的菌落。基本培养基上带有营养缺陷型标记的两亲本都不能生长，从基本培养基上分离到的就是各种重组菌株或其他杂交后代。

解析：暂无解析

第9题：

问答题

简述原位杂交的步骤。

正确答案：原位杂交是应用核酸探针与组织或细胞中的核酸按碱基配对原则进行特异性结合形成杂交体，然后应用组织化学或免疫化学方法在显微镜下进行细胞内定位或基因表达的检测技术。操作步骤如下：
(1)载片的清洁与处理载片的清洁很重要，特别不能有核酸酶的污染。为了在后续的杂交和冲洗等步骤中防止组织或细胞从载片上脱落，可以用多聚赖氨酸涂抹载片。
(2)组织与细胞的固定进行原位杂交的细胞或组织必须经过固定处理，常使用4%的多聚甲醛
(3)探针对探针的设计与方法根据被测定的核苷酸序列来决定。同时为了探针的渗入，用于细胞与组织原位杂交的探针均比较短，而用于细胞染色体原位杂交，常使用较长的探针以增强杂交的信号。
(4)湿盒原位杂交中每张标本所用的杂交液比较少，为防止杂交体系中的液体蒸发造成杂交液浓缩，甚至干燥，故应该使用湿盒。
(5)细胞组织杂交前处理原位杂交遵循核酸杂交的一般原则，但不同的是由于组织和细胞中的核酸都与细胞内的蛋白质结合，以核酸蛋白复合体的形式存在，固定过程中固定液的交联作用使生物分子形成网格，影响探针的穿透力，阻碍杂交体的形成，因此必须使用去污剂和/或蛋白酶对组织和细胞进行部分消化以除去核酸表面的蛋白质，使探针获得最大的穿透力。

解析：暂无解析

第10题：

问答题

Souther杂交的过程一般分为哪几步骤？

正确答案： ①DNA标本用限制性内切酶消化→②琼脂糖凝胶电泳分离各酶解片段→③DNA碱变性，Tris缓冲液中和→④高盐下通过毛吸作用将DNA转印到硝酸纤维素滤膜上，烘干固定（在凝胶中的相对位置在转移到膜的过程中仍保持着）→⑤附于膜上的DNA与P³²标记的探针杂交，利用放射自显影术确定探针互补的每条DNA带动位置。

解析：暂无解析

第11题：

问答题

杂交育种步骤（杂交创新——横交固定——选育提高）：

正确答案： 1、确定育种目标和育种方案
2、杂交创新阶段：采用杂交使基因重组，改变原有类型的遗传基础，创造新的理想型个体。
工作：杂交、选种、选配、培育，对亲本的选择较重要，最好为当地品种，且在此阶段已完成选配（完成的标志：理想型个体的出现）
3、理想型横交定型阶段：将理想型个体停止杂交，改用杂种群内理想型个体自群繁育，稳定遗传基础获得固定的理想型，即理想型的横交固定。工作：采用同质选配、近交，加强选择，可考虑建立品系
4、扩群提高：迅速增加理想型个体数量和扩大其分布范围，培育新品系，建立品种整体结构和提高品种品质。