外源基因导入植物的方法主要有哪些？

题目

外源基因导入植物的方法主要有哪些？

相似考题

1.精子载体法是以精子作为外源基因的载体,通过()将外源基因导入动物胚胎,从而实现基因转移的方法。A、细胞融合B、核移植C、人工授精

2.试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。

3.转基因是将（）导入受体细胞的过程。A、外源蛋白B、细菌C、外源氨基酸D、外源基因

4.基因治疗指（）ASouthernblottingBWesternblottingCNorthernblottingD输入导入了相应外源基因的细胞EPCR

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  • 第1题：

    目的（外源）基因如何导入受体细胞？


    正确答案: A.农杆菌介导的遗传转化
    B.DNA理化转移方法（化学刺激质粒进入原生质体、电融合（电激法）、微注射、基因枪法）
    C.种质系统转化法

  • 第2题：

    转基因植物中外源基因的存在问题：外源基因在后代中的遗传多样性和外源基因在后代中表达的（）。


    正确答案:不确定性

  • 第3题：

    将外源基因导入宿主细胞的方法主要有（）。

    • A、转化
    • B、转染
    • C、感染
    • D、侵入
    • E、诱导

    正确答案:A,B,C

  • 第4题：

    欲将一个5kb左右大小的外源基因片断导入某种植物细胞中去，首选的方法应为（）

    • A、原生质体融合
    • B、农杆菌介导的植物转化
    • C、有性杂交
    • D、h-噬菌体为载体的操作

    正确答案:D

  • 第5题：

    动物转基因常用的外源基因导入方法有哪些？各有何优缺点？


    正确答案: 显微注射法：优点：准确、快捷。缺点：成本很高。
    体细胞核移植方法：优点：经济、有效。缺点：耗时。

  • 第6题：

    如何将外源基因导入植物细胞并使之表达？ 


    正确答案:外源基因导入植物细胞并使之表达的方法，分为载体法和直接法两类。载体法是目前最常用的一种方法，最初的载体是土壤农杆菌中的原质粒，在原质粒上有一段DNA，即T-DNA，在土壤农杆菌浸染植物细胞时，T-DNA能够插入植物细胞的基因组中，且能稳定地遗传给其后分离出来的细胞，载体法的优点是操作简便，遗传表达比较稳定，但这些载体仅适用于双子叶植物基因。直接法是将目的基因直接导人受体的细胞中，它包括以原生质为受体的化学转化法，如PEG（聚二乙醇）它以聚二乙醇为融合剂将异源原生质融合在一起，即原生质融合法。磷酸钙-PEG，改良的原生质融合法。电击穿孔法，就是通过很高的电压，迅速将细胞膜的一部分打开，使外源DNA进入原生质体中。显微注射法，就是直接用注射针位射到细胞里。

  • 第7题：

    单选题
    基因治疗的间接体内疗法（ex vivo）的基本程序中不包括（）。
    A

    选择治疗基因

    B

    选择载体

    C

    选择靶细胞

    D

    将外源基因直接导入体内

    E

    将外源基因导入靶细胞


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    单选题
    基因治疗指（）
    A

    Southernblotting

    B

    Westernblotting

    C

    Northernblotting

    D

    输入导入了相应外源基因的细胞

    E

    PCR


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    问答题
    如何将外源基因导入植物细胞并使之表达？

    正确答案： 外源基因导入植物细胞并使之表达的方法，分为载体法和直接法两类。载体法是目前最常用的一种方法，最初的载体是土壤农杆菌中的原质粒，在原质粒上有一段DNA，即T-DNA，在土壤农杆菌浸染植物细胞时，T-DNA能够插入植物细胞的基因组中，且能稳定地遗传给其后分离出来的细胞，载体法的优点是操作简便，遗传表达比较稳定，但这些载体仅适用于双子叶植物基因。直接法是将目的基因直接导人受体的细胞中，它包括以原生质为受体的化学转化法，如PEG（聚二乙醇）它以聚二乙醇为融合剂将异源原生质融合在一起，即原生质融合法。磷酸钙-PEG，改良的原生质融合法。电击穿孔法，就是通过很高的电压，迅速将细胞膜的一部分打开，使外源DNA进入原生质体中。显微注射法，就是直接用注射针位射到细胞里。
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    转基因是将（）导入受体细胞的过程。
    A

    外源蛋白

    B

    细菌

    C

    外源氨基酸

    D

    外源基因


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    下列关于基因工程的叙述中，错误的是（）。
    A

    基因工程常用的运载体包括细菌的质粒、噬菌体、动植物病毒

    B

    将目的基因导入大肠杆菌最常用的方法是用Ca2+处理细胞

    C

    转基因羊在培育过程中还用到动物细胞培养技术和胚胎移植技术

    D

    基因治疗是把有基因缺陷的细胞中的缺陷基因剔除后再导入健康的外源基因


    正确答案： C
    解析： 基因工程常用的运载体包括质粒、噬菌体和动植物病毒等，故A正确；把目的基因导入大肠杆菌时最常用的方法是钙离子处理法，故B正确；转基因羊在培育过程中运用了动物细胞培养和胚胎移植等技术，故C正确：基因治疗是把正常的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中发挥作用，以达到治疗疾病的目的，并不能剔除基因，故D错误。

  • 第12题：

    多选题
    将外源基因导入宿主细胞的方法主要有（）。
    A

    转化

    B

    转染

    C

    感染

    D

    侵入

    E

    诱导


    正确答案： E,D
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    常用的外源基因导入受体细胞的方法有（）（）（）


    正确答案:化学法；电击法；显微注射法

  • 第14题：

    转基因生物的外源基因检测方法有哪些？


    正确答案: （1）形态标记。形态标记是指在杂种后代中那些可被直接观察到的性状，如植株的茎、叶、穗、籽粒各部分大小、色泽、形状及抗病性表现等。这是检测外源基因最常用的、也是最直观的方法。一般是参照双亲的特征，根据杂咱后代的表现情况，来确定杂种后代中是否有外源基因导入。
    （2）细胞标记。细胞标记，即细胞学鉴定。通过对染色体的数目和形态特征观察、染色体带型和核型分析以及减数分裂染色体配对行为的观察，来检测外源基因。这是检测外源基因最基本、最经典的方法。
    具体包括：
    A.杂种细胞学，观察通过对杂种体细胞染色体观察，统计其染色体数目，并结合花粉母细胞减数分裂中期染色体配对行为观察，来确是否有外源基因导入。通过染色体计数和配对行为观察，很容易确定双二倍体、部分双二倍体、附加系、单体、缺体、端体等染色体的数目和类型。利用有无随体染色体，也可鉴定外源基因。
    B.核型及核型分析，核型通常是指体细胞染色体所有可测定的表型特证的总称。核型分析就是对核型的各种特征进行定量或定性的表达。核型分析的染色体，一般以体细胞分裂中期的染色体作为基本形态。在核型分析的表述格式中，一般包括染色体数目和染色体形态特征，形态特征主要包括相对长度、臂比、着丝点位置和随体的有无。染色体的分类目前采用应用最广泛的两点四区系统，我国于1984年第一届全国植物染色体学术讨论会上稍加修改后推行。根据臂比值将染色体分为正中部着丝点（M）、中部着丝点区（m）、近中部着丝点区（sm）、近端部着丝点区（st）、端部着丝点区（t）和端着丝点（T）即所谓的两点四区。
    C.染色体分带，染色体分带技术是通过一定的碱、酸、盐、温度等因素对染色体进行处理，借助Giemsa等染料染色，使染色体在一定部位呈现深浅程度不同的染色区段而形成特定的带纹，由于其带纹在各染色体上显示的位置、宽窄、大小、数目、浓淡等具有相对的稳定性，故可用来进行染色体的鉴别和分析。
    （3）生化标记。生化标记是利用电泳等技术对生物大分子，如蛋白质、酶等进行鉴定。因为蛋白质是由基因编码的，特定的基因型决定了蛋白质的特定组成，因此，不同种、属所特有的蛋白质组成能够反映出该种、属的基因型。
    具体包括：
    A、贮藏蛋白分析法，按其溶解特性可分成谷蛋白和醇溶蛋白两大类，其蛋白的亚基存在着丰富的变异类型，不受环境条件影响而能稳定遗传。
    B、同工酶分析法，同工酶是结构不同但功能相同的一类酶。在一定条件下电泳染色，同一遗传材料可同时显示几条酶带，而不同的遗传材料可具有不同的酶带。同工酶是基因的直接产物，是基因表达的结果。
    （4）分子标记。分子标记是继形态标记、细胞标记、生化标记之后的一种新的分子遗传标记方法，它是以DNA多态性与性状间的紧密连锁关系为基础的遗传标记，能够稳定遗传，且遗传方式比较简单，是性状基因的真实反映，能在不同发育阶段对不同组织DNA进行检测分析。目前，用于检测小麦外源基因的分子标记主要有限制性片段长度多态性（restriction fragment length length polymorphism 简称 RFLP）、随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA 简称 RAPD ）和基因组原位杂交（genomic in situ hybridization 简称 GISH）。这项新技术越来越受到重视，特别是在检测外源小片断染色时更是倍受青睐。 
    具体包括：
    A、RFLP，RFLP技术是基于不同物种、不同材料间基因组DNA的限制性内切酶识别位不同的原理，通过对基因组DNA经特定的限制性内切酶消化，产生不同大小的DNA片断，经电泳后转移到固定支撑物上，用特定的放射性标记的DNA片断（探针）杂交检测多态性。它是检测不同物种个体间基因细微差异的可靠手段，标记的数量较大，呈简单的孟德尔显性遗传。RFLP是较早应用于植物基因标记的一项分子标记技术。 
    B、RAPD，RAPD技术是基于聚合酶链式反应原理，通过运用不同核苷酸序列的随机引物（通常为10个碱基）对基因组DNA进行扩增，对扩增产物进行电泳寻找多态性标记。这类标记通常也是显性遗传，由于它在技术上非常简单，也无需对基因组序列有多少了解，只要合成一套随机引物就可用于作物物种，因而应用最为广泛。RAPD技术最大的缺点是稳定性差，易受不同药品的影响。为了提高该标记的稳定性和重复性，有必要将RAPD技术转化为特异序列扩增的SCAR(Sequence characterized amplified region )标记。即将RAPD作为初步筛选鉴定的一种方法，一旦发现所需的DNA扩增产物之后，再用特异序列扩增的方法，将RAPD转变成经典的PCR方法。 
    C、FISH，这是一项利用标记的DNA探针与染色体上的DNA杂交，在染色体上直接进行检测的分子标记技术。该项技术在研究内容，研究方法上将传统的细胞遗传学与现代分子遗传学结合起来，形成一门新的交叉学科――分子细胞遗传学。制作良好的染色体分裂相片子是该技术的关键。其最大优点是利用普通的显微镜，可以直接鉴定到所要研究的基因在染色体上的位置和分布。
    总之，形态标记、细胞标记、生化标记和分子标记是检测外源基因重要的遗传标记形式。形态标记检测方法简便易行，提供直接的结果，但标记数少、多态性差、易受环境条件影响。 •细胞标记检测是最经典的方法，但工作量大，费人才。生化标记检测设备简单，试剂价格低廉，但标记数目有限。分子标记检测结果可靠，但仪器、试剂都较昂贵，其利用受到一定的限制。各种遗传标记形式都有其局限性，在检测外源基因时，可根据研究条件、研究目的及研究对象，合理地选择相应的检测方法。在实际应用中，常常将几种标记结合起来使用，其结果相互印证，提高了检测结果的准确性和可靠性。

  • 第15题：

    基因治疗的间接体内疗法（ex vivo）的基本程序中不包括（）。

    • A、选择治疗基因
    • B、选择载体
    • C、选择靶细胞
    • D、将外源基因直接导入体内
    • E、将外源基因导入靶细胞

    正确答案:D

  • 第16题：

    关于人体或动物细胞中的基因转移，下列哪项不全面（）

    • A、基因转移的物理方法有显微注射法、电穿孔法和脂质体法等
    • B、基因转移化学法是利用磷酸钙等试剂使细胞膜透性变大，将外源基因导入细胞
    • C、基因转移的同源重组法是利用同源DNA片段的交换，将外源基因导入受体细胞
    • D、基因转移是将外源目的基因导入靶细胞的过程
    • E、基因转移的病毒介导转移法是利用DNA病毒为载体将目的基因导入靶细胞

    正确答案:E

  • 第17题：

    阐述外源基因导入受体细胞的途径。


    正确答案: ⑴受体细胞：是指能够摄取外源DNA，并使其稳定扩增以及表达的细胞。
    ⑵不同导入原核受体细胞的方法：
    ①转化：把以质粒为载体，构建的重组分子导入受体细胞的方法。
    ②转导：以噬菌体或真核病毒为载体构建的重组分子导入受体细胞的方法。
    ③三亲本杂交：将含有重组DNA分子的供体菌，被转化的受体菌含有辅助菌，在辅助菌作用下，将供体菌导入到受体菌中。
    ⑶不同导入真核受体细胞的方法：
    ①导入酵母中：对酵母进行转化的两种方法：a.细胞壁在CaCL2或多聚醇作用下，细胞壁具有穿透性，允许外源基因进入。b.用Li+盐进行处理，细胞能够允许外源基因进入。
    ②导入植物中细胞中：主要采用致癌农杆菌制导下的以后Ti质粒为载体的，土壤杆菌诱发植物产生肿瘤进行转化的方法。
    ③导入动物细胞中：a.物理、化学法b.生物法。

  • 第18题：

    外源基因与载体构成的重组DNA分子性质不同、宿主细胞不同，其重组DNA导入宿主细胞的具体方法也不同，而将外源基因与报告基因共同导入感受态宿主细胞的方法，称作（）。

    • A、电转化重组DNA技术
    • B、共转化重组DNA技术
    • C、体外包装转染重组DNA技术
    • D、脂质体导入重组DNA技术

    正确答案:B

  • 第19题：

    填空题
    外源基因导入植物细胞的方法有（）、（）、（）、（）等。

    正确答案： 基因枪法,农杆菌介导法,聚乙二醇法,电击法
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    问答题
    目的（外源）基因如何导入受体细胞？

    正确答案： A.农杆菌介导的遗传转化
    B.DNA理化转移方法（化学刺激质粒进入原生质体、电融合（电激法）、微注射、基因枪法）
    C.种质系统转化法
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    填空题
    常用的外源基因导入受体细胞的方法有（）（）（）

    正确答案： 化学法,电击法,显微注射法
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    填空题
    外源基因直接导入法是一种不需借助载体介导，直接利用理化因素进行外源遗传物质转移的方法，主要包括（）、（）、（）。

    正确答案： 化学刺激法,基因枪轰击法,微注射法
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    转基因生物的外源基因检测方法有哪些？

    正确答案： （1）形态标记。形态标记是指在杂种后代中那些可被直接观察到的性状，如植株的茎、叶、穗、籽粒各部分大小、色泽、形状及抗病性表现等。这是检测外源基因最常用的、也是最直观的方法。一般是参照双亲的特征，根据杂咱后代的表现情况，来确定杂种后代中是否有外源基因导入。
    （2）细胞标记。细胞标记，即细胞学鉴定。通过对染色体的数目和形态特征观察、染色体带型和核型分析以及减数分裂染色体配对行为的观察，来检测外源基因。这是检测外源基因最基本、最经典的方法。
    具体包括：
    A.杂种细胞学，观察通过对杂种体细胞染色体观察，统计其染色体数目，并结合花粉母细胞减数分裂中期染色体配对行为观察，来确是否有外源基因导入。通过染色体计数和配对行为观察，很容易确定双二倍体、部分双二倍体、附加系、单体、缺体、端体等染色体的数目和类型。利用有无随体染色体，也可鉴定外源基因。
    B.核型及核型分析，核型通常是指体细胞染色体所有可测定的表型特证的总称。核型分析就是对核型的各种特征进行定量或定性的表达。核型分析的染色体，一般以体细胞分裂中期的染色体作为基本形态。在核型分析的表述格式中，一般包括染色体数目和染色体形态特征，形态特征主要包括相对长度、臂比、着丝点位置和随体的有无。染色体的分类目前采用应用最广泛的两点四区系统，我国于1984年第一届全国植物染色体学术讨论会上稍加修改后推行。根据臂比值将染色体分为正中部着丝点（M）、中部着丝点区（m）、近中部着丝点区（sm）、近端部着丝点区（st）、端部着丝点区（t）和端着丝点（T）即所谓的两点四区。
    C.染色体分带，染色体分带技术是通过一定的碱、酸、盐、温度等因素对染色体进行处理，借助Giemsa等染料染色，使染色体在一定部位呈现深浅程度不同的染色区段而形成特定的带纹，由于其带纹在各染色体上显示的位置、宽窄、大小、数目、浓淡等具有相对的稳定性，故可用来进行染色体的鉴别和分析。
    （3）生化标记。生化标记是利用电泳等技术对生物大分子，如蛋白质、酶等进行鉴定。因为蛋白质是由基因编码的，特定的基因型决定了蛋白质的特定组成，因此，不同种、属所特有的蛋白质组成能够反映出该种、属的基因型。
    具体包括：
    A、贮藏蛋白分析法，按其溶解特性可分成谷蛋白和醇溶蛋白两大类，其蛋白的亚基存在着丰富的变异类型，不受环境条件影响而能稳定遗传。
    B、同工酶分析法，同工酶是结构不同但功能相同的一类酶。在一定条件下电泳染色，同一遗传材料可同时显示几条酶带，而不同的遗传材料可具有不同的酶带。同工酶是基因的直接产物，是基因表达的结果。
    （4）分子标记。分子标记是继形态标记、细胞标记、生化标记之后的一种新的分子遗传标记方法，它是以DNA多态性与性状间的紧密连锁关系为基础的遗传标记，能够稳定遗传，且遗传方式比较简单，是性状基因的真实反映，能在不同发育阶段对不同组织DNA进行检测分析。目前，用于检测小麦外源基因的分子标记主要有限制性片段长度多态性（restriction fragment length length polymorphism 简称 RFLP）、随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA 简称 RAPD ）和基因组原位杂交（genomic in situ hybridization 简称 GISH）。这项新技术越来越受到重视，特别是在检测外源小片断染色时更是倍受青睐。 
    具体包括：
    A、RFLP，RFLP技术是基于不同物种、不同材料间基因组DNA的限制性内切酶识别位不同的原理，通过对基因组DNA经特定的限制性内切酶消化，产生不同大小的DNA片断，经电泳后转移到固定支撑物上，用特定的放射性标记的DNA片断（探针）杂交检测多态性。它是检测不同物种个体间基因细微差异的可靠手段，标记的数量较大，呈简单的孟德尔显性遗传。RFLP是较早应用于植物基因标记的一项分子标记技术。 
    B、RAPD，RAPD技术是基于聚合酶链式反应原理，通过运用不同核苷酸序列的随机引物（通常为10个碱基）对基因组DNA进行扩增，对扩增产物进行电泳寻找多态性标记。这类标记通常也是显性遗传，由于它在技术上非常简单，也无需对基因组序列有多少了解，只要合成一套随机引物就可用于作物物种，因而应用最为广泛。RAPD技术最大的缺点是稳定性差，易受不同药品的影响。为了提高该标记的稳定性和重复性，有必要将RAPD技术转化为特异序列扩增的SCAR(Sequence characterized amplified region )标记。即将RAPD作为初步筛选鉴定的一种方法，一旦发现所需的DNA扩增产物之后，再用特异序列扩增的方法，将RAPD转变成经典的PCR方法。 
    C、FISH，这是一项利用标记的DNA探针与染色体上的DNA杂交，在染色体上直接进行检测的分子标记技术。该项技术在研究内容，研究方法上将传统的细胞遗传学与现代分子遗传学结合起来，形成一门新的交叉学科――分子细胞遗传学。制作良好的染色体分裂相片子是该技术的关键。其最大优点是利用普通的显微镜，可以直接鉴定到所要研究的基因在染色体上的位置和分布。
    总之，形态标记、细胞标记、生化标记和分子标记是检测外源基因重要的遗传标记形式。形态标记检测方法简便易行，提供直接的结果，但标记数少、多态性差、易受环境条件影响。 •细胞标记检测是最经典的方法，但工作量大，费人才。生化标记检测设备简单，试剂价格低廉，但标记数目有限。分子标记检测结果可靠，但仪器、试剂都较昂贵，其利用受到一定的限制。各种遗传标记形式都有其局限性，在检测外源基因时，可根据研究条件、研究目的及研究对象，合理地选择相应的检测方法。在实际应用中，常常将几种标记结合起来使用，其结果相互印证，提高了检测结果的准确性和可靠性。
    解析： 暂无解析

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