怎样将一个平末端的DNA片段插入到EcoRI的限制位点中去？

题目

怎样将一个平末端的DNA片段插入到EcoRI的限制位点中去？

相似考题

1.核糖体的E位点是()A、真核mRNA加工位点B、tRNA离开原核生物核糖体的位点C、核糖体中受EcoRi限制的位点D、真核mRNA起始结合位点

2.下面有关限制酶的叙述哪些是正确的 ( )A、限制酶是外切酶而不是内切酶B、限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割C、同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D、一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生粘末端E、一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端

3.关于限制性内切酶叙述错误的一项是( )A.可识别特异的DNA序列 B.DNA双链的切割点常不在同一位点 C.不能产生平头或钝性末端 D.可产生5"-末端突出的黏性末端 E.可产生3′-末端突出的黏性末端

4.关于限制性内切酶叙述错误的一项是（ ）A、可产生5′－末端突出的黏性末端B、可识别特异的DNA序列C、可产生3′－末端突出的黏性末端D、不能产生平头或钝性末端E、DNA双链的切割点常不在同一位点

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  • 第1题：

    核糖体的E位点是（）

    • A、真核mRNA加工位点
    • B、tRNA离开原核生物核糖体的位点
    • C、核糖体中受EcoRI限制的位点
    • D、电化学电势驱动转运的位点

    正确答案:B

  • 第2题：

    限制性内切酶分为（）型。（）型酶具有限制和DNA修饰作用。这种酶在非特异性位点，通常在识别位点下游100到1000bp处切割DNA。（）型酶具有限制与修饰活性，能在识别位点附近切割DNA，切割位点很难预测。（）型酶能在DNA分子内部的特异位点，识别和切割双链DNA，其切割位点的序列是固定的。


    正确答案:三；Ⅰ；Ⅲ；Ⅱ

  • 第3题：

    两个核酸片段在适宜条件下，经X酶的作用，发生了如下变化，则X酶是（）

    • A、DNA连接酶
    • B、EcoRI酶
    • C、DNA聚合酶
    • D、限制酶

    正确答案:A

  • 第4题：

    某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？


    正确答案: 答盐离子浓度不对，温度不对，甘油浓度过高。

  • 第5题：

    DNA片段重组连接可用下列哪些方法（）

    • A、平末端连接
    • B、粘末端连接
    • C、加接头连接
    • D、同聚尾连接
    • E、T载体连接

    正确答案:A,B,C,D,E

  • 第6题：

    如果DNA分子重组时，需要用平端连接，下列哪些方法可形成平末端（）。

    • A、3‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
    • B、3‘突出的粘末端用核酸酶切平。
    • C、5‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
    • D、5‘突出的粘末端用核酸酶切平。
    • E、利用切口为平末端的限制酶。

    正确答案:B,C,D,E

  • 第7题：

    怎样将一个平末端DNA片段插入到Eco RI限制位点中去？


    正确答案: 化学合成一些长为10bp含有Eco RI识别位点的短的DNA片段，然后与待克隆片段两端连接起来，如果用EcoRI切割这种连接片段，就会产生Eco RI的单链末端。这种片段就可以插入到任何Eco RI的限制性内切酶位点中。

  • 第8题：

    问答题
    Fredrick 和 McClarin等用一个由 13 个碱基对的 DNA片段与 EcoRI、反应，然后分离到酶和 DNA 共结晶的复合物，通过 X射线分析发现了什么？

    正确答案： 发现：具有活性的 EcoRI是一个二聚体，它们同 DNA结合形成一个直径为 50A 的球形结构，两个 EcoRI位于 DNA的两侧。
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    判断题
    具有 EcoRⅡ末端的外源片段只能以一个方向插入到 EcoRⅡ末端的载体中。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 对
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    判断题
    外源基因（或 DNA片段）插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 对
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    用超声波处理烟草基因组DNA后，用下列哪一个工程酶处理可以获得平末端片段，用于后续克隆：（）
    A

    限制性内切酶

    B

    大肠杆菌DNA聚合酶

    C

    Klenown片段

    D

    反转录酶


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的EcoRI消化。消化物与酵母 DNA 连接后转化对两种抗生素都敏感的 E.coli 菌株。  （1）利用哪一种抗生素抗性选择接受了质粒的细胞？  （2）怎样区分接受了插入酵母 DNA的质粒的克隆？

    正确答案： （1）选择Ampr的转化子；
    （2）所需的克隆是Ampr和Kanr。任何能够抗这两种药物的克隆都是自连的非重组质粒。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和载体DNA，产生不同的DNA片段的粘性末端。


    正确答案:错误

  • 第14题：

    两个具有相同黏性末端的DNA片段，在条件适宜时，经酶的作用合成一个重组DNA分子。该酶是（）

    • A、DNA连接酶
    • B、RNA聚合酶
    • C、DNA聚合酶
    • D、限制性内切酶

    正确答案:A

  • 第15题：

    下列与DNA重组连接相关的说法正确的是（）

    • A、不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
    • B、同聚尾法连接不仅连接效率高，也易回收插入的片段。
    • C、限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性，将有利于重组连接。
    • D、Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
    • E、平末端连接时，在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。

    正确答案:A,D,E

  • 第16题：

    如何将一平末端的DNA片段与BamHI形成的粘末端连接？


    正确答案: 使用加接头连接法。人工合成一段含BamHI酶切位点的DNA短片段，然后与该平末端片段两端连起来，用BamHI切割连接片段，即可形成BamHI的粘末端。

  • 第17题：

    下列关于限制酶的叙述正确的是（）

    • A、在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他限制酶就不能切割了。
    • B、限制酶在DNA中的识别/切割位点的二、三级结构影响酶切效率。
    • C、如果限制酶的识别位点位于DNA分子末端，那么接近末端的程度也影响切割。
    • D、已知某限制酶在一环状DNA上有3个切点，因此该酶切割这一环状DNA，可得到3个片段。
    • E、能产生防御病毒侵染的限制酶的细菌，其自身的基因组中没有该酶识别的序列。

    正确答案:B,C,D

  • 第18题：

    用限制性内切酶酶切由不同核苷酸组成序列的双链互补DNA的结果，产生的DNA片段末端是：（）

    • A、平头末端
    • B、粘性末端
    • C、终末端
    • D、参差不齐的末端
    • E、限制性末端

    正确答案:B

  • 第19题：

    问答题
    用 Klenow 酶填补的办法可使 5’黏性末端转变成平末端。这种方法常使 DNA 上的某些限制酶的识别位点消失。请问，对于下列限制酶，用这种方法处理会不会使它们的识别序列都消失？BamH I（G↓GATCC）； Taq I（T↓CGA），BssHⅡ（G↓CGCGC）。

    正确答案： 用这种方法处理BssHⅡ不会消失。
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    问答题
    怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoRI限制位点中去？

    正确答案： 对于平末端DNA，右先连上工设计合成的EcoRI切割产生的脱氧寡核苷酸双链接头，然后再插入到EcoRI限制位点中去；也可以将EcoRI的限制位点进行改造，将粘性末端变成平末端后，用T4DNA连接酶进行连接。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    下面有关限制酶的叙述哪些是正确的（　）
    A

    限制酶是外切酶而不是内切酶

    B

    限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割

    C

    同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的

    D

    一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生粘末端

    E

    一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    某学生在用 EcoRI切割外源 DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？

    正确答案： 盐离子浓度不对，温度不对，甘油浓度过高。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    判断题
    用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和载体DNA，产生不同的DNA片段的粘性末端。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 对
    解析： 暂无解析

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