煮沸法从表达内切核酸酶A的大肠杆菌菌袜中小量制备质粒时不应省掉的步骤是（）。A、溶菌酶处理B、EDTA处理C、酚-氯仿抽提D、RNA酶消化E、蛋白酶K处理

题目

煮沸法从表达内切核酸酶A的大肠杆菌菌袜中小量制备质粒时不应省掉的步骤是（）。

  • A、溶菌酶处理
  • B、EDTA处理
  • C、酚-氯仿抽提
  • D、RNA酶消化
  • E、蛋白酶K处理
相似考题

1.有关煮沸裂解法提取质粒DNA的叙述中，正确的是 ( )A、该法是一种条件比较剧烈的方法B、煮沸不能完全灭活核酸内酶AC、适用于大多数E.coli菌株D、不适用于表达endA的菌株E、只能用于小质粒DNA(＜15kb)的小量制备

2.常用于从转化菌中筛选DNA重组体的方法不包括A、α互补筛选B、插入失活筛选C、杂交筛选D、质粒的小量快速提取E、DNA序列测定筛选

3.常采用质粒DNA小量提取的方法是 ( )A、碱裂解法B、SDS裂解法C、煮沸裂解法D、酚抽提法E、牙签少量制备法

4.煮沸法从表达内切核酸酶A的大肠杆菌菌株中小量制备质粒时不应省掉的步骤是A、溶菌酶处理B、EDTA处理C、酚-氯仿抽提D、RNA酶消化E、蛋白酶K处理

更多“煮沸法从表达内切核酸酶A的大肠杆菌菌袜中小量制备质粒时不应省掉的”相关问题

  • 第1题：

    研究人员想将生长激素基因通过质粒介导入大肠杆菌细胞内,以表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因:A是抗链霉素基因,B是抗氨苄青霉素基因,且目的基因不插入到基因A、B大肠杆菌不带任何抗性基因,则筛选获得“工程菌”的培养基中的抗抗生素首先应该()

    A、仅有氨苄青霉素

    B、同时有链霉素和氨苄青霉素

    C、无链霉素和氨苄青霉素

    D、仅有链霉素


    参考答案：B

  • 第2题：

    煮沸法从表达内切核酸酶A的大肠杆菌菌株中小量制备质粒时不应省掉的步骤是

    A.溶菌酶处理
    B.EDTA处理
    C.酚-氯仿抽提
    D.RNA酶消化
    E.蛋白酶K处理

    答案：C
    解析：
    酚-氯仿抽提是去蛋白的一步，蛋白去除不完全会很大程度影响质粒提取的质量和产量。

  • 第3题：

    人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是（）

    • A、大肠杆菌
    • B、酵母菌
    • C、T4噬菌体
    • D、质粒DNA

    正确答案:B

  • 第4题：

    受体菌捕获和表达质粒载体DNA分子的生命过程称为（）

    • A、转染
    • B、转化
    • C、转导
    • D、转换

    正确答案:B

  • 第5题：

    下列有关基因表达的叙述中，正确的是（）

    • A、哺乳动物红细胞中的基因不能表达
    • B、大肠杆菌质粒基因表达与核糖体无关
    • C、人的囊性纤维病是异常基因表达的结果
    • D、洋葱根尖细胞基因表达场所包括线粒体、叶绿体

    正确答案:C

  • 第6题：

    利用转基因大肠杆菌可合成人体的蛋白质。下列叙述不正确的是（）

    • A、常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
    • B、DNA连接酶和DNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
    • C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
    • D、导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达

    正确答案:B

  • 第7题：

    为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有（）

    • A、将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。
    • B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达。
    • C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的复制。
    • D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制

    正确答案:A,C

  • 第8题：

    基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于（）

    • A、外源基因插入质粒
    • B、宿主菌的生物繁殖
    • C、质粒的转化
    • D、带有目的基因的宿主菌的筛选
    • E、目的基因的表达

    正确答案:D

  • 第9题：

    多选题
    有关煮沸裂解法提取质粒DNA的叙述中，正确的是（　）
    A

    该法是一种条件比较剧烈的方法

    B

    煮沸不能完全灭活核酸内酶A

    C

    适用于大多数E.coli菌株

    D

    不适用于表达endA的菌株

    E

    只能用于小质粒DNA(＜15kb)的小量制备


    正确答案： A,B
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    常采用质粒DNA小量提取的方法是（）
    A

    碱裂解法

    B

    SDS裂解法

    C

    煮沸裂解法

    D

    酚抽提法

    E

    牙签少量制备法


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    转染是指受体菌捕获和表达（）DNA分子的过程。
    A

    质粒

    B

    噬菌体

    C

    大肠杆菌

    D

    以上都是


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    编码大肠杆菌素的是
    A

    Col质粒

    B

    Vi质粒

    C

    R质粒

    D

    ST质粒

    E

    F质粒


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于

    A.外源基因插入质粒
    B.宿主菌的生物繁殖
    C.质粒的转化
    D.带有目的基因的宿主菌的筛选
    E.目的基因的表达

    答案：D
    解析：
    转化后，只有含有抗生素抗性基因的转化细胞才能够在含有相应抗生素的琼脂平皿上生长并形成菌落。如果在构建重组DNA时将外源基因插入抗性基因内，标志基因将失活，可通过有或无抗生素培养基的对比培养进行鉴定并将含有重组体的转化菌筛选出来，故选D。

  • 第14题：

    下列有关基因表达的叙述中，正确的是（　）。

    A.哺乳动物红细胞中的基因不能表达
    B.大肠杆菌质粒基因表达与核糖体无关
    C.菠菜根尖细胞基因表达场所包括线粒、叶绿体
    D.人甲状腺细胞生长激素基因处于关闭状态

    答案：D
    解析：
    A项，哺乳动物未成熟的红细胞中的基因可以表达一些蛋白质，如血红蛋白，因为有细胞核和核糖体等，而哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，无细胞器，则基因不能表达，故错误； B项，因为翻译发生的场所是在核糖体，所以大肠杆菌质粒基因表达与核糖体有关，故错误；
    C项，菠菜根尖细胞中无叶绿体，故错误；
    D项，人的生长激素基因只在垂体细胞内表达，而甲状腺细胞内的生长激素基因不能表达，即处于关闭状态，故正确。

  • 第15题：

    基因工程的“四步曲”中未发生碱基互补配对的是（）

    • A、用PCR扩增抗病毒基因
    • B、将人的胰岛素基因与大肠杆菌质粒结合，形成重组质粒
    • C、将重组质粒导入受体细胞
    • D、抗病毒基因的表达

    正确答案:C

  • 第16题：

    目前使用较为广泛的质粒DNA小量提取的方法是（）

    • A、牙签少量制备法
    • B、小量一步提取法
    • C、SDS裂解法
    • D、碱裂解法
    • E、煮沸裂解法

    正确答案:D

  • 第17题：

    用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述错误的是（）

    • A、常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
    • B、载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
    • C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
    • D、导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达

    正确答案:B

  • 第18题：

    转染是指受体菌捕获和表达（）DNA分子的过程。

    • A、质粒
    • B、噬菌体
    • C、大肠杆菌
    • D、以上都是

    正确答案:B

  • 第19题：

    小量制备质粒DNA，用质粒中特定的酶切发现切割不动，试分析可能原因及克服方法？


    正确答案: 最可能的原因：从细菌沉淀或从核酸沉淀中吸上清时注意不够，带了杂蛋白。其最根本的原因是因为细菌的细胞壁成分或核内某些蛋白质可能抑制限制酶活性。克服方法：用酚氯仿对溶液抽提；用离心柱层析法纯化DNA。

  • 第20题：

    单选题
    基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于（）
    A

    外源基因插入质粒

    B

    宿主菌的生物繁殖

    C

    质粒的转化

    D

    带有目的基因的宿主菌的筛选

    E

    目的基因的表达


    正确答案： D
    解析： 转化后，只有含有抗生素抗性基因的转化细胞才能够在含有相应抗生素的琼脂平皿上生长并形成菌落。如果在构建重组DNA时将外源基因插入抗性基因内，标志基因将失活，可通过有或无抗生素培养基的对比培养进行鉴定并将含有重组体的转化菌筛选出来，故选D。

  • 第21题：

    问答题
    如何以大肠杆菌质粒 DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因，并使之在大肠杆菌中进行表达？简要说明实验中可能遇到的问题及可能的解决办法。

    正确答案： 要使动物中编码激素的基因在大肠杆菌中表达，通常遇到的问题有：
    （1）细菌的 RNA聚合酶不能识别真核生物的启动子。
    （2）大多数真核基因有内含子，这些内含子在转录后从前体 mRNA 中被切除而形成熟 mRNA。细菌细胞没有这样的机制来去除内含子。
    （3）有些真核生物的蛋白质是通过前体分子加工而来的，例如胰岛素就是通过加工去除前体分子内部的 33个氨基酸残基而来，剩下的两段肽链分别形成胰岛素的α、β链。
    （4）产生的真核生物的蛋白质产物可以被细菌的蛋白酶所识别和降解。针对上述可能出现的问题，建议在克隆的过程中采取以下措施：
    ①应将激素的编码序列置于含有核糖体结合位点和起始密码子 ATG的细菌强启动子的附近（含有这种序列的载体称表达载体）。
    ②可以以激素的 mRNA为模板用反转录酶合成激素的基因。
    这种 DNA不含内含子可插入到载体中进行克隆。此外，如果蛋白质序列短则可通过化学合成得到该基因。合成的基因应含起始密码 ATG、通过该激素蛋白的氨基酸序列推测而来的编码序列，以及 1～2 个终止密码：
    A.TG———————编码序列——————TGA TAG
    现在，这个合成基因可被插入载体中。
    ③有时加工过程可以在离体条件下进行。如果加工有困难，可以用合成基因，从而免除加工过程。
    ④选用合适的突变型宿主从而防止蛋白酶水解。如果用酵母作为宿主上述许多问题都可以较容易地解决，尤其是现在有既能在大肠杆菌中又能在酵母中复制的穿梭质粒载体。
    说明：
    1）ATG，TAG和TGA是对应mRNA中的转录起始信号AUG和终止信号UAG，UGA 的DNA序列。
    2）克隆生长素释放抑制因子基因时采用化学合成基因的方法。生长素释放抑制因子是一种由下丘脑分泌的激素，长14个氨基酸残基，因此人工合成的基因，包括在宿主菌中表达所需的转录的起始和终止信号，仅51bp长。
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    说明变性定位法和限制性内切核酸酶定位法研究质粒复制起点的原理。

    正确答案： 变性定位法(denaturation mapping)是根据环状双链DNA基因组中某些特异性区段比该分子上其他区段对热、碱、酶等变性因子有较高的敏感性，而采用热、碱、酶等变性因子使环状DNA进行变性，结合电子显微镜技术，比较不同复制时间的复制区同变性部位的距离变化，以确定环状双链DNA复制起点和方向的方法。用此法确定λ噬菌体的复制是一个起点、双方向对称复制。限制性内切核酸酶定位法是用限制性内切核酸酶切割质粒DNA，结合电子显微镜技术，比较不同复制时间的复制叉同两端距离的变化，以确定复制的起点和方向。用这种方法确定了ColEl质粒复制是从离EcoRI切点的17％的特异位点开始的，并从起点开始单向复制。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    目前使用较为广泛的质粒DNA小量提取的方法是（）
    A

    牙签少量制备法

    B

    小量一步提取法

    C

    SDS裂解法

    D

    碱裂解法

    E

    煮沸裂解法


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

相关内容