诱导多倍体有哪些具体方法？

第1题：

秋水仙碱诱导多倍体的原理如何？在诱变中应注意哪些问题

正确答案:（1）秋水仙素诱导多倍体的原理
秋水仙素与正在分裂的细胞接触后，可抑制微管的聚合过程，不能形成纺锤丝，使染色体无法分向两极，从而产生染色体加倍的核。
（2）秋水仙诱导多倍体应注意的问题
①注意诱变材料的选择选主要经济性状优良的品种；
选染色体组数少的品种因为倍性高的种在进化过程中已经利用了它的多倍性。
最好选能单性结实的品种因为染色体多倍化后，常会使育性降低。
尽量选多个品种处理因为不同的种、品种、类型遗传基础不同，多倍化后的表现也不同。
②注意处理部位的选择
处理的组织应该是旺盛分裂的组织。如萌动的种子、正在膨大的芽、根尖、幼苗、嫩枝生长点、花蕾等。
③注意药剂浓度和处理时间的选择
溶液的浓度不宜过高或过低。过高，会引起伤害，以至致死；过低，又不起作用。一般采用临界范围内的高浓度、短时间处理。通常，草本浓度较低，木本浓度较高。果树、树木：1-1.5%蔬菜、草本花卉：0.01-0.2%
④注意被处理植物的生长条件
处理后，用清水冲洗，除去残留药物，并为植株生长提供良好的条件，便于植株恢复生长。外部条件中最重要的是温度，一般25-30℃。

第2题：

经常采用的人工诱导多倍体形成的手段有哪些？

正确答案: 1、物理学方法
（1）温度休克法
冷休克法：其原理是低温能够阻止微管蛋白聚合成微管，从而阻止纺锤丝形成；纺锤丝被破坏以后细胞不能正常分裂，极体不能形成和排出，由此可获得二倍体的卵核，将其与单倍体的精子受精即可获得三倍体。温度休克可以在第一次减数分裂期间（目前的技术只适用于某些无脊椎动物）进行（抑制第一极体的排出），也可以在第二次减数分裂中进行（抑制第二次减数分裂）。无论抑制哪一个极体的排出，均需要准确的处理时间，也就是减数分裂的中期，纺锤丝形成前和形成期间进行温度处理才能保证效果。
热休克法：若正在进行减数分裂的卵细胞处于较高温度环境中，细胞内一些进行生命活动的重要酶类如ATP酶就会遭到破坏，从而使供能途径受阻，纺锤体不能形成，进而抑制了细胞的分裂，极体不能排放，形成二倍体的卵原核，与正常精子受精即形成多倍体。热休克处理的时间必须刚好在减数分裂的中期以前及中期分裂纺锤丝形成期间。
（2）静水压处理
将处于第一或第二成熟分裂期的鱼卵采用较高的水静压处理（大约为65Okgf/cm2），微管所保持的结构失去原有的空间构型和刚性，发生可逆性裂解，破坏纺锤丝的形成，从而破坏了细胞分裂，抑制了第一或第二极体的排出，导致二倍体卵子的形成，进而与正常精子受精得到三倍体；当水压力的变化发生在第一次卵裂时，由于破坏了二倍体体细胞的纺锤丝的形成，导致类似于核内有丝分裂的现象发生则可能产生四倍体的个体。
（3）电脉冲休克
在一定的电场条件下，细胞与细胞之间的膜会发生融合，导致两个细胞合二而一，从而诱发多倍体（四倍体）。
2、化学方法
（1）秋水仙素
是从百合科植物秋水仙的种子、鳞茎中提取的生物碱，能抑制微管的组装，使已有的微管解聚合，阻止纺锤体的形成或破坏已形成的纺锤体，从而导致核内有丝分裂形成多倍体细胞。在去除秋水仙素后，其作用立即结束，细胞恢复正常的生理状态。
（2）细胞松弛素
真菌的一类代谢产物，是水产动物育种中是最常用的一种化学诱导药物。CB特异性破坏微丝，最终导致控制细胞分裂的由微丝构成的收缩环的解体，抑制细胞质分裂，阻止极体的释放，从而产生多倍体。
（3）聚乙二醇
是一种常用的细胞融合剂，能使细胞发生融合，从而使染色体加倍。该药物被广泛用于试管内的细胞融合。由于其特殊的理化特性，也将其用于水产动物的多倍体诱导。
（4）6-二甲基氨基嘌呤
是嘌呤霉素的一种类似物，其生理作用是抑制蛋白质磷酸化，通过作用于特定的酶，破坏微管的聚合中心，使微管不能形成，从而破坏细胞分裂，抑制卵细胞极体的形成和释放。6-DMAP非致癌性，具水活性。洗除该药物后，受精卵可以正常发育。6-DMAP低毒、高效、价格便宜，在诱导多倍体方面表现出较大的优越性和较广阔的应用前景。
（5）咖啡因
进人细胞后可以立即提高细胞内的Ca2+浓度。由于微管对Ca2+浓度敏感，当Ca2+浓度极低或高于1mg/mL时，会引起微管二聚体的解聚，阻止细胞分裂，从而形成多倍体。
3、生物学方法
（1）远缘杂交
亲本配子染色体加倍可以使染色体达到平衡，从而克服远缘杂交的困难获得多倍体的杂交种。因此，远缘杂交可以产生异源多倍体。
（2）核移植及细胞融合
核移植诱导鱼类多倍体技术仍处于实验阶段，试管内的细胞融合可以产生多倍体细胞。
（3）四倍体与二倍体交配生产三倍体
目前对三倍体诱导的大量工作表明：很难有一种方法能产生100%的三倍体，且操作烦琐，每年进行诱导培育，使用昂贵的仪器，所用药品毒性大、价格昂贵，生产成本较高。

第3题：

诱导多倍体的方法有（）、（）、毛细管法、羊毛脂法

正确答案:种子浸渍处理；点滴法

第4题：

简述多倍体中的同源多倍体和异源多倍体的主要特征？有哪些方法可以用于多倍体的鉴定？

正确答案:（1）同源多倍体的特征：亲和性差，结实率低；器官巨大，发育迟缓。
（2）异源多倍体的特征：偶数性异源多倍体在减数分裂时，因每种同源染色体组有两个，可象二倍体一样每条同源染色体都可联会成二倍体，因而可育性非常高。而奇数性异源多倍体（由于染色体组成和染色体来源不同，在减数分裂时会同时有二价体、单价体和多价体多种情况出现，难以形成正常配子）因此育性极差。
（3）多倍体鉴定方法
A.形态比较；
B.气孔坚定；
C.花粉粒比较及育性鉴定；
D.顶端组织发生层细胞大小比较；
E.小孢子细胞分裂异常行为鉴定；
F.染色体计数；
G.流式细胞仪DNA含量测定。

第5题：

经常采用的人工诱导多倍体形成的手段有那些？举例说明多倍体育种的意义如何？

正确答案:方法：
（1）生物学方法
（2）物理学方法
温度休克法、水静压法、高盐高碱法等（温度休克法包括：冷休克法（0‾5℃）、热休克法（30℃左右）冷休克法（0‾5℃）热休克法（30℃左右））
关键：能否成功地阻止第二次成熟分裂或第二极体的排出。
（3）化学方法
采用化学物质阻止第二极体的排出或受精卵的有丝分裂而产生三倍体或四倍体。包括：细胞松弛素B、秋水仙碱、一些麻醉剂等。
特点：
1、具有良好的生存力和生长率，可以增加种间杂种的成活率。
2、可以缩短养殖周期，生长速度快且个体大，减少养殖成本（三倍体是不育的，这一特点很重要），另外，三倍体可以通过四倍体二倍体杂交获得，此法比温度休克或水静压处理得到的三倍体存活率高。
3、三倍体品质好，具有较强的抗病性，抗寒性等特性。

第6题：

列举五种多倍体的诱导方法。

正确答案: 可采用高温、低温、X射线照射、嫁接和切断等物理方法或应用化学药剂秋水仙素、萘嵌戊烷、异生长素、富民农等人工诱发多倍体植物。

第7题：

问答题

为什么能够通过理化处理人工诱导多倍体，从那些途径可以获得三倍体，林木多倍体有何应用价值。

正确答案：染色体加倍是通过人工措施处理植物分裂细胞，促使细胞内的理化环境发生改变，从而诱导细胞核或细胞质不分裂，导致体细胞内染色体数目倍增的过程。施加理化处理的结果是影响纺锤丝以及细胞板的形成机制，或造成正处于分裂阶段的细胞被阻止在中期，而不能进入分裂后期；或染色体虽然能正常分裂并走向两极，但细胞质不能完成正常分裂，从而导致细胞内染色体数目的倍增。
获得三倍体的途径包括：选择天然多倍体；四倍体与二倍体杂交；二倍体天然或人工未减数配子与正常减数配子杂交；授粉后施加理化处理诱导三倍体；胚乳培养；体配细胞融合等
林木多倍体应用于如下领域：纸浆材等短周期森林工业用材新品种选育；利用组织代谢产物的经济林木新品种选育；无核浆果类经济林木新品种选育；抗逆性生态防护型林木新品种选育等。

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第8题：

填空题

人工诱导多倍体的方法有（）和（）

正确答案：物理方法 ,化学方法

解析：暂无解析

第9题：

问答题

经常采用的人工诱导多倍体形成的手段有哪些？

正确答案： 1、物理学方法
（1）温度休克法
冷休克法：其原理是低温能够阻止微管蛋白聚合成微管，从而阻止纺锤丝形成；纺锤丝被破坏以后细胞不能正常分裂，极体不能形成和排出，由此可获得二倍体的卵核，将其与单倍体的精子受精即可获得三倍体。温度休克可以在第一次减数分裂期间（目前的技术只适用于某些无脊椎动物）进行（抑制第一极体的排出），也可以在第二次减数分裂中进行（抑制第二次减数分裂）。无论抑制哪一个极体的排出，均需要准确的处理时间，也就是减数分裂的中期，纺锤丝形成前和形成期间进行温度处理才能保证效果。
热休克法：若正在进行减数分裂的卵细胞处于较高温度环境中，细胞内一些进行生命活动的重要酶类如ATP酶就会遭到破坏，从而使供能途径受阻，纺锤体不能形成，进而抑制了细胞的分裂，极体不能排放，形成二倍体的卵原核，与正常精子受精即形成多倍体。热休克处理的时间必须刚好在减数分裂的中期以前及中期分裂纺锤丝形成期间。
（2）静水压处理
将处于第一或第二成熟分裂期的鱼卵采用较高的水静压处理（大约为65Okgf/cm2），微管所保持的结构失去原有的空间构型和刚性，发生可逆性裂解，破坏纺锤丝的形成，从而破坏了细胞分裂，抑制了第一或第二极体的排出，导致二倍体卵子的形成，进而与正常精子受精得到三倍体；当水压力的变化发生在第一次卵裂时，由于破坏了二倍体体细胞的纺锤丝的形成，导致类似于核内有丝分裂的现象发生则可能产生四倍体的个体。
（3）电脉冲休克
在一定的电场条件下，细胞与细胞之间的膜会发生融合，导致两个细胞合二而一，从而诱发多倍体（四倍体）。
2、化学方法
（1）秋水仙素
是从百合科植物秋水仙的种子、鳞茎中提取的生物碱，能抑制微管的组装，使已有的微管解聚合，阻止纺锤体的形成或破坏已形成的纺锤体，从而导致核内有丝分裂形成多倍体细胞。在去除秋水仙素后，其作用立即结束，细胞恢复正常的生理状态。
（2）细胞松弛素
真菌的一类代谢产物，是水产动物育种中是最常用的一种化学诱导药物。CB特异性破坏微丝，最终导致控制细胞分裂的由微丝构成的收缩环的解体，抑制细胞质分裂，阻止极体的释放，从而产生多倍体。
（3）聚乙二醇
是一种常用的细胞融合剂，能使细胞发生融合，从而使染色体加倍。该药物被广泛用于试管内的细胞融合。由于其特殊的理化特性，也将其用于水产动物的多倍体诱导。
（4）6-二甲基氨基嘌呤
是嘌呤霉素的一种类似物，其生理作用是抑制蛋白质磷酸化，通过作用于特定的酶，破坏微管的聚合中心，使微管不能形成，从而破坏细胞分裂，抑制卵细胞极体的形成和释放。6-DMAP非致癌性，具水活性。洗除该药物后，受精卵可以正常发育。6-DMAP低毒、高效、价格便宜，在诱导多倍体方面表现出较大的优越性和较广阔的应用前景。
（5）咖啡因
进人细胞后可以立即提高细胞内的Ca2+浓度。由于微管对Ca2+浓度敏感，当Ca2+浓度极低或高于1mg/mL时，会引起微管二聚体的解聚，阻止细胞分裂，从而形成多倍体。
3、生物学方法
（1）远缘杂交
亲本配子染色体加倍可以使染色体达到平衡，从而克服远缘杂交的困难获得多倍体的杂交种。因此，远缘杂交可以产生异源多倍体。
（2）核移植及细胞融合
核移植诱导鱼类多倍体技术仍处于实验阶段，试管内的细胞融合可以产生多倍体细胞。
（3）四倍体与二倍体交配生产三倍体
目前对三倍体诱导的大量工作表明：很难有一种方法能产生100%的三倍体，且操作烦琐，每年进行诱导培育，使用昂贵的仪器，所用药品毒性大、价格昂贵，生产成本较高。

解析：暂无解析

第10题：

问答题

秋水仙素诱导多倍体的方法有哪些？

正确答案：（1）浸渍法浸渍幼苗、插条、接穗、种子
（2）涂抹法涂抹幼苗或枝条顶端（遮盖处理部位）
（3）滴液法滴于较大植株的顶芽、腋芽
（4）套罩法如新梢顶芽

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第11题：

问答题

秋水仙碱诱导多倍体的原理如何？在诱变中应注意哪些问题

正确答案：（1）秋水仙素诱导多倍体的原理
秋水仙素与正在分裂的细胞接触后，可抑制微管的聚合过程，不能形成纺锤丝，使染色体无法分向两极，从而产生染色体加倍的核。
（2）秋水仙诱导多倍体应注意的问题
①注意诱变材料的选择选主要经济性状优良的品种；
选染色体组数少的品种因为倍性高的种在进化过程中已经利用了它的多倍性。
最好选能单性结实的品种因为染色体多倍化后，常会使育性降低。
尽量选多个品种处理因为不同的种、品种、类型遗传基础不同，多倍化后的表现也不同。
②注意处理部位的选择
处理的组织应该是旺盛分裂的组织。如萌动的种子、正在膨大的芽、根尖、幼苗、嫩枝生长点、花蕾等。
③注意药剂浓度和处理时间的选择
溶液的浓度不宜过高或过低。过高，会引起伤害，以至致死；过低，又不起作用。一般采用临界范围内的高浓度、短时间处理。通常，草本浓度较低，木本浓度较高。果树、树木：1-1.5%蔬菜、草本花卉：0.01-0.2%
④注意被处理植物的生长条件
处理后，用清水冲洗，除去残留药物，并为植株生长提供良好的条件，便于植株恢复生长。外部条件中最重要的是温度，一般25-30℃。