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  • 第1题:

    基因工程药物多为胞内产物,分离提取时需破碎细胞。化学破碎法是常用的方法,但()不是化学破碎细胞的方法。

    • A、渗透冲击
    • B、增溶法
    • C、脂溶法
    • D、酶溶法

    正确答案:D

  • 第2题:

    细胞破碎常用的破碎方法有哪些?


    正确答案: 机械法:珠磨法(固体剪切作用)、高压匀浆法(液体剪切作用)、超声破碎法(液体剪切作用)、X-press法(固体剪切作用)。
    非机械法:酶溶法(酶分解作用)、化学渗透法(改变细胞膜的渗透性)、渗透压法(渗透压剧烈改变)、冻结融化法(反复冻结-融化)、干燥法(改变细胞膜渗透性)

  • 第3题:

    常用细胞破碎方法有_____________、______________、______________、____________、__________________。


    正确答案:反复冻融法;超声波碎法;自溶法;酶处理法;表面活性剂处理法

  • 第4题:

    细胞破碎率测定方法主要有()、()和()三种。


    正确答案:直接测定法;目的产物测定法;导电测定法

  • 第5题:

    常用的细胞破碎方法有哪些?


    正确答案: ⑴直接测定法:适当稀释,血球计数板计数;
    ⑵目标产物测定法
    ⑶测定导电率

  • 第6题:

    细胞破碎的方法及其原理是什么?选用原则是什么?


    正确答案: (一)机械法
    特点:处理量大、破碎效率高、速度快、工业上常用手段。
    原理:挤压、剪切
    (二)非机械法
    化学法;酶解法;物理法。
    细胞破碎的一般原则:若提取的产物在细胞质内,需用机械破碎法;若在细胞膜附近则可用较温和的非机械法;若提取的产物与细胞膜或壁相结合时,可采用机械法与化学法相结合的方法,以促进产物溶解度的提高或缓和操作条件,但保持产物的释放率不变。

  • 第7题:

    细胞破碎的方法有哪些?原理是什么?


    正确答案:细胞破碎按照处理方法一般分为机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶促破碎法等。
    ①机械破碎法:通过机械运动产生压缩力和剪切力,将组织细胞打碎,具有处理量大、破碎效率高、速度快等优点。细胞的机械破碎主要有捣碎法、研磨法和匀浆法等。
    ②物理破碎法:利用温度、压力、声波等物理因素,使细胞破碎的方法,多用于微生物细胞的破碎。常用的破碎方法有温度差法、压差法和超声波法等。
    ③化学破碎法:利用各种化学试剂作用于细胞膜,从而使细胞破碎的方法。常用的化学试剂有甲苯、丙醇、丁醇、氯仿等有机溶剂,曲拉通和吐温等表面活性剂。
    ④酶促破碎法:根据细胞壁结构特点,选用适当的酶、破坏细胞壁,并在低渗透压的溶液中使细胞破裂的方法称为酶促破碎法。其中在一定条件下,利用细胞自身酶系的催化作用使细胞破碎的方法称为自溶法,自溶法的作用效果受温度、PH、离子强度等因素的制约。必要时需加入适量的甲苯、氯仿等防腐剂,以防止其他微生物在自溶体系中的生长。

  • 第8题:

    细胞破碎的主要方法有机械破碎法、物理破碎法、()、()。


    正确答案:化学破碎法;酶促破碎法

  • 第9题:

    问答题
    常用的细胞破碎方法有哪些?

    正确答案: ⑴直接测定法:适当稀释,血球计数板计数;
    ⑵目标产物测定法
    ⑶测定导电率
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    问答题
    常用的化学细胞破碎方法有哪些?

    正确答案: 常用的化学细胞破碎方法有渗透压冲击,增溶法,脂溶法,酶消化法,碱处理法。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    问答题
    比较一下常用的细胞破碎方法。

    正确答案: 细胞破碎方法:
    机械类:珠磨法、高压匀浆法、超声波法等;
    非机械类:酶溶法、化学渗透法等。
    (1)珠磨法
    优点:操作简便、稳定,可连续生产,破碎率高;
    缺点:温度升高多,热敏成分易失活,细胞碎片较小,后续操作难度增加。
    (2)高压匀浆法
    该法和酶溶法结合效果更好。
    特点:操作简便,连续操作;细胞破碎率不如珠磨法,不适于丝状真菌和含包涵体的基因工程菌。
    (3)超声破碎法
    超声波形成的空穴产生压力对M细胞产生冲击。常用10~200kHz的超声波。
    特点:超声破碎机操作简便,可连续操作,但会使悬浮液温度升高,不适于热敏生物活性物质。
    (4)酶溶法
    加溶菌酶:菌悬液中加胞壁水解酶,如溶菌酶、葡聚糖酶、蛋白酶、甘露糖酶、壳聚糖酶等,溶解胞壁不分解目的Pr。根据M种类和目的产物性质选择酶。该法成本高,应用受限。
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    填空题
    常用细胞破碎方法有_____________、______________、______________、____________、__________________。

    正确答案: 反复冻融法,超声波碎法,自溶法,酶处理法,表面活性剂处理法
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    酶类药物的提取过程中,需要对生物组织和细胞进行破碎,常用的破碎方法包括:()、()、()。


    正确答案:磨切法;压力法;反复冻融法

  • 第14题:

    细胞破碎的方法有()、()和()。


    正确答案:机械法;物理法;生物化学法

  • 第15题:

    简述常用的细胞破碎方法


    正确答案: 直接测定法:适当稀释,血球计数板计数;
    目标产物测定法;
    测定导电率。

  • 第16题:

    论述细胞壁破碎常用的五种方法。


    正确答案: 细胞壁破碎常用的五种方法有珠磨法、高压匀浆法、超声波法、酶溶法和化学渗透法。
    (1)珠磨法:利用进入珠磨机的细胞悬浮液与极细的研磨剂一起快速搅拌或研磨,研磨剂、珠子与细胞之间的互相剪切、碰撞,使细胞破碎释放出内含物。
    优点:珠磨机连续操作时兼具破碎和冷却双重功能,减少了产物失活的可能性,在适当条件下一次操作即可达到较高的破碎率,适合于各种微生物细胞的破碎。
    缺点:操作参数多,一般凭经验估计,在大规模操作中,夹套冷却控温难度大。
    (2)高压匀浆法:利用高压使细胞悬浮液通过针形阀,由于突然减压和高速冲击撞击环使细胞破裂。
    优点:操作参数少,适合于大规模操作,
    缺点:不适合于丝状真菌及含有包涵体的基因工程菌。破碎率较低,往往需循环2-4次才能达到较高的破碎率,容易引起产物的失活的可能性,需配备换热器进行级间冷却。
    (3)超声破碎法:通常采用的超声破碎机在15—25kHz的频率下操作。
    优点:操作简便,液量损失少,适合实验室规模。
    缺点:易引起温度的剧烈上升,在大规模操作中,声能传递和散热困难,产生的化学自由基团能使某些敏感性活性物质失活。
    (4)酶溶法:利用酶反应,分解破坏细胞壁上的特殊键,从而达到破壁的目的。
    优点:选择性释放产物,条件温和,核酸泄漏量少,细胞外形完整。
    不足:价格高,限制了大规模应用,通用性差,不同菌种需选择不同的酶,不易确定最佳的溶解条件;产物抑制的存在。
    (5)化学渗透法:某些化学试剂如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、变性剂等通过改变细胞壁或膜的通透性(渗透性),从而使胞内物质有选择地渗透出来。化学渗透法取决于化学试剂的类型以及细胞壁的结构与组成。
    优点:
    (1)对产物释放具有一定选择性。
    (2)细胞外形保持完整,碎片少,浆液粘度低,易于固液分离和进一步提取。
    缺点:
    (1)通用性差,某种试剂只能作用于某些特定类型的细胞。
    (2)时间长,效率低,一般胞内物质释放率不超过50%。
    (3)有些化学试剂有毒性,在其后的产物提取精制过程中需设法分离除去。

  • 第17题:

    细胞破碎的方法有哪些?工业中常用的是哪一种?


    正确答案:(1)机械破碎(高压均浆,珠磨,超声波破碎);
    (2)化学和生物化学法;
    ①酸碱处理
    ②化学试剂处理:增大细胞壁通透性,表面活性剂、螯合剂、有机溶剂、变性剂
    ③酶溶:利用溶解细胞壁的酶处理细胞,不同的细胞用不同的酶:如溶菌酶适用于细菌;而酵母细胞的酶溶需用酵母裂解酶Zymolyase、β-1,6-葡聚糖酶或甘露糖酶;破坏植物细胞则用纤维素酶)。
    工业上采用机械破碎法。

  • 第18题:

    常用的化学细胞破碎方法有哪些?


    正确答案:常用的化学细胞破碎方法有渗透压冲击,增溶法,脂溶法,酶消化法,碱处理法。

  • 第19题:

    细胞破碎常用的两种方法为()、()


    正确答案:高压匀浆法;研磨法

  • 第20题:

    问答题
    细胞破碎的原因是什么?常用的细胞破碎的方法有哪三种?

    正确答案: 原因:目标产物存在于细胞内。方法有1、珠磨法2、高压匀浆法3、超声破碎法
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    问答题
    常用于细胞破碎方法可分为哪些类型?简述细胞破碎的目的意义。

    正确答案: 细胞的破碎方法可分为:机械法,包括
    (1)捣碎法
    (2)研磨法
    (3)匀浆法
    物理法,包括
    (1)反复冻融法
    (2)超声波处理法
    (3)压榨法
    化学与生物化学方法,包括
    (1)酶解法
    (2)化学法
    目的意义:除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶之外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体不同部位的组织,其组织破碎的难易不一,使用的方法也不相同。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    问答题
    细胞破碎的方法有哪些?原理是什么?

    正确答案: 细胞破碎按照处理方法一般分为机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶促破碎法等。
    ①机械破碎法:通过机械运动产生压缩力和剪切力,将组织细胞打碎,具有处理量大、破碎效率高、速度快等优点。细胞的机械破碎主要有捣碎法、研磨法和匀浆法等。
    ②物理破碎法:利用温度、压力、声波等物理因素,使细胞破碎的方法,多用于微生物细胞的破碎。常用的破碎方法有温度差法、压差法和超声波法等。
    ③化学破碎法:利用各种化学试剂作用于细胞膜,从而使细胞破碎的方法。常用的化学试剂有甲苯、丙醇、丁醇、氯仿等有机溶剂,曲拉通和吐温等表面活性剂。
    ④酶促破碎法:根据细胞壁结构特点,选用适当的酶、破坏细胞壁,并在低渗透压的溶液中使细胞破裂的方法称为酶促破碎法。其中在一定条件下,利用细胞自身酶系的催化作用使细胞破碎的方法称为自溶法,自溶法的作用效果受温度、PH、离子强度等因素的制约。必要时需加入适量的甲苯、氯仿等防腐剂,以防止其他微生物在自溶体系中的生长。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    细胞破碎常用的破碎方法有哪些?

    正确答案: 机械法:珠磨法(固体剪切作用)、高压匀浆法(液体剪切作用)、超声破碎法(液体剪切作用)、X-press法(固体剪切作用)。
    非机械法:酶溶法(酶分解作用)、化学渗透法(改变细胞膜的渗透性)、渗透压法(渗透压剧烈改变)、冻结融化法(反复冻结-融化)、干燥法(改变细胞膜渗透性)
    解析: 暂无解析