参考答案和解析
正确答案: A.有特异识别和切割的序列部位
B.DNA分子上两个单链断裂的部位通常不是直接相对的
C.断裂所形成的DNA片段常具有碱基互补的单链尾巴(粘性末端)
D.内切酶的切割和修饰功能由两个不同的酶催化所完成,即内切酶活性和甲基化作用活性是分开的
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  • 第1题:

    核酸限制性内切酶的概念是什么?Ⅱ型核酸限制性内切酶作用的基本特点。


    答案:
    解析:
    (1)核酸限制性内切酶是一类能够识别和切割某种特定核苷酸序列并能产生具有二重对称特异序列(回文序列)结构的水解酶。(2)Ⅱ型核酸限制性内切酶作用的基本特点:(1)基本特性:1)能够识别dsDNA中含有的48个核苷酸碱基对组成的特定部位(即特定核苷酸序列)并切割DNA分子产生断裂,而形成识别序列。2)断裂后形成的DNA片段具有互补碱基的单链延伸末端或平头末端,断裂类型有粘性末端和平头末端两种。限制性内切酶识别系列有4个,6个,8个核苷酸组成靶子序列。(2)同裂酶:又称异源同工酶,即来源不同但是别和切割同样的核苷酸序列的限制性酶。(3)同尾酶:来源及识别顺序均不相同,切割方式也不同,所生成的限制性片段却是相同粘性末端。(4)核酸限制性内切酶对DNA的分子构型,反应系统组成,反应温度,酶量,反应体积等有关。

  • 第2题:

    什么是限制性核酸内切酶?第二型限制酶有何特点?


    正确答案: 限制性核酸内切酶(限制酶,restriction endonuclease)是一类能够识别双链DNA分子中的某些特定核苷酸序列,并对DNA分子进行切割的核酸内切酶。
    第二型限制酶特点:2亚基,单辅因子;识别序列是由4、5、6或7个核苷酸组成的特定核苷酸序列,识别位点双重旋转对称结构,切割与识别位点相同或相近。分子量较小,仅需Mg2+作为催化反应的辅助因子,不需ATP。

  • 第3题:

    分子育种中主要采用Ⅱ型限制性内切酶,它由两种酶组成,即()()


    正确答案:限制酶;修饰酶

  • 第4题:

    下面关于限制性核酸内切酶描述正确的是()。

    • A、I型限制性核酸内切酶的切割位点是固定的
    • B、II型限制性核酸内切酶的切割位点是固定的
    • C、III型限制性核酸内切酶的切割位点是固定的
    • D、I型限制性核酸内切酶的识别位点是特异性的
    • E、II型限制性核酸内切酶的识别位点是特异性的

    正确答案:B,D,E

  • 第5题:

    关于限制性内切酶、目的基因和载体,你知道哪些?


    正确答案: 限制性内切酶是基因工程最常用的工具酶,主要来源于原核生物。能够识别DNA分子上特定的碱基序列,并在特定的位点将DNA分子切割开。限制性内切酶切口分为平末端和粘性末端。
    获取目的基因两条途径:人工合成和从生物基因组DNA中直接分离得到。 基因工程载体是基因工程中作为外源基因运载体的DNA片段。
    特点有:
    ①在宿主细胞中能独立自主的复制
    ②携带易于筛选的标记基因
    ③含有多种限制性内切酶的单一识别序列
    ④除必要序列外,载体要尽可能的小,便于导入细胞进行繁殖
    ⑤使用安全
    载体种类有:质粒载体、噬菌体载体、柯斯质粒载体、动物病毒载体、YAC载体。

  • 第6题:

    三种限制性内切酶()、Ⅱ型酶和Ⅲ型酶。


    正确答案:Ⅰ型酶

  • 第7题:

    分析影响限制性内切酶酶切的因素有哪些?


    正确答案: (1)温度:大部分限制性内切酶最适反应温度为37℃,少数酶高于或低于这个温度。
    (2)时间:合适,大多为1h,可过夜反应。
    (3)溶液体系:要求有稳定的pH环境。标准的缓冲溶液中含有氯化钙、氯化镁或氯化钾、Tris-HCl、β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT)以及牛血清蛋白质(BSA)和Mg2+,具有一定的酸碱值即pH值。
    (4)盐离子浓度:不同的限制性内切酶对盐离子强度(Na+)有不同的要求,一般按离子强度不同分为低(0mmol/L)、中(50mmol/L)、高盐(100mmol/L)三类。Mg2+也是限制性内切酶酶切反应所需。
    (5)反应体积和甘油浓度:在进行酶切反应时,加酶的体积一般不超过总反应的10%,若加酶体积太大,甘油浓度过高,则会影响酶切反应。
    (6)DNA的纯度和结构:DNA样品中所含的蛋白质、有机溶剂及RNA等杂质均会影响酶切反应速度和酶切的完全度,酶切的底物一般是双链DNA,DNA的甲基化位置会影响酶切反应。

  • 第8题:

    分子生物学中常用的限制性内酶指的()型内切酶。


    正确答案:B

  • 第9题:

    Ⅱ型限制性内切酶命名原则是什么?


    正确答案:Ⅱ型限制性内切酶命名原则:有机体属名第一个字母(大写、斜体)和种名前两个字母(小写、斜体)构成基本名称,株系数字通常省略;若酶存在于一种特殊菌株中,在基本名称后面加上菌株名称符号;罗马数字表示从同一个细菌中分离出来的不同限制性内切酶。

  • 第10题:

    单选题
    限制性核酸内切酶,简称限制酶,是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列,并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶可分为多种类型,其中应用最广的是()
    A

    Ⅰ型

    B

    Ⅱ型

    C

    Ⅲ型

    D

    Ⅳ型

    E

    Ⅴ型


    正确答案: A
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    单选题
    55.基因工程中常用的限制性内切酶属于哪种类型()。
    A

    Ⅰ型酶

    B

    Ⅱ型酶

    C

    Ⅲ型酶

    D

    Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型酶


    正确答案: D
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    问答题
    Ⅱ型限制性酶胡哪些基本特性?

    正确答案: A.有特异识别和切割的序列部位
    B.DNA分子上两个单链断裂的部位通常不是直接相对的
    C.断裂所形成的DNA片段常具有碱基互补的单链尾巴(粘性末端)
    D.内切酶的切割和修饰功能由两个不同的酶催化所完成,即内切酶活性和甲基化作用活性是分开的
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    常用于制备目的基因的限制性内切酶为哪一型()

    AⅠ型

    BⅡ型

    CⅢ型

    DⅣ型

    EⅤ型


    B

  • 第14题:

    Ⅱ型限制性酶胡哪些基本特性?


    正确答案: A.有特异识别和切割的序列部位
    B.DNA分子上两个单链断裂的部位通常不是直接相对的
    C.断裂所形成的DNA片段常具有碱基互补的单链尾巴(粘性末端)
    D.内切酶的切割和修饰功能由两个不同的酶催化所完成,即内切酶活性和甲基化作用活性是分开的

  • 第15题:

    Ⅲ型限制性核酸内切酶切割位点的序列是固定的。


    正确答案:错误

  • 第16题:

    限制性核酸内切酶,简称限制酶,是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列,并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶可分为多种类型,其中应用最广的是()

    • A、Ⅰ型
    • B、Ⅱ型
    • C、Ⅲ型
    • D、Ⅳ型
    • E、Ⅴ型

    正确答案:B

  • 第17题:

    简述Ⅱ型限制性内切酶的特征。


    正确答案:①有特定的识别序列,通常为4-6个碱基对。
    ②切割点位于识别序列内的固定位置上。
    ③酶切后形成粘性末端或平齐末端。

  • 第18题:

    基因工程操作中除了限制性内切酶,还会用到哪些酶?作用各是什么?


    正确答案:①DNA连接酶;催化DNA分子中相邻的3’-OH末端和5’-磷酸基末端之间形成磷酸二酯键,即能封闭双链DNA上相邻核苷酸之间的单链缺口。
    ②DNA聚合酶Ⅰ;催化聚合脱氧核苷酸,使之逐个接到引物上去,最后形成新的DNA。
    ③碱性磷酸酯酶;催化从单链或双链DNA和RNA分子中除去5’-磷酸残基。
    ④T4多聚核核苷酸激酶;作为DNA的5’-末端标记,标记待测DNA片段。
    ⑤S1核酸酶;产生5’-磷酰基的单核苷酸或寡核苷酸。
    ⑥反向转录酶;催化合成与某种已知RNA互补的DNA链,以获取目的基因。

  • 第19题:

    限制性核酸内切酶的活性受哪些因素影响?


    正确答案: ⑴酶的纯度。
    ⑵DNA样品的纯度。
    ⑶DNA的甲基化程度。
    ⑷酶切反应的温度与时间。
    ⑸DNA分子的构型。
    ⑹限制性核酸内切酶的反应缓冲液。

  • 第20题:

    55.基因工程中常用的限制性内切酶属于哪种类型()。

    • A、Ⅰ型酶
    • B、Ⅱ型酶
    • C、Ⅲ型酶
    • D、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型酶

    正确答案:B

  • 第21题:

    分析影响限制性内切核酸酶酶切的因素有哪些?


    正确答案: (1)反应温度:
    连接缺口的温度:37度
    连接粘性末端的最佳温度:4~15度
    (2)T4DNA连接酶的用量:
    平末端DNA分子的连接反应中,最适1~2个单位。
    粘性末端DNA片断之间的连接,酶浓度0.1个单位
    ATP的用量10μmol-1mmol/L之间
    (3)提高外源片断与载体的浓度的比值(10~20倍)

  • 第22题:

    单选题
    能识别和切割相同的DNA序列的不同来源的限制性内切酶,称为()
    A

    同尾酶

    B

    同裂酶

    C

    Ⅰ型限制性内切酶

    D

    Ⅱ型限制性内切酶

    E

    Ⅲ型限制性内切酶


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    简述Ⅱ型限制性内切酶的特征。

    正确答案: ①有特定的识别序列,通常为4-6个碱基对。
    ②切割点位于识别序列内的固定位置上。
    ③酶切后形成粘性末端或平齐末端。
    解析: 暂无解析

  • 第24题:

    填空题
    三种限制性内切酶()、Ⅱ型酶和Ⅲ型酶。

    正确答案: Ⅰ型酶
    解析: 暂无解析