HPLC的全称是什么？一套HPLC系统包括哪些主要部件？常用的HPLC填料有哪些？并说明其基本分离原理。

第1题：

第2题：

在HPLC法中，对流动相有哪些基本要求？

正确答案: 一般考虑有以下几方面：
1.与色谱柱不发生不可逆的化学作用；
2.能溶解被测组分；
3.粘度尽可能小；
4.与采用检测器性能相匹配；
5.毒性小，易纯化且价廉。

第3题：

HPLC填料的颗粒分散范围越窄越好。

正确答案:正确

第4题：

做为优良的HPLC填料应具备什么基本的物理化学特性？

正确答案: 在物理结构上的要求：
合适的颗粒大小及较窄的粒度分布；
一定的颗粒强度；
一定的孔径大小和孔径分布，避免复杂的微孔结构；
一定的溶胀及收缩水平；
在化学结构上的要求：填料的化学结构，特别是颗粒表面和内孔表面的化学结构（如连接在基质上的官能基团或链段）是影响色谱热力学行为（保留值，选择性等）的主要因素。
特定的选择性；
良好的化学稳定性；
避免不可逆吸附。

第5题：

HPLC色谱柱的关键在于填料，填料的物理化学参数有什么要求？

正确答案: 在物理结构上的要求：
①合适的颗粒大小及较窄的粒度分布；
②一定的颗粒强度；
③一定的孔径大小和孔径分布，避免复杂的微孔结构；
④一定的溶胀及收缩水平；
目前的主要发展方向（研究热点）：
①颗粒单分散的填料；
②贯穿性超大孔结构的填料；
③小颗粒的非多孔填料；
在化学结构上的要求：填料的化学结构，特别是颗粒表面和内孔表面的化学结构（如连接在基质上的官能基团或链段）是影响色谱热力学行为（保留值，选择性等）的主要因素。
①特定的选择性；
②良好的化学稳定性；
③避免不可逆吸附；
不同填料的化学结构是通过对基质材料的化学改性而实现的。

第6题：

常用的HPLC定量分析方法是什么？哪些方法需要用校正因子校正峰面积？哪些方法可以不用校正因子？

正确答案: 常用的HPLC定量分析方法有：外标法：外标工作曲线法、外标一点法、外标二点法等
内标法：内标工作曲线法、内标一点法、内标二点法、内标对比法等使用内标和外标标准曲线法时，可以不必测定校正因子，其它方法须要用校正因子校正峰面积

第7题：

HPLC所用流动相脱气的方法有哪些？

正确答案:HPLC所用流动相常用脱气的方法有：加热回流；通氦气；抽真空；超声。

第8题：

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

制备型HPLC与分析型HPLC的主要不同点是什么？

正确答案: （1）输液泵不同：两种泵设计的特点及其性能
（2）检测器中的检测池不同
（3）色谱柱不同：主要是色谱柱的直径大小不同以及填料的粒径的大小不同
（4）制备色谱一般配有电导检测器和pH值检测器分析型色谱没有
（5）制备色谱一般配备收集器分析型色谱没有

第14题：

评价HPLC色谱填料性能的主要表征指标包括：（）、（）、（）、（）和（）。

正确答案:保留值；选择性；柱效率；填充柱的空喜；穿透性，分离度

第15题：

关于HPLC的说法中不正确的是（）

• A、HPLC中流动相可与被分离的样品产生相互作用
• B、HPLC按分离机理不同分为液—固、液—液、键和相、凝胶色谱等多种。
• C、在液—液分配色谱中可分为正相和反相色谱。
• D、非极性烷基键和相通常作为正相色谱的填料

正确答案:D

第16题：

简述HPLC柱对介质的要求和羟基磷灰石填料的性能。

正确答案: HPLC柱对于介质的要求和羟基磷灰石作为色谱填充介质的性能主要表现在以下几个方面：
1）高机械强度在HPLC柱中流动相一般在高压下通过柱，因而要求填充介质具有高的机械强度。现在使用的羟基磷灰石，尤其是球型颗粒可以在15MPa压力下使用，通过强化方法制备的羟基磷灰石既所谓陶瓷羟基磷灰石可在几十兆帕以上的压力下使用。
2）粒子大小、形状和孔隙填充介质的粒子大小、形状以及表面结构与HPLC柱的理论塔板数直接相关，通常要求有高的理论塔板数。球型羟基磷灰石颗粒大小、性质和孔隙可满足HPLC柱的要求。
3）化学和热稳定性
色谱过程是流动相与固定相既填充介质之间频繁强烈接触中完成的，因此要求填充介质在流动相中有很好的化学稳定性。
羟基磷灰石是磷酸钙盐中最稳定的相，在中性或碱性水相中非常稳定。羟基磷灰石在1400℃才发生相变，热稳定性好。
4）非可逆吸附为有稳定的柱效和足够长的使用周期，HPLC柱要求填充介质具有低的非可逆吸附。羟基磷灰石的非可逆吸附非常低，满足这一要求。
5）表面化学修饰为用于高效亲和色谱，要求在填充介质表面配接相应的功能基团。羟基磷灰石表面较易进行各种化学修饰。
总之，羟基磷灰石作为色谱柱填充介质能提供专一的选择性、高的键和容量、低的非可逆吸附以及化学稳定性和热稳定性好，完全满足HPLC柱的要求。

第17题：

试讨论反相HPLC的分离条件的选择。

正确答案: 反相HPLC法是以表面非极性载体为固定相，以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式。反相HPLC色谱中样品的保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定，保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增。溶质保留值与固定相表面积成正比，当其他条件相同时，溶质在低表面积色谱柱上的保留值短。样品的保留值也可以通过改变流动相组成或溶剂强度来调整，溶剂强度取决于有机溶剂的性质和其在流动相中的浓度。

第18题：

HPLC中，常用的定量方法有哪些？哪些需要校正因子，哪些些不需要。

正确答案:常用的定量方法有：归一化法，需要校正因子；外标法，不需要校正因子；内标法，需要校正因子。

第19题：

第20题：

第21题：

第22题：

第23题：