关于纸片扩散法的质量保证，下列叙述错误的是（）A、准确量取培养基，以保证每个培养基厚度4mm。配制当天使用或置密封袋中4℃保存B、检测甲氧西林耐药葡萄球菌（methicillin-resistantstaphylococcμs，MRS）菌株温度不超过35℃C、培养基的酸碱度以pH7.2～7.4最适宜，碱性可扩大四环素类的抑菌圈，酸性可扩大氨基糖苷类药物的抑菌圈D、纸片密封贮存于2～8℃或－14℃以下无霜冷冻箱，避免反复冻融，β-内酰胺类药敏纸片应冷冻贮存E、抑菌圈测量时通常忽略抑菌圈边缘，仅能在放大镜下观

第1题：

第2题：

第3题：

第4题：

第5题：

纸片扩散法药敏试验的影响因素很多，如培养基、含药纸片、菌悬液浓度、实验过程及结果测量等。关于含药纸片，错误的是（）

• A、每张纸片的含药量一致
• B、常规保存温度为2～8℃
• C、使用前应置室温平衡1～2h，防止纸片表面产生冷凝水
• D、纸片一旦接触琼脂表面，则不应再移动位置
• E、纸片直径、密度、吸水性、纸片本身的酸碱度应一致

正确答案:B

第6题：

目前可检测万古霉素中介/耐药金黄色葡萄球菌（VISA/VRSA）的方法很多，如纸片扩散法、肉汤稀释法、琼脂稀释法等，但不同方法之间仍存在一定的差异。关于各种检测方法的局限性，下列叙述错误的是（）

• A、VRSA可通过参考肉汤稀释法、琼脂稀释法、Etest、纸片扩散法、万古霉素筛选平板及自动化仪器检测
• B、VISA检测方法主要为非自动化仪器方法
• C、自动化仪器和万古霉素筛选平板可检测MIC为4μg/ml的VISA
• D、对于疑似VISA/VRSA的细菌可用MIC法或纸片扩散法加万古霉素筛选平板进行检测
• E、对于可能为VISA/VRSA的菌株首先检查纯度，确认菌株鉴定无误，用可靠的MIC方法重新检测

正确答案:C

第7题：

哪些因素可影响K-B纸片扩散法的药敏结果？

正确答案:1.培养基成分。
2.药物纸片。
3.菌量。
4.操作质量。
5.孵育条件。
6.抑菌环测量工具的精确度。
7.质控菌株本身的药敏特性是否合格。

第8题：

纸片扩散法药敏试验，在贴药敏纸片前平皿放置时间过长，会使抑菌圈_____。

正确答案:缩小

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

第15题：

第16题：

下列不会影响K－B纸片扩散法抑菌圈直径的因素是（）

• A、培养基中琼脂含量减少
• B、培养基pH7.2～7.8
• C、纸片吸水量10μl
• D、纸片直径8mm
• E、培养温度35℃

正确答案:E

第17题：

对大环内酯类耐药的某些细菌可能对克林霉素结构性或诱导性耐药，故对此类细菌需进行克林霉素诱导试验（D试验）。关于葡萄球菌属D试验纸片扩散法，下列叙述错误的是（）

• A、培养基可采用M-H琼脂或用于MIC测试的血琼脂平板
• B、纸片含量分别为红霉素15μg和克林霉素2μg
• C、35±2）℃，空气，18～24h
• D、边缘相距15～26mm
• E、金黄色葡萄球菌ATCC25923用于纸片扩散法常规质量控制

正确答案:C

第18题：

对大环内酯类耐药的某些细菌可能对克林霉素结构性或诱导性耐药，故对此类细菌需进行克林霉素诱导试验（D试验）。关于β溶血链球菌D试验纸片扩散法，下列叙述错误的是（）

• A、培养基为含5%脱纤维羊血M-H琼脂
• B、纸片含量分别为红霉素15μg和克林霉素2μg
• C、35±2）℃，5%CO，20～24h
• D、边缘相距15～26mm
• E、肺炎链球菌ATCC49619用于纸片扩散法常规质量控制

正确答案:D

第19题：

试述纸片扩散法质控结果失控的原因?

正确答案:①质控结果记录错误；②量取抑菌环直径时读数错误；③标准菌株被污染或其他改变；④接种的菌悬液太浓或过淡；⑤O.5管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效；⑥孵育温度或气体环境不正确；⑦含药纸片失效；⑧MH培养基质量有问题。一旦发现失控，如有前4条错误容易解决，如果方法上没有问题，第2天重复出现的结果应符合要求，如果仍失控则必须继续寻找原因。在误差未纠正前须每天监测。

第20题：

简述纸片扩散法的原理及方法。

正确答案:（1）原理：
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关。
（2）试验方法：
采用直接菌落法或液体生长法。用0.5麦氏浊度菌液浓度，15分钟内接种完毕。步骤如下：
a.用无菌棉拭子蘸取菌液，在管内壁将多余的菌液旋转挤去后，在琼脂表面均匀涂抹3次，每次旋转平板60℃，最后沿平板内缘涂抹1周；
b.平板室温下干燥3～5分钟，用纸片分配器或无菌镊子将含药纸片紧贴于琼脂表面，各纸片中心相距大于24mm，纸片距平板内缘大于15mm，纸片贴上后不可再移动。
c.置35℃孵育16～18小时后阅读结果，但甲氧西林和万古霉素药敏实验结果应孵育24小时。

第21题：

第22题：

第23题：

第24题：