什么是固定化酶？简述特点与方法。
题目
什么是固定化酶？简述特点与方法。
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第1题：
什么是固定化酶？简述特点与方法。
正确答案:固定化酶即限制或固定于特定空间位置的酶，具体来说，是指经物理或化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。
固定化酶特点是可以多次使用，提高了酶的稳定性，反应后，易于分离产物，反应条件易于控制，酶的利用效率高，更适合于多酶反应。酶固定化方法有吸附法、共价结合法、包埋法及交联法。 -
第2题：
简述酶的固定化方法。
正确答案: 吸附法、包埋法、结合法、交联法、热处理法。 -
第3题：
简述固定化细胞发酵产酶的特点。
正确答案:固定化细胞发酵产酶的特点：
A.提高产酶率（细胞密度大）
B.可以反复使用或连续使用较长时间（细胞不易脱落流失）
C.发酵稳定性好（载体的保护）
D.缩短发酵周期，提高设备利用率（预培养）
E.产品容易分离纯化（细胞不溶于水）
F.适用于胞外酶等胞外产物的生产（载体的扩散抑制） -
第4题：
固定化酶和固定化细胞在实际应用中的显著特点是什么？
正确答案:（1）容易实现连续反应。
（2）获得的产物纯度高。
（3）酶或细胞可重复使用，减少了浪费。 -
第5题：
简述固定化酶的制备方法及方法之间的利弊。
正确答案: 方法：吸附法、包埋法、共价键结合法和交联法
利弊：（1）包埋法、共价键结合法和交联法虽结合力强但不能再生回收；（2）吸附法制备简单；成本低；能回收再生但结合差，在受到离子强度，PH变化影响后酶会从载体上游离下来，在使用价格较高的酶与载体时可行；（3）包埋法各方面较好但不适合大分子产物和底物。 -
第6题：
简述固定化细胞的特点与应用
正确答案: 优点：
1.使用固定化细胞省去了酶的分离过程，显著降低了成本。
2.固定化细胞为多酶系统，不需要辅助因子
3.增加了细胞对不利环境的耐逆性，可重复使用。
4.增加了酶的稳定性。
缺点：
1.对底物和产物的要求是可以穿过细胞壁细胞膜。
2.会形成大量的副产物，降低了纯度。
3.维持固定化细胞持续的催化活性远比酶要复杂，有些细胞在条件不适宜的情况下很容易发生自溶，影响产品的稳定性。
应用：
1.在食品工业中的应用；
2.在发酵工业中的应用；
3.在三废处理中的应用。 -
第7题：
简述固定化原生质体的制备方法与特点。
正确答案:固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的原生质体称为固定化原生质体。
（1）固定化原生质体的制备包括原生质体的制备和原生质体固定化两个阶段。
①原生质体的制备：一般来说，原生质体的制备过程是首先将对数生长期的细胞收集起来，悬浮在含有渗透压稳定剂的高渗缓冲液中；然后加入适宜的细胞壁水解酶，在一定的条件下作用一段时间，使细胞壁破坏；分离除去细胞壁碎片、未破坏的细胞以及细胞壁水解酶，而得到球状原生质体。
②原生质体固定化：原生质体固定化：原生质体制备好后，把离心收集到的原生质体重新悬浮在含有渗透压稳定剂的缓冲液中，配成一定浓度的原生质体悬浮液，然后采用凝胶包埋法制成固定化原生质体。
（2）、固定化原生质体具有下列显著特点：
①由于没有细胞壁，细胞结构不完整，失去增殖能力，但是由于细胞膜内的结构完整，保持了细胞原有的新陈代谢特性。
②固定化原生质体由于解除了细胞壁这一扩散屏障，可增加细胞膜的通透性，有利于氧气和营养物质的传递和吸收，也有利于胞内物质的分泌，可显著提高产率。
③固定化原生质体由于有载体的保护作用，具有较好的操作稳定性和保存稳定性，可反复使用和连续使用较长时间，利于连续化生产，在4˚C保存较长时间后仍能保持其生产能力。
④固定化原生质体易于何发酵产物分开，有利于产物的分离纯化，提高产品质量。
⑤固定化原生质体发酵的培养基中需要添加渗透压稳定剂，以保存原生质体的稳定性。这些渗透压稳定剂在发酵结束后，可用层析或膜分离技术等方法与产物分离。 -
第8题：
问答题固定化酶有什么特点？正确答案： 固定化酶特点：
A.不溶于水：反应完成后，经过滤或离心等简单分离，就可以回收，以重复使用，降低酶制剂成本。
B.具有一定的机械强度：可将其装成酶柱，当底物溶液缓缓流经酶柱时，就能发生酶促反应，流出液中，即含有酶促反应产物，其产物不易带杂质，收率高，易精制。
C.稳定性提高：酶柱往往可以连续使用数十次，而酶活力并无明显下降。解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题简述固定化酶的特点与性质。正确答案： 特点：
1.易于反应液分开
2.可较长时期、反复使用，降低生产成本
3.酶的稳定性提高
4.较易控制终止酶的反应进程
5.产物纯化简便
性质：
1.酶固定化后，酶活力较原酶活力有所降低
2.酶在固定化后，对底物作用的最适pH值与游离酶不同，酶活力-pH曲线常常发生偏移
3.固定化后，最适温度较原酶有所提高
4.固定化后，酶的热稳定性提高解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题简述固定化细胞发酵产酶的特点。正确答案： 固定化细胞发酵产酶的特点：
A.提高产酶率（细胞密度大）
B.可以反复使用或连续使用较长时间（细胞不易脱落流失）
C.发酵稳定性好（载体的保护）
D.缩短发酵周期，提高设备利用率（预培养）
E.产品容易分离纯化（细胞不溶于水）
F.适用于胞外酶等胞外产物的生产（载体的扩散抑制）解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题简述固定化微生物细胞发酵产酶的特点。正确答案： ①提高产酶率；
②可以反复使用或连续使用较长的时间；
③基因工程菌的质粒稳定，不易丢失；
④发酵稳定性好；
⑤缩短发酵周期，提高设备利用率；
⑥产品容易分离纯化；
⑦适用于胞外酶等胞外产物的生产。
（固定化细胞发酵产酶的工艺条件及其控制：①固定化细胞的与培养；②溶解氧的供给；③温度的控制；④培养基组分的控制。）解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题酶和酶菌体的固定化方法有几种？各用什么载体？正确答案： A.载体结合法：葡聚糖，活性炭，胶原，琼脂糖，多孔玻璃珠，高岭土，硅胶，氧化铝，羧甲基纤维素等。
B.交联法：交联剂有：戊二醛，双重氮联苯胺和六甲撑二异氰酸酯。
C.包埋法：格子型包埋材料：聚丙烯酰胺凝胶，聚乙烯醇，琼脂，硅胶等。微胶囊型的包埋材料有尼龙，乙基纤维素和硝酸纤维素。
D.逆胶束酶反应系统：表面活性剂。解析： 暂无解析 -
第13题：
固定化酶和固定化细胞的特点和优点各是什么？
正确答案:固定化酶的特点：具有生物催化剂的功能，又有固相催化剂的功能。
主要优点如下：
①可多次使用；
②反应后，酶底物产物易分开，产物中无残留酶，易纯化，产品质量高；
③反应条件易控制；
④酶的利用效率高；
⑤比水溶性酶更适合于多酶反应。 -
第14题：
简述固定化对酶性质的影响（固定化酶的性质）。
正确答案:（1）稳定性大多数酶固定化后，稳定性都增强，操作寿命和保存寿命也延长。
（2）固定化酶的最适温度和最适pH固定化后，大多数酶的热稳定性提高，所以最适温度也随之提高。酶固定化后，对底物作用的最适pH和酶活力－pH曲线常常会发生偏移。带负电荷的载体固定化的酶的最适pH向碱性偏移，带正电荷的载体固定化的酶的最适pH向酸性偏移。
（3）固定化酶的动力学特征固定化酶的表观米氏常数Km随载体的带电性能变化。
（4）固定化酶的专一性酶固定化后，一般不会改变其专一性。但也有少数情况酶固定化后专一性会发生改变。 -
第15题：
简述酶固定化技术的几种主要方法，并比较其优缺点。
正确答案:（1）吸附法：通过载体表面和酶分子表面之间的氢键、疏水键和π-电子亲和力等物理作用力，将酶固定于不溶性载体的方法。
（2）结合法：选择适宜的载体，使之通过共价键或离子键，与酶结合在一起的固定化方法，称为结合法。根据酶与载体结合的化学键不同，结合法分为离子键结合法和共价键结合法。
（3）交联法：利用双功能试剂或多功能试剂在酶分子间，酶分子与惰性蛋白间，或酶分子与载体间进行交联反应，以共价键制备固定化酶的方法。
（4）包埋法：将聚合物的单体和酶溶液混合后，借助聚合促进剂（包括交联剂）的作用使单体进行聚合，从而将酶包埋于聚合物中的固定化方法。吸附法的优点是酶的活性中心不易被破坏，且酶的高级结构变化少，酶活力损失很少。缺点是酶与载体相互作用力弱、酶容易从载体上脱落下来。
离子结合法的优点是操作简单，处理条件温和，酶的高级结构和活性中心的氨基酸残基不易被破坏，能得到酶活回收率高的固定化酶。缺点是载体和酶的结合力比较弱，容易受缓冲液种类或pH的影响，在离子强度高的条件下进行反应时，酶往往会从载体上脱落。
共价结合法的优点是酶与载体结合牢固，稳定性好，一般不会因底物浓度高或存在盐类等原因而轻易脱落，这有利于连续使用。缺点是反应条件苛刻，操作复杂，而且由于采用了比较激烈的反应条件，可能会引起酶蛋白高级结构的变化，破坏部分活性中心，因此往往不能得到比活力高的固定化酶，其酶活回收率一般为30%左右，有时甚至底物的专一性等酶的性质也会因固定化而发生变化。
交联法的优点是操作简便。缺点是交联反应的过程往往比较激烈，许多酶易在固定化过程中失效，酶回收率不高。
包埋法优点是一般不会与酶蛋白的氨基酸残基进行结合反应，很少改变酶的高级结构，故而一般比较安全，酶活回收率较高。缺点是聚合过程中由于自由基的产生、放热以及酶和试剂间可能发生化学反应等，也往往会导致酶的失活。而且只适合作用于小分子底物和产物的酶。
包埋、共价结合、交联三种虽结合力强，但不能再生、回收；物理吸附法制备简单，成本低，能回收再生，但结合差，在受到离子强度、pH变化影响后，酶会从载体上游离下来；包埋法各方面较好，但不适于大分子底物和产物。 -
第16题：
固定化酶有什么特点？
正确答案:固定化酶特点：
A.不溶于水：反应完成后，经过滤或离心等简单分离，就可以回收，以重复使用，降低酶制剂成本。
B.具有一定的机械强度：可将其装成酶柱，当底物溶液缓缓流经酶柱时，就能发生酶促反应，流出液中，即含有酶促反应产物，其产物不易带杂质，收率高，易精制。
C.稳定性提高：酶柱往往可以连续使用数十次，而酶活力并无明显下降。 -
第17题：
酶固定化后性质会发生什么变化？特点是什么？
正确答案: 水溶性酶与水不溶性载体通过固定化技术结合形成水不溶性酶。
固定化酶的特点：
优点：1.不溶于水，易于与产物分离；2.可反复使用；3.可连续化生产；4.稳定性好。
缺点：固定化过程中往往会引起酶的失活。 -
第18题：
简述固定化酶的特点与性质。
正确答案: 特点：
1.易于反应液分开
2.可较长时期、反复使用，降低生产成本
3.酶的稳定性提高
4.较易控制终止酶的反应进程
5.产物纯化简便
性质：
1.酶固定化后，酶活力较原酶活力有所降低
2.酶在固定化后，对底物作用的最适pH值与游离酶不同，酶活力-pH曲线常常发生偏移
3.固定化后，最适温度较原酶有所提高
4.固定化后，酶的热稳定性提高 -
第19题：
问答题什么是固定化酶？简述特点与方法。正确答案： 固定化酶即限制或固定于特定空间位置的酶，具体来说，是指经物理或化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。 固定化酶特点是可以多次使用，提高了酶的稳定性，反应后，易于分离产物，反应条件易于控制，酶的利用效率高，更适合于多酶反应。酶固定化方法有吸附法、共价结合法、包埋法及交联法。解析： 暂无解析 -
第20题：
问答题简述固定化酶、固定化细胞制备方法及特点。正确答案： 固定化酶与固定化细胞都是以酶的应用为目的，所以两者的制备法基本相同，均包括下面的四种方法：
包埋法、吸附法、共价偶联、非共价结合法
一、
包埋法的优点：反应条件温和，很少改变酶结构但是又较牢固的固定化方法。
包埋法的缺点：只有小分子底物和产物可以通过高聚物网架扩散，对那些底物和产物是大分子的酶并不适合。
二、
吸附法的优点：操作简单，可供选择的载体类型多，吸附过程可同时达到纯化和固化的目的，固定化酶使用失活后可以重新活化和再生。
吸附法的缺点：酶和载体的结合力不强，易脱落， 会导致催化活力的丧失和沾污反应产物。
三、
共价偶联法的优点：得到的固定化酶结合牢固，稳定性好，利于连续使用。
共价偶联法的缺点：载体活化的操作复杂，反应条件激烈，同时共价结合会影响到酶的空间构象，从而对酶的催化活性产生影响。
四、
非共价结合法的优点：载体是酶蛋白本身，结合力强，能提高非常高的酶浓度
非共价结合法的优点：难制备，不能再生，固定化费用高。解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题简述固定化原生质体的制备方法与特点。正确答案： 固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的原生质体称为固定化原生质体。
（1）固定化原生质体的制备包括原生质体的制备和原生质体固定化两个阶段。
①原生质体的制备：一般来说，原生质体的制备过程是首先将对数生长期的细胞收集起来，悬浮在含有渗透压稳定剂的高渗缓冲液中；然后加入适宜的细胞壁水解酶，在一定的条件下作用一段时间，使细胞壁破坏；分离除去细胞壁碎片、未破坏的细胞以及细胞壁水解酶，而得到球状原生质体。
②原生质体固定化：原生质体固定化：原生质体制备好后，把离心收集到的原生质体重新悬浮在含有渗透压稳定剂的缓冲液中，配成一定浓度的原生质体悬浮液，然后采用凝胶包埋法制成固定化原生质体。
（2）、固定化原生质体具有下列显著特点：
①由于没有细胞壁，细胞结构不完整，失去增殖能力，但是由于细胞膜内的结构完整，保持了细胞原有的新陈代谢特性。
②固定化原生质体由于解除了细胞壁这一扩散屏障，可增加细胞膜的通透性，有利于氧气和营养物质的传递和吸收，也有利于胞内物质的分泌，可显著提高产率。
③固定化原生质体由于有载体的保护作用，具有较好的操作稳定性和保存稳定性，可反复使用和连续使用较长时间，利于连续化生产，在4˚C保存较长时间后仍能保持其生产能力。
④固定化原生质体易于何发酵产物分开，有利于产物的分离纯化，提高产品质量。
⑤固定化原生质体发酵的培养基中需要添加渗透压稳定剂，以保存原生质体的稳定性。这些渗透压稳定剂在发酵结束后，可用层析或膜分离技术等方法与产物分离。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题简述酶和细胞的固定化方法有哪些？各有哪些特点？正确答案： （1）载体结合法：是将酶结合于不溶性载体上的一种固定化方法。可分为物理吸附法，离子结合法，共价结合法。
物理吸附法：优点在于操作简单，可选用不同的吸附剂，酶失活后载体仍可再生。缺点在于最适吸附酶量无规律可循，酶与载体之间的吸附剂不强，酶易于脱落。
离子结合法：操作简单，处理条件温和，酶的活性中心不易被破坏。但是酶和载体的结合力比较弱，会发生酶脱落的现象。
共价结合法：酶和载体的结合力牢固，不会发生酶脱落。但反应条件苛刻，操作复杂，酶的活性中心会遭到部分破坏。
（2）交联法：优点是交联后的酶活性较高，缺点是反应条件剧烈，酶的回收率低。
（3）包埋法：不需要改变酶的高级结构，酶的回收率较高。但包埋酶会导致酶的失活，包埋法只适合作用于小分子底物和产物的酶，对于那些作用于大分子底物和产物的酶是不合适的。解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题简述固定化酶特点.正确答案： 1、不溶于水：反应完成后，经过滤或离心等简单分离，就可以回收，以重复使用，降低酶制剂成本。2、具有一定的机械强度：可将其装成酶柱，当底物溶液缓缓流经酶柱时，就能发生酶促反应，流出液中，即含有酶促反应产物，其产物不易带杂质，收率高，易精制。3、稳定性提高：一根酶柱往往可以连续使用数十次，而酶活力并无明显下降。解析： 暂无解析 -
第24题：
问答题固定化酶和固定化细胞在实际应用中的显著特点是什么？正确答案： （1）容易实现连续反应。
（2）获得的产物纯度高。
（3）酶或细胞可重复使用，减少了浪费。解析： 暂无解析