参考答案和解析
正确答案: 亲和配基固定在膜孔表面,流体在对流透过膜的过程中目标蛋白质与配基接触而被吸附。
亲和膜色谱的优点
无内扩散传质阻力,仅存在表面液膜传质能力,由于传质能力小,吸附速度快,达到吸附平衡所需时间短,配基利用率高;
设备体积小,压降小,流速快,配基用量低;微孔膜介质种类多,价格便宜。
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  • 第1题:

    色谱按分离原理分()。

    • A、吸附色谱
    • B、凝胶色谱
    • C、分配色谱
    • D、离子交换色谱
    • E、生物亲和色谱

    正确答案:C,D

  • 第2题:

    根据色谱机理,色谱柱分为:反相色谱、正相色谱、()、凝胶过滤色谱(或亲和色谱)。


    正确答案:离子交换色谱

  • 第3题:

    亲和膜色谱的缺点是什么?


    正确答案: 从分离效率的角度,因膜的厚度(柱高)很小(一般为10~100μm).理论板数很低,吸附和清洗效率低。膜的污染和膜孔的堵塞使操作速度、吸附效率和亲和膜的寿命下降。

  • 第4题:

    亲和吸附的原理和特点是什么?


    正确答案: 亲和吸附原理:亲和吸附依靠于涪质和树脂之间特殊的化学作用,这不同于依靠范德华力的传统吸附及离子交换静电吸附。亲和吸附具有更高的选择性,吸附剂由载体与配位体两部分组成。载体与配位体之间以共价键或离子簇相连,但载体不与溶质反应。相反,被束缚的配位体有选择地与溶质反应,当涪质为大分子时,这种作用表示为“钥匙和钥匙”的机制,大致可分为三步:
    ①配基固定化选舞合适的配基与不溶性的支撑载体偶联,或共价结合成具有特异亲和性的分离介质。
    ②吸附样品亲和吸附介质选择性吸附酶或其他生物活性物质,杂质与层折介质问没有亲和作用,故不能被吸附而被洗涤去除。
    ③样品解析选择适宜的条件,使被吸附的亲和介质上的酪或其他生物活性物质解吸。
    亲和吸阳的特点:
    亲和吸附酌最大优点在于,利用它从租提液中经过一次简单的处理便可得到所需的高纯度活性物质。此外亲和吸附具有对设备要求不高、操作简便、适用范围广、特异性强、分离速度快、分离效果好、分离条件温和等优点,其主要缺点是亲和吸附剂通用性较差,要分离一种物质得重新制备专用的吸附剂;由于洗脱条件较苛刻,须很好地控制洗脱条件,以避免生物活性物质的变性失话。

  • 第5题:

    用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是()

    • A、离子交换色谱
    • B、亲和色谱
    • C、凝胶过滤色谱
    • D、反相色谱

    正确答案:C

  • 第6题:

    写出下列各种色谱的分离原理及应用特点:正相分配色谱,反相分配色谱,硅胶色谱,聚酰胺色谱,凝胶滤过色谱,离子交换色谱。


    正确答案: 正相色谱法:根据溶质极性的不同而产生的溶质在吸附剂上吸附性强弱的差异而分离
    反相色谱法:根据固溶质疏水性的不同而产生的溶质在流动相与固定相之间分配系数的差异分离
    硅胶色谱:颗粒直径较大,流动相仅靠重力作用自上而下缓缓流动色谱柱,流出液用人工分段收集后再进行分析。
    凝胶滤过色谱:葡聚糖凝胶吸水后,形成凝胶粒子,在交链键的骨架中存在着许多网眼,网眼大可使大分子量的化合物进入,网眼小则只能使小分子量的化合物进入。超过一定限度的大分子量物质,就被排阻在凝胶颗粒的外部难以进入网眼内部,则大分子量物质首先被洗出。
    离子交换色谱:利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法,利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。

  • 第7题:

    问答题
    亲和色谱的分离机制是什么?有何特点?

    正确答案: 传统的观念认为亲和色谱是基于配基-配体亲和反应的原理,利用色谱的差速迁移理论,实现对目标分子的分离,仅仅是一种组分分离的选择性过滤法。然而,这一理论是建立在配基-配体亲和作用是均相反应和宏观平衡态热力学的基础上的。但是,实际上目标分子在两相间分配系数过大,且在固定相上的吸附等温线多不呈线性。所以,关于生物大分子在亲和色谱中的保留机制及色谱过程数学模型的研究一直是一个相对薄弱的环节,有待进一步的完善.亲和色谱具有较高的专属性,经其分离,纯化,浓集后的生物样品具有较高的纯度,大大降低了后续测定(如HPLC.时的背景噪音,进而使得后续测定具有极高的灵敏度。
    解析: 暂无解析

  • 第8题:

    问答题
    凝胶色谱、膨胀床色谱的原理及特点是什么?

    正确答案: 凝胶色谱
    原理:以各种多孔凝胶为固定相,利用流动相中所含各种组分的相对分子量(Mr)不同而达到物质分离的一种技术。
    特点:惰性;化学性质稳定;带电荷低;分离范围广;颗粒大小适当;机械强度高。
    膨胀床色谱
    吸附介质颗粒在向上流动液体的作用下膨胀起来,液体中的目标蛋白被吸附于介质上,而细胞和其碎片将通过柱子而流出去,洗脱目标蛋白时从相反方向将吸附介质压紧,再用洗脱缓冲液将目标蛋白洗脱下来。
    传统色谱的最大缺点是不能处理含固体颗粒的料液。
    色谱吸附剂直接与原料液在搅拌罐中混合来吸附目标产物或流化床吸附。
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    问答题
    亲和色谱的原理是什么?

    正确答案: 亲和色谱是利用亲和吸附作用分离纯化生物物质的液相色谱法。亲和色谱的固定相是键合亲和配基的亲和吸附介质(亲和吸附剂),流动相为液体。由于目标产物基于生物亲和作用吸附在固定相上,具有高度的选择性。
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    问答题
    亲和膜色谱的原理和特点

    正确答案: 原理:亲和配基固定在膜孔表面,流体在对流透过膜的过程中目标蛋白质与配基接触而被吸附。
    亲和膜色谱的优点:无内扩散传质阻力,仅存在表面液膜传质能力,由于传质能力小,吸附速度快,达到吸附平衡所需时间短,配基利用率高;
    设备体积小,压降小,流速快,配基用量低;微孔膜介质种类多,价格便宜。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    单选题
    色谱法可分为气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。GC根据固定相不同又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC),其中以GLC应用最广。按原理还可分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、排阻色谱法和亲和色谱法。 气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)的分类是按照
    A

    固定相的聚集状态

    B

    流动相的聚集状态

    C

    固定相的几何形状

    D

    分离原理

    E

    流动相的化学性质


    正确答案: E
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    问答题
    亲和吸附的原理和特点是什么?

    正确答案: 亲和吸附原理:亲和吸附依靠于涪质和树脂之间特殊的化学作用,这不同于依靠范德华力的传统吸附及离子交换静电吸附。亲和吸附具有更高的选择性,吸附剂由载体与配位体两部分组成。载体与配位体之间以共价键或离子簇相连,但载体不与溶质反应。相反,被束缚的配位体有选择地与溶质反应,当涪质为大分子时,这种作用表示为“钥匙和钥匙”的机制,大致可分为三步:
    ①配基固定化选舞合适的配基与不溶性的支撑载体偶联,或共价结合成具有特异亲和性的分离介质。
    ②吸附样品亲和吸附介质选择性吸附酶或其他生物活性物质,杂质与层折介质问没有亲和作用,故不能被吸附而被洗涤去除。
    ③样品解析选择适宜的条件,使被吸附的亲和介质上的酪或其他生物活性物质解吸。
    亲和吸阳的特点:
    亲和吸附酌最大优点在于,利用它从租提液中经过一次简单的处理便可得到所需的高纯度活性物质。此外亲和吸附具有对设备要求不高、操作简便、适用范围广、特异性强、分离速度快、分离效果好、分离条件温和等优点,其主要缺点是亲和吸附剂通用性较差,要分离一种物质得重新制备专用的吸附剂;由于洗脱条件较苛刻,须很好地控制洗脱条件,以避免生物活性物质的变性失话。
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    亲和层析的原理是什么?主要特点是什么?


    正确答案: 亲和层析的设计和过程大致分为以下三步:
    1)配基固定化:选择合适的配基与不溶性的支撑载体偶链,或共价结合成具有特异亲和性的分离介质;
    2)吸附样品:亲和层析介质选择性吸附酶或其他生物活性物质,杂质与层析介质间没有亲和作用,故不能被吸附而被洗涤去除;
    3)样品解析:选择适宜的条件使被吸附的亲和介质上的酶或其他生物活性物质解析下柱。
    亲和层析技术的最大优点在于,利用它从提取液中经过一次简单的处理便可得到所需的高纯度活性物质。
    此外亲和层析还有对设备要求不高、操作简便、适用范围广、特异性强、分离速度快、分离效果好、分离条件温和等优点:
    其主要缺点是亲和吸附剂通用性较差,故要分离一种物质差不多都得重新制备专用的吸附剂。
    另外由于洗脱条件较苛刻,须很好地控制洗脱条件,以避免生物活性物质的变性失活。

  • 第14题:

    凝胶色谱、膨胀床色谱的原理及特点是什么? 


    正确答案: 凝胶色谱
    原理:以各种多孔凝胶为固定相,利用流动相中所含各种组分的相对分子量(Mr)不同而达到物质分离的一种技术。
    特点:惰性;化学性质稳定;带电荷低;分离范围广;颗粒大小适当;机械强度高。
    膨胀床色谱
    吸附介质颗粒在向上流动液体的作用下膨胀起来,液体中的目标蛋白被吸附于介质上,而细胞和其碎片将通过柱子而流出去,洗脱目标蛋白时从相反方向将吸附介质压紧,再用洗脱缓冲液将目标蛋白洗脱下来。
    传统色谱的最大缺点是不能处理含固体颗粒的料液。
    色谱吸附剂直接与原料液在搅拌罐中混合来吸附目标产物或流化床吸附。

  • 第15题:

    亲和色谱的原理是什么?


    正确答案: 亲和色谱是利用亲和吸附作用分离纯化生物物质的液相色谱法。亲和色谱的固定相是键合亲和配基的亲和吸附介质(亲和吸附剂),流动相为液体。由于目标产物基于生物亲和作用吸附在固定相上,具有高度的选择性。

  • 第16题:

    亲和色谱


    正确答案:是指利用生物分子与固定相表面的亲和配基所亲和力的差异而进行层析分析的方法。

  • 第17题:

    亲和膜色谱的缺点。


    正确答案: 从分离效率的角度,因膜的厚度(柱高)很小(一般为10~100μm).理论板数很低,吸附和清洗效率低。膜的污染和膜孔的堵塞使操作速度、吸附效率和亲和膜的寿命下降。

  • 第18题:

    亲和色谱的分离机制是什么?有何特点?


    正确答案: 传统的观念认为亲和色谱是基于配基-配体亲和反应的原理,利用色谱的差速迁移理论,实现对目标分子的分离,仅仅是一种组分分离的选择性过滤法。然而,这一理论是建立在配基-配体亲和作用是均相反应和宏观平衡态热力学的基础上的。但是,实际上目标分子在两相间分配系数过大,且在固定相上的吸附等温线多不呈线性。所以,关于生物大分子在亲和色谱中的保留机制及色谱过程数学模型的研究一直是一个相对薄弱的环节,有待进一步的完善.亲和色谱具有较高的专属性,经其分离,纯化,浓集后的生物样品具有较高的纯度,大大降低了后续测定(如HPLC.时的背景噪音,进而使得后续测定具有极高的灵敏度。

  • 第19题:

    问答题
    写出下列各种色谱的分离原理及应用特点:正相分配色谱,反相分配色谱,硅胶色谱,聚酰胺色谱,凝胶滤过色谱,离子交换色谱。

    正确答案: 正相色谱法:根据溶质极性的不同而产生的溶质在吸附剂上吸附性强弱的差异而分离
    反相色谱法:根据固溶质疏水性的不同而产生的溶质在流动相与固定相之间分配系数的差异分离
    硅胶色谱:颗粒直径较大,流动相仅靠重力作用自上而下缓缓流动色谱柱,流出液用人工分段收集后再进行分析。
    凝胶滤过色谱:葡聚糖凝胶吸水后,形成凝胶粒子,在交链键的骨架中存在着许多网眼,网眼大可使大分子量的化合物进入,网眼小则只能使小分子量的化合物进入。超过一定限度的大分子量物质,就被排阻在凝胶颗粒的外部难以进入网眼内部,则大分子量物质首先被洗出。
    离子交换色谱:利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法,利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。
    解析: 暂无解析

  • 第20题:

    多选题
    色谱按分离原理分()。
    A

    吸附色谱

    B

    凝胶色谱

    C

    分配色谱

    D

    离子交换色谱

    E

    生物亲和色谱


    正确答案: E,C
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    问答题
    亲和膜色谱的缺点是什么?

    正确答案: 从分离效率的角度,因膜的厚度(柱高)很小(一般为10~100μm).理论板数很低,吸附和清洗效率低。膜的污染和膜孔的堵塞使操作速度、吸附效率和亲和膜的寿命下降。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    问答题
    亲和膜色谱的缺点。

    正确答案: 从分离效率的角度,因膜的厚度(柱高)很小(一般为10~100μm).理论板数很低,吸附和清洗效率低。膜的污染和膜孔的堵塞使操作速度、吸附效率和亲和膜的寿命下降。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    单选题
    用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是()
    A

    离子交换色谱

    B

    亲和色谱

    C

    凝胶过滤色谱

    D

    反相色谱


    正确答案: D
    解析: 暂无解析