为了提高基因工程菌的质粒稳定性，可采用哪些主要方法？

题目

为了提高基因工程菌的质粒稳定性，可采用哪些主要方法？

相似考题

1.为了减轻工程菌代谢负荷,提高外源基因表达水平可采取什么措施?

2.为了提高基因工程菌的质粒稳定性,可采用那些主要方法?

3.基因工程菌的构建包括（）、（）、（）三个主要环节。

4.基因工程菌的培养方式主要有();();();()和();

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  • 第1题：

    什么是基因工程菌，工程菌构建的基本过程和各阶段的主要任务是什么，所涉及基因工程原理是什么？ 


    正确答案: 将目的基因导入细菌体内使其表达，产生所需要的蛋白的细菌称为基因工程菌。
    工程菌构建的基本过程如下：目标基因克隆（PCR、文库筛选、化学合成）→表达载体构建（酶切、链接）→遗传转化与筛选（外源基因导入与培养）→工程菌（获得新形状、功能、产生物质）
    酶切：在特异位点上催化双链DNA分子的断裂，产生相应的限制性片段。（DNA+缓冲液+限制性内切酶；37℃，1小时；加热、加EDTA终止；电泳检查酶切完整性）
    链接：DNA双链上相邻的3’羟基和5’磷酸基团共价结合形成3’-5’磷酸二酯键，使原来断开的DNA缺口重新连接起来。（载体片段和基因片段，缓冲液，连接酶；16-26℃，数小时；70℃加热10min终止反应）
    转化：把外源基因导入宿主细胞的过程。（氯化钙法向大肠杆菌导入外源基因）

  • 第2题：

    基因工程菌在传代过程中经常出现质粒不稳定性的现象，质粒不稳定分为（）和（）；基因工程菌的不稳定性至少维持（）代以上。


    正确答案:分裂不稳定性；结构不稳定性；25

  • 第3题：

    简述质粒不稳定的原因及提高稳定性的方法.


    正确答案: 其主要与两个因素有关：
    一是含质粒菌产生不含质粒子代菌的频率；
    二是这两种菌的比生长速率差异的大小。提高质粒稳定性的方法：工程菌的培养一般采用分成两阶段培养法来提高质粒的稳定性。在培养的第一阶段以增加菌体的生长达到一定密度为目的，外源基因不表达，从而使工程菌与质粒丢失菌的比生长速率的差异减小，增加了质粒的稳定性；第二阶段再诱导外源基因的表达。可以在培养基中加入选择性压力如抗生素等，以抑制质粒丢失菌的生长。控制适当的培养条件也能使工程菌具有优势的比生长速率，可调控的培养条件有温度、PH、培养基组分和溶解氧等。

  • 第4题：

    为了提高基因工程菌的质粒稳定性，可采用哪些主要方法？


    正确答案:为了提高基因工程菌的质粒稳定性，可采取：
    （1）选择合适的宿主菌；
    （2）选择合适的载体；
    （3）选择压力；
    （4）分阶段控制培养；
    （5）控制培养条件；
    （6）固定化技术。

  • 第5题：

    简述提高质粒稳定性的方法。


    正确答案:两阶段培养法：一增加菌体、二诱导外源基因表达
    适当培养条件：温度、pH、培养基组分和溶解氧等

  • 第6题：

    基因工程菌的不稳定性表现在哪些方面？


    正确答案: ①质粒复制的不稳定；
    ②质料分配的不稳定；
    ③质粒结构的不稳定；
    ④培养环境条件引起的质粒不稳定。

  • 第7题：

    什么是基因工程菌？基因工程菌应具备哪些条件？


    正确答案: 基因工程菌主要是指以微生物为操作对象，通过基因工程技术获得的表达外源基因或过量表达或抑制表达自身基因的工程生物，包括细菌、放线菌等原核细胞微生物和酵母、丝状真菌等真核细胞微生物。有时也把基因工程茵称为重组菌。
    条件：发酵产物是高浓度高转化率高产率的，同时是分泌型菌株；菌株能利用常用的碳源，并可以进行连续发酵；菌株不是致病株，也不产内毒素；代谢控制容易；能进行适当的DNA重组，并且稳定，重组的DNA不易脱落。基因工程菌主要是指以微生物为操作对象，通过基因工程技术获得的表达外源基因或过量表达或抑制表达自身基因的工程生物，包括细菌、放线菌等原核细胞微生物和酵母、丝状真菌等真核细胞微生物。有时也把基因工程茵称为重组菌。
    条件：发酵产物是高浓度高转化率高产率的，同时是分泌型菌株；菌株能利用常用的碳源，并可以进行连续发酵；菌株不是致病株，也不产内毒素；代谢控制容易；能进行适当的DNA重组，并且稳定，重组的DNA不易脱落。

  • 第8题：

    质粒不稳定常见的是分裂不稳定，试述提高质粒稳定性的方法。


    正确答案: 1、选择适当宿主，如重组质粒在大肠杆菌中比较稳定。
    2、培养基加入选择性压力如抗生素，抑制质粒丢失菌的生长。
    3、采用两阶段培养法。在培养的第一阶段以增加菌体的生长达到一定密度为目的，外源基因不表达，从而使工程菌与质粒丢失菌的比生长速率的差别减小，增加了质粒的稳定性；第二阶段再诱导外源基因的表达。
    4、控制培养条件如温度、培养基组分等，使工程菌体现出有优势的比生长速率。间歇供氧和改变稀释速率可以提高质粒的稳定性。
    5、在质粒构建时插入一段能改良宿主细胞生长速率的特殊DNA片段，能起到稳定质粒的效果。
    6、剔除质粒上不需要的DNA部分，选取不含可转移因子的质粒。
    7、固定化重组菌以提高工程菌的稳定性。

  • 第9题：

    何谓质粒？有哪些特点？主要质粒有哪几类？质粒在基因工程中应用有何优点？


    正确答案: （1）质粒是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子。
    （2）质粒的特点：自主复制性；不相容性；可转移性；携带特殊的遗传标记。
    （3）质粒的类型：致育因子；抗性因子；Col质粒；毒性质粒；代谢质粒；隐秘质粒
    （4）质粒在基因工程中应用的优点：含有复制起点；能在宿主细胞中保持稳定并自我复制；含有多种限制酶单一识别位点；含有标记基因；高拷贝，每个细胞含有10-200个拷贝的松弛型质粒；具有较小的相对分子质量易于操作；可通过电穿孔法导入宿主细胞。

  • 第10题：

    问答题
    质粒不稳定常见的是分裂不稳定，试述提高质粒稳定性的方法。

    正确答案： 1、选择适当宿主，如重组质粒在大肠杆菌中比较稳定。
    2、培养基加入选择性压力如抗生素，抑制质粒丢失菌的生长。
    3、采用两阶段培养法。在培养的第一阶段以增加菌体的生长达到一定密度为目的，外源基因不表达，从而使工程菌与质粒丢失菌的比生长速率的差别减小，增加了质粒的稳定性；第二阶段再诱导外源基因的表达。
    4、控制培养条件如温度、培养基组分等，使工程菌体现出有优势的比生长速率。间歇供氧和改变稀释速率可以提高质粒的稳定性。
    5、在质粒构建时插入一段能改良宿主细胞生长速率的特殊DNA片段，能起到稳定质粒的效果。
    6、剔除质粒上不需要的DNA部分，选取不含可转移因子的质粒。
    7、固定化重组菌以提高工程菌的稳定性。
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    为了提高梁的整体稳定性，设计时可采用哪些措施？

    正确答案： ①增大梁的截面尺寸，其中增大受压翼缘的宽度最有效；②增加侧向支承数量，减小侧向支承点间的距离，侧向支承应设置在梁受压翼缘处；③当梁跨内无法增设侧向支承时，宜采用闭合箱形截面；④增强梁端约束，采取措施使梁端不能发生扭转。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    什么是基因工程菌，工程菌构建的基本过程和各阶段的主要任务是什么，所涉及基因工程原理是什么？

    正确答案： 将目的基因导入细菌体内使其表达，产生所需要的蛋白的细菌称为基因工程菌。
    工程菌构建的基本过程如下：目标基因克隆（PCR、文库筛选、化学合成）→表达载体构建（酶切、链接）→遗传转化与筛选（外源基因导入与培养）→工程菌（获得新形状、功能、产生物质）
    酶切：在特异位点上催化双链DNA分子的断裂，产生相应的限制性片段。（DNA+缓冲液+限制性内切酶；37℃，1小时；加热、加EDTA终止；电泳检查酶切完整性）
    链接：DNA双链上相邻的3’羟基和5’磷酸基团共价结合形成3’-5’磷酸二酯键，使原来断开的DNA缺口重新连接起来。（载体片段和基因片段，缓冲液，连接酶；16-26℃，数小时；70℃加热10min终止反应）
    转化：把外源基因导入宿主细胞的过程。（氯化钙法向大肠杆菌导入外源基因）
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有（）

    • A、将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。
    • B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达。
    • C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的复制。
    • D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制

    正确答案:A,C

  • 第14题：

    基因工程菌的稳定性至少要维持在（）以上。

    • A、20
    • B、25
    • C、30
    • D、40

    正确答案:B

  • 第15题：

    影响基因工程菌培养工艺的主要因素有哪些？


    正确答案:主要因素有：
    （1）培养基的影响；
    （2）接种量的影响；
    （3）温度的影响；
    （4）溶解氧的影响；
    （5）诱导时机的影响；
    （6）诱导表达程序的影响；
    （7）PH的影响。

  • 第16题：

    基因工程菌中重组质粒的丢失机制是（）

    • A、重组质粒渗透至细胞外
    • B、重组质粒被细胞内核酸酶降解
    • C、重组质粒在细胞分裂时不均匀分配
    • D、重组质粒杀死受体细胞
    • E、重组质粒刺激受体细胞提高其通透性

    正确答案:C

  • 第17题：

    基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于（）

    • A、外源基因插入质粒
    • B、宿主菌的生物繁殖
    • C、质粒的转化
    • D、带有目的基因的宿主菌的筛选
    • E、目的基因的表达

    正确答案:D

  • 第18题：

    基因工程菌脱落性不稳定在反应器中的表现为（）

    • A、反应器中相当于两种菌的生长
    • B、丢失质粒菌与工程菌比例不变
    • C、产量减低
    • D、质量不受影响
    • E、丢失质粒菌与工程菌比例逐渐增大

    正确答案:A,C,E

  • 第19题：

    在基因工程菌发酵培养过程假设带有基因工程DNA质粒最大比生长速率为μmax+丢失质粒的细胞最大比生长速率为max-。（）

    • A、μmax+>max-
    • B、μmax+>>max-
    • C、μmax+=max-
    • D、μmax+<max-

    正确答案:D

  • 第20题：

    何谓基因工程？阐述基因工程的基本操作过程。在一利用pBR322质粒和BamHⅠ构建“工程菌”的实验中，如何筛选含有目的基因的宿主细菌？


    正确答案: 基因工程是指人们利用分子生物学的理论和技术，自觉设计操纵改造和重建细胞的遗传核心——基因组，从而使生物体的遗传性状发生定向变异，以最大限度地满足人类活动的需要。基因工程的基本操作包括目的基因的取得，载体系统的选择，目的基因与载体重组体的构建，重组载体导入受体细胞，工程菌株的表达和检测等。
    大肠杆菌的pBR322质粒上有两个抗药性标记，即氨苄青霉素抗性和四环素抗性标记，限制酶BamHⅠ在该质粒上的插入点在四环素抗性基因上，当外源DNA片段插入后会引起四环素抗性基因失活。制备四环素平板、氨苄青霉素平板，将已转化的宿主细胞涂布，若在四环素平板上不能生长，在氨苄青霉素平板上能生长，则证明该菌已含有目的基因；若在两种平板上都能生长，则该菌不含目的基因。

  • 第21题：

    多选题
    基因工程菌脱落性不稳定在反应器中的表现为（）
    A

    反应器中相当于两种菌的生长

    B

    丢失质粒菌与工程菌比例不变

    C

    产量减低

    D

    质量不受影响

    E

    丢失质粒菌与工程菌比例逐渐增大


    正确答案： A,E
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    什么是基因工程菌？基因工程菌应具备哪些条件？

    正确答案： 基因工程菌主要是指以微生物为操作对象，通过基因工程技术获得的表达外源基因或过量表达或抑制表达自身基因的工程生物，包括细菌、放线菌等原核细胞微生物和酵母、丝状真菌等真核细胞微生物。有时也把基因工程茵称为重组菌。
    条件：发酵产物是高浓度高转化率高产率的，同时是分泌型菌株；菌株能利用常用的碳源，并可以进行连续发酵；菌株不是致病株，也不产内毒素；代谢控制容易；能进行适当的DNA重组，并且稳定，重组的DNA不易脱落。基因工程菌主要是指以微生物为操作对象，通过基因工程技术获得的表达外源基因或过量表达或抑制表达自身基因的工程生物，包括细菌、放线菌等原核细胞微生物和酵母、丝状真菌等真核细胞微生物。有时也把基因工程茵称为重组菌。
    条件：发酵产物是高浓度高转化率高产率的，同时是分泌型菌株；菌株能利用常用的碳源，并可以进行连续发酵；菌株不是致病株，也不产内毒素；代谢控制容易；能进行适当的DNA重组，并且稳定，重组的DNA不易脱落。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    基因工程菌的不稳定性表现在哪些方面？

    正确答案： ①质粒复制的不稳定；
    ②质料分配的不稳定；
    ③质粒结构的不稳定；
    ④培养环境条件引起的质粒不稳定。
    解析： 暂无解析

  • 第24题：

    单选题
    在基因工程菌发酵培养过程假设带有基因工程DNA质粒最大比生长速率为μmax+丢失质粒的细胞最大比生长速率为max-。（）
    A

    μmax+>max-

    B

    μmax+>>max-

    C

    μmax+=max-

    D

    μmax+<max-


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

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