用沉降法纯化原生质体常引起原生质体破碎，这是因为高渗溶液的作用。
题目
用沉降法纯化原生质体常引起原生质体破碎，这是因为高渗溶液的作用。
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第1题：
何谓原生质体？如何获得原生质体？
正确答案:G+细菌人为彻底去壁后仅由细胞膜包围的细胞生活体部分即为原生质体。获得的方法：用某选择性溶菌酶（如溶菌酶）以适当浓度处理G+细菌，经一定时间后，便可彻底去掉细胞壁；或者让G+细菌在一种特殊的环境中生长。例如将其培养在含一定浓度青霉素的培养基中，便可抑制细胞壁肽聚糖的合成而获得。 -
第2题：
原生质体纯化的方法有：离心沉淀法、漂浮法、（）
正确答案:界面法 -
第3题：
什么叫植物原生质体？如何进行植物原生质体的融合？
正确答案: 脱去细胞壁的细胞叫原生质体，两亲本菌株的选择和遗传标记的制作（选择不同的营养缺陷型；原生质体的制备（高渗条件）；原生质体再生（测定再生率）；融合（PEG、离心沉淀、电脉冲等）；融合子的检出（直接检出法和间接检出法）；实用性菌株的筛选。 -
第4题：
什么叫植物原生质体？植物原生质体活力的鉴定方法主要有那些？
正确答案:原生质体（protoplast）：指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。
1、形态观察
2、胞质环流法
3、以氧的摄入量做指标
4、染色法（FDA染色法） -
第5题：
影响原生质体培养的因素有哪些？简述原生质体培养的程序。
正确答案: （1）原生质体的活力
（2）原生质体起始密度
（3）细胞壁再生速度
（4）培养基营养
（5）培养条件
（6）供试材料的基因型和生理状态
原生质体分离——原生质体纯化——原生质体培养——原生质体胞壁再生——细胞团形成——器官形成、植株再生。 -
第6题：
何谓固定化原生质体？固定化原生质体有何特点？
正确答案:将微生物细胞和植物细胞去细胞壁后，可得原生质体，将此原生质体用多孔凝胶包埋，即为固定化原生质体。
特点：（1）促进胞内物质分泌到胞外。（2）有利于氧的传递，营养物质的吸收。 -
第7题：
什么是原生质体？原生质体培养的三个特点是什么？
正确答案: 原生质体培养：脱壁后的植物细胞称为原生质体（protoplast），
其特点是：
①比较容易摄取外来的遗传物质，如DNA；
②便于进行细胞融合，形成杂交细胞；
③与完整细胞一样具有全能性，仍可产生细胞壁，经诱导分化成完整植株。 -
第8题：
有关原生质体的下列叙述中，正确的是（）
- A、组成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸
- B、原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者之间的原生质
- C、被脱掉细胞壁的植物裸露细胞是原生质体
- D、原生质体只能用于植物细胞工程
正确答案:A,C -
第9题：
问答题原生质体培养有哪些常用方法？用哪些方法可以实现原生质体融合？正确答案： 培养方法可以分为固体培养法和液体培养法两大类，后来又由此派生出一些不同形式的原生质体培养方法。常用的有液体浅层培养法、固体平板法、悬滴培养法等。
原生质体融合有自发融合、诱导融合。其中诱导融合的方法有：硝酸钠法、多聚化合物法、高pH高Ca++法、聚乙二醇法、还有电融合等方法。解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题如何纯化分离的植物原生质体并鉴定其活力？正确答案： （1）原生质体的纯化
①沉降法：应用原生质体的比重大于溶液的性质而使原生质体沉于底部。
②漂浮法：应用渗透剂含量较高的洗涤液使原生质体漂浮于液体表面。
③梯度离心法：选两种不同渗透浓度的溶液，其中一种溶液密度大于原生质体的密度，另一种溶液小于原生质体的密度。
（2 原生质体活力的测定
①形态识别：形态上完整，呈圆形，含有饱满的细胞质，颜色鲜艳的即为存活的原生质体。
②染色识别
1、0.1%酚番红或Evans蓝染色：有活力的不被染色，死亡的被染上色。
2、双醋酸盐荧光素（FDA）染色法：在荧光显微镜下有荧光的即为有活性的原生质体。解析： 暂无解析 -
第11题：
判断题用沉降法纯化原生质体常引起原生质体破碎，这是因为高渗溶液的作用。A对
B错
正确答案： 对解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题原生质体纯化的两种方法是什么？正确答案： 上浮法：是将酶解的原生质体与蔗糖溶液（23％左右）混合。
下沉法：是先将原生质体与13％的甘露醇混合，（1分）然后加到23％的蔗糖溶液顶部，形成一个界面。
两种方法中，均在1000g下离心5-10分钟，会在蔗糖溶液顶部形成一条原生质体带。用吸管将带轻轻地吸出来，用培养基悬浮离心，然后稀释到104-l05个／ml，用于培养。解析： 暂无解析 -
第13题：
原生质体培养中，渗透稳定剂的作用是维持原生质体的渗透压。
正确答案:正确 -
第14题：
去壁后的原生质体一般保存在（）
- A、等渗溶液中
- B、高渗溶液中
- C、低渗溶液中
正确答案:B -
第15题：
制备原生质体时为何要在等渗或稍高渗溶液中进行？
正确答案: 只有培养在等渗或稍高渗培养基中植物才能正常生长，如果植物的原生质体培养在非等渗或低渗或高渗培养液中植物有可能会因为浓度差而吸水或是失水从而导致植物的死亡，所以植物的原生质体要培养在等渗或稍高渗培养基中。 -
第16题：
原生质体纯化有哪些方法？
正确答案: 沉降法、漂浮法、不连续梯度法。 -
第17题：
在制备植物原生质体时，供体组织经过酶处理后，除得到大量游离的完整原生质体外，还会有一些未被消化的细胞和细胞团，以及破碎的细胞等混合在其中，它们的存在又会对原生质体培养产生不良后果，因此，有必要纯原生质体；具体的纯化方法有以下几种：（）、（）、（）。
正确答案:过滤-离心法；飘浮法；沉降法和漂浮法结合（界面法） -
第18题：
原生质体纯化主要有哪些方法？
正确答案:1、过滤-离心法。
2、漂浮法：原生质体比重较小，能在具有一定渗透压的溶液（如25%的蔗糖溶液）中漂浮，然后用吸管收集。转入另一管中，如此反复离心、悬浮2~3次，即可获得纯原生质体。优点：制备的原生质体较纯净.。
缺点：丢失的较多。
3、界面法：又称不连续梯度法，采用两种密度不同的溶液形成不连续梯度，通过离心使原生质体与破损细胞分别处于不同液相中，从而纯化原生质体的方法。
优点：可以收集到数量较大的纯净原生质体，同时保持着相同的渗透强度使原生质体免受渗透冲击而受损。 -
第19题：
原生质体纯化的两种方法是什么？
正确答案: 上浮法：是将酶解的原生质体与蔗糖溶液（23％左右）混合。
下沉法：是先将原生质体与13％的甘露醇混合，（1分）然后加到23％的蔗糖溶液顶部，形成一个界面。
两种方法中，均在1000g下离心5-10分钟，会在蔗糖溶液顶部形成一条原生质体带。用吸管将带轻轻地吸出来，用培养基悬浮离心，然后稀释到104-l05个／ml，用于培养。 -
第20题：
单选题在质壁分离以后原生质体与细胞分开，在细胞壁和原生质体之间主要存在的是什么？（）A空气
B真空
C水
D高渗溶液
E细胞液
正确答案： A解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题何谓固定化原生质体？固定化原生质体有何特点？正确答案： 将微生物细胞和植物细胞去细胞壁后，可得原生质体，将此原生质体用多孔凝胶包埋，即为固定化原生质体。
特点：（1）促进胞内物质分泌到胞外。（2）有利于氧的传递，营养物质的吸收。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题何谓原生质体？如何获得原生质体？正确答案： G+细菌人为彻底去壁后仅由细胞膜包围的细胞生活体部分即为原生质体。获得的方法：用某选择性溶菌酶（如溶菌酶）以适当浓度处理G+细菌，经一定时间后，便可彻底去掉细胞壁；或者让G+细菌在一种特殊的环境中生长。例如将其培养在含一定浓度青霉素的培养基中，便可抑制细胞壁肽聚糖的合成而获得。解析： 暂无解析 -
第23题：
判断题原生质体培养中，渗透稳定剂的作用是维持原生质体的渗透压。A对
B错
正确答案： 对解析： 暂无解析