简述基因表达在两个水平上的检测及其检测方法。
题目
简述基因表达在两个水平上的检测及其检测方法。
相似考题
参考答案和解析
正确答案:
一是在转录水平上对特mRNA特的检测，主要方法是Northern杂交，其中包括斑点杂交及印迹杂交；
二是在翻译水平上对特异蛋白质的检测。
检测方法有三种：
①生化反应检测法：主要通过酶反应来检测；
②免疫学检测法：通过目的蛋白（抗原）与其抗体的特异性结合进行检测，具有方法有免疫沉淀法、酶联免疫吸附法（ELISA）及Western杂交；
③生物学活性的检测。上述方法中Northern杂交及Western杂交又属于分子杂交检测。
二是在翻译水平上对特异蛋白质的检测。
检测方法有三种：
①生化反应检测法：主要通过酶反应来检测；
②免疫学检测法：通过目的蛋白（抗原）与其抗体的特异性结合进行检测，具有方法有免疫沉淀法、酶联免疫吸附法（ELISA）及Western杂交；
③生物学活性的检测。上述方法中Northern杂交及Western杂交又属于分子杂交检测。
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第1题：
外源基因表达的检测方法有三种（）（）（）
正确答案:生化反应检测法；免疫学检测法；生物学活性的检测 -
第2题：
试述外源基因表达产物的检测方法。
正确答案: （一）特异性mRNA的检测
Northern杂交，即RNA-DNA杂交分析，是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。与Southern杂交类似，检测目的RNA的存在与否及含量。
（二）报告基因的酶法检测
（1）报告基因：其表达产物及其功能在未转化的植物细胞中并不存在；其表达产物便于检测。
（2）目前动物基因工程中使用的报告基因一般是编码酶的基因，主要有：β-葡萄糖苷酸酶基因（GUS基因）、氯霉素乙酰转移酶基因（CAT基因）、胸苷激酶基因（cA）、二氢叶酸还原酶基因（DHFR）等。
（三）免疫学检测
（1）免疫沉淀法
（2）酶联免疫吸附法（ELISA）
ELISA是一种利用免疫学原理检测抗原、抗体的技术。它与经典的以同位素标记为基础的液－液抗原－抗体反应体系不同之处是建立了固－液抗原－抗体反应体系，并采用酶标记。抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍保持其活性；抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后，仍分别保持其免疫活性和酶活性。酶标抗原或抗体与相应抗体或抗原反应后，结合在免疫复合物上的酶遇到相应的底物时，可以催化底物的水解、氧化或还原，从而产生有色物质。颜色反应的深浅与相应抗体或抗原量相关。
（3）Western印迹法
（4）固相放射免疫（RIA）法
RIA法是一种定量测定外源表达蛋白的方法。该法具有很高的灵敏度，可检测出1pg的靶蛋白。
（四）表达产物的生物学活性检测
当外源基因的表达产物是一种酶蛋白时，可根据酶的催化反应来确定外源基因的表达与否和表达的程度。常见的有：淀粉酶、碱性磷酸酶、脂肪酶等。 -
第3题：
细胞因子的主要检测方法包括（）。
- A、用ELISA检测细胞因子及其受体
- B、用依赖性细胞株检测相应的细胞因子
- C、用分子杂交技术检测细胞因子mR-NA的表达
- D、用PCR技术检测细胞因子
- E、用免疫学方法检测细胞因子活性水平
正确答案:A,B,C,D -
第4题：
下列关于基因检测疾病的叙述，错误的是（）
- A、可以用测定基因表达产物——蛋白质的方法达到基因检测的目的
- B、生物芯片的广泛使用，使基因及其表达产物的检测更加快速简便
- C、基因检测疾病带来的负面影响主要是基因歧视
- D、基因检测疾病时，一次只能检测一种疾病，十分麻烦
正确答案:D -
第5题：
简述杂合双链分析检测基因突变的基本原理及其优、缺点。
正确答案: 杂合双链分析（heteroduplex analysis，HA）原理在于有缺失突变的待检DNA与野生型DNA探针杂交后，形成的异源杂合双链DNA在错配处会产生单链的环形突起，无突变则无此结构，这两种杂交后形成的双链DNA在凝胶电泳时会产生不同的迁移率，据此可以判断待检DNA样品中有无缺失突变。
优点：简单、快速。
缺点：适用范围较小，限于200-300bp片段，且不能确定突变位置，检出率一般为80%。 -
第6题：
当（）时，可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断
- A、基因片断缺失
- B、基因片断插入
- C、基因结构变化未知
- D、表达异常
正确答案:C -
第7题：
简述细胞凋亡的定义及其检测方法。
正确答案:细胞凋亡是活体内单个细胞或小团细胞的死亡，死亡细胞的质膜（细胞膜和细胞器膜）不破裂，不引起死亡细胞的自溶，也不引起炎症反应
。常用方法：
1.形态学观察主要观察某些单个细胞死亡时细胞碎裂如花瓣或树叶散落般的形态学特征。常用光学显微镜观察、视频时差显微技术、电子显微镜观察及流式细胞技术。
2.细胞化学测定主要测定包括细胞膜的结构和通透性改变的测定和细胞核DNA改变的测定。
方法有：
①DNA裂解的原位检测如TUNEL法检测；
②凋亡蛋白质酶-3（Caspase-3）；
③其底物的检测；
④DNA琼脂凝胶电泳发；
⑤膜蛋白V标记及碘化丙啶测定。 -
第8题：
利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是（）
- A、棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
- B、大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
- C、山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
- D、酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
正确答案:D -
第9题：
填空题一般情况下基因表达检测分为两个水平（）（）正确答案： 一是在转录水平上对特mRNA特的检测,二是在翻译水平上对特异蛋白质的检测解析： 暂无解析 -
第10题：
单选题高通量测序方法在下面哪种实验中没有应用：（）A基因表达谱检测
B全基因组变异检测
C基因组甲基化检测
D蛋白质表达检测
E非编码RNA表达检测
正确答案： B解析： 暂无解析 -
第11题：
多选题基因表达谱芯片技术简述如下：在一张1.6cm2的芯片上排布几十万个探针组成微方阵，探针分子是30～40bp的cDNA。从不同的人体组织或细胞中提取所有DNA的mRNA，标记荧光染料，将其与cDNA方阵杂交。根据荧光信号强弱，确定表达的基因及其表达水平。根据以上叙述判断，以下正确的有（）A探针与cDNA方阵杂交，原理是碱基互补配对
B探针分子通过PCR技术制备
C检测样品也可以直接用DNA
D检测结果可用于研究正常细胞和肿瘤细胞基因表达的差异
正确答案： D,B解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题简述基因表达在两个水平上的检测及其检测方法。正确答案： 一是在转录水平上对特mRNA特的检测，主要方法是Northern杂交，其中包括斑点杂交及印迹杂交；
二是在翻译水平上对特异蛋白质的检测。
检测方法有三种：
①生化反应检测法：主要通过酶反应来检测；
②免疫学检测法：通过目的蛋白（抗原）与其抗体的特异性结合进行检测，具有方法有免疫沉淀法、酶联免疫吸附法（ELISA）及Western杂交；
③生物学活性的检测。上述方法中Northern杂交及Western杂交又属于分子杂交检测。解析： 暂无解析 -
第13题：
转基因技术中外源基因表达产物检测不适宜的方法有（）。
- A、特异性mRNA的检测
- B、报告基因的酶法检测
- C、酶联免疫吸附法（ELISA）
- D、Southern印迹法
正确答案:D -
第14题：
简述化学切割错配检测基因突变的基本原理及其优、缺点。
正确答案: 化学切割错配（chemical cleavage of mismatch，CCM）通过在DNA：DNA或DNA：RNA异源杂合双链核酸分子中发生C错配（如A-C、T-C、C-C配对）处，能被羟胺和哌啶切割，如系T错配，能被四氧化锇切割的特点，先将野生型探针与待检样品杂交，再分别用羟胺、哌啶和四氧化锇处理；根据凝胶电泳中DNA片段数量和大小判断样品中有无突变、突变位置及类型等。
优点：准确率高，无非特异性切割，检出率高，达100%，结合荧光检测系统还可提高其灵敏度达1突变/10个细胞，可用于长达2kb片段。
缺点：步骤多，费时，使用有毒化学物质。 -
第15题：
下列关于基因检测疾病的叙述不正确的是（）
- A、可以用测定基因表达产物—蛋白质的方法达到基因检测的目的
- B、生物芯片的广泛使用，使基因及其表达产物的检测更加快速简便
- C、基因检测疾病带来的负面影响主要是基因歧视
- D、基因检测疾病时，一次只能检测一种疾病，十分麻烦
正确答案:D -
第16题：
简述酶促切割错配检测基因突变的原理及其优、缺点。
正确答案: 酶促切割错配（enzyme mismatch cleavage，EMC）利用T4内切核酸酶VII识别12种错配碱基并在附近进行酶切的特性，将核酸探针与待检分子杂交，有点突变时杂交分子中有错配出现，为T4内切核酸酶VII识别切割，根据凝胶电泳中片段数量和大小判断有无突变。
优点：能对DNA：RNA异源杂合分子进行分析，最长检测片段达1.5kb。
缺点：产生非特异性切割，检出效率不能保证100%，必须设立内对照。 -
第17题：
间接基因诊断途径是（）。
- A、检测基因表达产物
- B、检测相邻基因
- C、检测连锁的遗传标记
- D、直接检测突变的基因
- E、检测外源基因
正确答案:C -
第18题：
原位杂交技术的目的是（）
- A、检测或定位某一特定的目的DNA或目的RNA的存在
- B、检测基因片段
- C、检测蛋白表达
- D、检测基因移位
- E、检测融合基因
正确答案:A -
第19题：
在哪些水平上可以对转基因植株进行检测？方法如何？
正确答案:（一）标记基因的检测。
1.选择标记基因；
2.报告基因。
（二）目的基因整合水平的鉴定；
1.PCR检测；
2.电化学发光PCR技术；
3.HRCA技术；
4.Southern杂交。
（三）目的基因转录水平上的检测；
1.Northern杂交；
2.RT-PCR。
（四）外源基因翻译水平上的检测。
1.ELISA检测；
2.Western杂交。 -
第20题：
问答题试述外源基因表达产物的检测方法。正确答案： （一）特异性mRNA的检测
Northern杂交，即RNA-DNA杂交分析，是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。与Southern杂交类似，检测目的RNA的存在与否及含量。
（二）报告基因的酶法检测
（1）报告基因：其表达产物及其功能在未转化的植物细胞中并不存在；其表达产物便于检测。
（2）目前动物基因工程中使用的报告基因一般是编码酶的基因，主要有：β-葡萄糖苷酸酶基因（GUS基因）、氯霉素乙酰转移酶基因（CAT基因）、胸苷激酶基因（cA）、二氢叶酸还原酶基因（DHFR）等。
（三）免疫学检测
（1）免疫沉淀法
（2）酶联免疫吸附法（ELISA）
ELISA是一种利用免疫学原理检测抗原、抗体的技术。它与经典的以同位素标记为基础的液－液抗原－抗体反应体系不同之处是建立了固－液抗原－抗体反应体系，并采用酶标记。抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍保持其活性；抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后，仍分别保持其免疫活性和酶活性。酶标抗原或抗体与相应抗体或抗原反应后，结合在免疫复合物上的酶遇到相应的底物时，可以催化底物的水解、氧化或还原，从而产生有色物质。颜色反应的深浅与相应抗体或抗原量相关。
（3）Western印迹法
（4）固相放射免疫（RIA）法
RIA法是一种定量测定外源表达蛋白的方法。该法具有很高的灵敏度，可检测出1pg的靶蛋白。
（四）表达产物的生物学活性检测
当外源基因的表达产物是一种酶蛋白时，可根据酶的催化反应来确定外源基因的表达与否和表达的程度。常见的有：淀粉酶、碱性磷酸酶、脂肪酶等。解析： 暂无解析 -
第21题：
单选题转基因技术中外源基因表达产物检测不适宜的方法有（）。A特异性mRNA的检测
B报告基因的酶法检测
C酶联免疫吸附法（ELISA）
DSouthern印迹法
正确答案： C解析： 暂无解析 -
第22题：
单选题原位杂交技术的目的是（）A检测或定位某一特定的目的DNA或目的RNA的存在
B检测基因片段
C检测蛋白表达
D检测基因移位
E检测融合基因
正确答案： D解析： 暂无解析 -
第23题：
单选题间接基因诊断途径是（）。A检测基因表达产物
B检测相邻基因
C检测连锁的遗传标记
D直接检测突变的基因
E检测外源基因
正确答案： E解析： 暂无解析