基因工程的大肠杆菌载体有哪些,各有什么特点?

题目

基因工程的大肠杆菌载体有哪些,各有什么特点?


相似考题
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  • 第1题:

    合成型有机热载体有哪些类型?各有何使用特点?


    正确答案: (1)合成型有机热载体产品分为“普通合成型”和“具有特殊高热稳定性合成型”两种。
    (2)特点:
    ①普通合成型有机热载体的热稳定性和最高允许使用温度与矿物型有机热载体相似;
    ②具有特殊高热稳定性的合成型有机热载体最高允许使用温度在320℃以上,最高可达400℃,只能限于闭式系统使用。
    ③合成型有机热载体可以通过回收处理延长其使用寿命。

  • 第2题:

    基因工程载体的特点是什么?


    正确答案:(1)至少有一个复制起点,因而至少可在一种生物体中自主复制。
    (2)至少应有一个克隆位点,以供外源DNA插入。
    (3)至少应有一个遗传标记基因,以指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞。
    (4)安全性。

  • 第3题:

    强化的程式有哪些?各有什么特点。


    正确答案:(1)固定时距强化法
    固定时距强化法下,实施强化前须经一固定量的时间。间隔过后第一件合乎需要的行为即得到强化。这种类型的强化的关键变量是等长的时间,而且必须持续进行。这种强化往往鼓励不平衡行为。强化前,行为是频繁的、有活力的。强化后,行为的频率和活力却降低了。其原因在于,个体很快意识到一个奖励之后不会很快来第二个奖励。
    (2)可变时距强化法
    可变时距强化下,两个强化之间的时间量是变化的,是不可预测的,这种方式称为可变时距强化。
    (3)固定比率法
    固定比率法下,合乎需要的行为必须出现若干次才会得到强化。确切次数有说明。按固定比率法给予奖励往往可产生较高的回应和稳定的行为。
    (4)可变比率法
    可变比率法下,须发生若干次合乎需要的行为后才给予强化,但行为次数围绕一个平均数在变化,可形成最高的回应和稳定的行为。

  • 第4题:

    网架结构的支座形式有哪些?各有什么特点?


    正确答案: (1)平板压力和拉力支座:转动的位移受很大约束,在底板可开设椭圆形孔洞,方便安装,只适用于较小跨度网架(2)单面弧形压力支座和拉力支座:单方向转动未受约束,限制平移,适用于中小跨度网架(3)双面弧形压力支座:在支座和底板间设有弧形块,上下面都是柱面,支座可转动但不能平移。(4)球铰压力支座,其支座可任意方向转动但不能平移,适用于大跨度网架。(5)板式橡胶支座:通过橡胶垫的压缩和剪切变形,支座既可以转动也可以平移,助于单行支座,适用于大中跨度网架。

  • 第5题:

    常用的噬菌体载体有哪些?各有什么特点?


    正确答案: λ噬菌体:λ噬菌体是温和噬菌体,注入的DNA整合到大肠杆菌染色体中,与染色体一起复制,在某种营养或环境胁迫条件下,整合的λ噬菌体DNA被切割出来,进入裂解循环。λ噬菌体是一种线状双链分子,其中大约20kb对于整合/切割过程极为关键,称整合/切割(I/E)区域。构建核基因文库来时,将这20kbDNA片段去掉,强迫重组λ噬菌体进入裂解循环。
    M13载体:M13载体是一种细丝状的特异性大肠杆菌噬菌体—单链噬菌体载体。可插入外源DNA而不影响噬菌体增殖。M13感染细菌后呈双链复制型(RF)DNA。允许包装大于病毒单位长度的外源DNA;感染细菌后复制环状DNA经包装形成噬菌体颗粒,分泌到细胞外而不溶菌。这些特性便于分离单链DNA,且在产生大量的单链DNA中,含有外源DNA序列。可用于DNA序列分析、制备杂交探针、定点突变等。

  • 第6题:

    问答题
    用于DNA重组的载体应具备什么条件?常用的载体有哪一些?各有何特点?

    正确答案: .DNA重组载体应具备的条件:
    (1)能自主复制;
    (2)具有一种或多种限制性内切酶的单一切割位点,并在位点中插入外源基因后,不影响其复制功能;
    (3)具有1~2个筛选标记;
    (4)克隆载体必须是安全的,不应含有对受体细胞有害的基因,并且不会任意转入其他生物细胞;
    (5)易于操作,转化效率高。
    常用的基因载体有以下几种:
    (1)质粒:是细菌染色体以外的小型环状双链DNA分子,本身有复制功能,且带有某些选择信息,但可插入的目的基因片段较小。
    (2)噬菌体DNA:是一种病毒DNA,能插入比较大的外源DNA片段,在DNA分子上有多种限制性核酸内切酶识别位点,便于多种外源DNA酶切片段的克隆。
    (3)黏粒
    (4)柯斯质粒载体和酵母人工染色体:前者结合了质粒和 噬菌体载体的优点,也是一种环形双链DNA分子,具有质粒的性质,可以转化大肠杆菌,并自行复制和增殖,但它不会产生子代噬菌体,构建成的此种载体较小,因此能插入比较大的外源DNA片段,所以被广泛地用于构建基因组文库。后者既含有大肠杆菌来源的质粒复制起始位点,又含有酵母菌染色体DNA着丝点,端粒和复制起始位点的序列,以及合适的选择标记基因,可在转化的酵母菌细胞内,按染色体DNA复制的形式复制重组DNA,容纳外源DNA片段的能力比前3种载体大得多。
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  • 第7题:

    问答题
    常见的基因工程载体有哪些?

    正确答案: 1.质粒载体:质粒是独立于细菌或细胞染色体外的,能自主复制的,与细菌或细胞共生的双链共价闭合环状DNA分子。现在分子生物学使用的质粒载体都已经不是原来细菌或细胞中天然存在的质粒,而是经过了许多的人工的改造。如最常用的pUC19,复制起始经过改造能够高频启动复制和增加拷贝数;携带一个抗氨苄青霉素基因用于转化后筛选;携带细菌lac操纵子中的lacI和lacZ基因,通过蓝白筛选法挑选阳性克隆。
    除了常用的大肠杆菌质粒载体外,还有人工构建的酵母、植物等质粒载体。还有不止一种ori、能携带插入序列在不同种类宿主细胞中繁殖的穿梭载体。
    2.噬菌体:噬菌体是感染细菌的一类病毒,有的噬菌体基因组较大,如λ噬菌体和T噬菌体;有的则较小,如M13噬菌体。
    M.13噬菌体是一种大肠杆菌丝状噬菌体,其基因组是单链闭环DNA,其最大优点是:在用作克隆载体时可产生仅含外源DNA某一条链的DNA分子。这种单链DNA分子可作为模板用于DNA测序、制备DNA探针或利用寡核苷酸进行定点突变。
    λ噬菌体的基因组是长度为50kb的线状双链DNA分子。λ噬菌体是最早使用的克隆载体之一,常用于构建基因组文库和cDNA文库。
    3.动物病毒:质粒和噬菌体载体只能在细菌中繁殖,不能满足真核DNA重组需要。感染动物的病毒可改造用作动物细胞的载体,一般制作成穿梭载体(细菌中繁殖和克隆,然后引入真核细胞)。目前常用的载体改造自SV40、逆转录病毒和昆虫杆状病毒。
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  • 第8题:

    问答题
    基因工程疫苗的理想表达载体应具有的特点有哪些?

    正确答案: 基因工程疫苗的理想表达载体应具有的特点:
    (1)分子量小,拷贝数高,易于操作,插入的基因幅度较宽;
    (2)具有强的启劫子,能自主复制,并使重组DNA能在细胞内得到增值和表达;
    (3)有较多的限制性酶识别位点,以及一定的非必要区,便于目的基因的插入;
    (4)具有一些容易检测的筛选标记,比较安全。
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  • 第9题:

    问答题
    常用来构建文库使用的载体系统有哪些?各有什么特点?

    正确答案: 1.噬菌体载体系统:构建的库容量最大(适于全长cDNA的克隆),转染效率最高,有较好的质量控制指标(通过对转染细胞的表现鉴定,如蓝白斑分析),适合于cDNA文库的长期保持。
    缺点:采用的文库筛选方法有限,文库中许多的cDNA片段在宿主细胞中常常无法获得功能性表达。
    2.质粒载体系统:体外操作方便,在载体本身的设计上有很大的可塑性,可对cDNA文库进行功能性筛选缺点,插入片段的载体容量小,因此文库中含有全长cDNA的克隆比例少;文库的库容量较小,质粒文库需要以活的转化菌形式保存和扩增,保存条件严格,不适于长期保存。
    3.噬菌粒载体系统:功能性筛选,缺点同“质粒载体”,cDNA文库功能筛选的重要方法
    4.哺乳类细胞表达载体:侵染的细胞增广;对细胞侵染率高;转染进宿主细胞的重组病毒基因能高频地整合到宿主细胞基因组中。
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  • 第10题:

    有机热载体残炭测定方法有哪些?各有何特点?


    正确答案: 有机热载体残炭测定方法有三种,分别是康氏法(GB268)、电炉法(SH/T0170)、微量法(GB/T17144)。
    ①康氏法,手动操作,受操作者熟练程度影响较大,效率低污染大,但为经典仲裁方法。
    ②电炉法,一次测4个样,温度自动控制精确度高,重复性和再现性好。
    ③微量法,一次可测多个样,取样少,污染少自动化程度高,重复性再现性都优于另外两种。

  • 第11题:

    参与大肠杆菌DNA复制的酶及蛋白质因子有哪些?各有什么作用?


    正确答案:①DNA聚合酶:催化新链合成催化脱氢核苷酸之间的聚合
    ②引物酶:催化RNA引物合成
    ③解螺旋酶:解开DNA双链
    ④拓扑异构酶:理顺DNA链
    ⑤单链DNA结合蛋白:维持DNA处于单链状态
    ⑥DNA连接酶:连接DNA链内接口

  • 第12题:

    用于DNA重组的载体应具备什么条件?常用的载体有哪一些?各有何特点?


    正确答案:.DNA重组载体应具备的条件:
    (1)能自主复制;
    (2)具有一种或多种限制性内切酶的单一切割位点,并在位点中插入外源基因后,不影响其复制功能;
    (3)具有1~2个筛选标记;
    (4)克隆载体必须是安全的,不应含有对受体细胞有害的基因,并且不会任意转入其他生物细胞;
    (5)易于操作,转化效率高。
    常用的基因载体有以下几种:
    (1)质粒:是细菌染色体以外的小型环状双链DNA分子,本身有复制功能,且带有某些选择信息,但可插入的目的基因片段较小。
    (2)噬菌体DNA:是一种病毒DNA,能插入比较大的外源DNA片段,在DNA分子上有多种限制性核酸内切酶识别位点,便于多种外源DNA酶切片段的克隆。
    (3)黏粒
    (4)柯斯质粒载体和酵母人工染色体:前者结合了质粒和 噬菌体载体的优点,也是一种环形双链DNA分子,具有质粒的性质,可以转化大肠杆菌,并自行复制和增殖,但它不会产生子代噬菌体,构建成的此种载体较小,因此能插入比较大的外源DNA片段,所以被广泛地用于构建基因组文库。后者既含有大肠杆菌来源的质粒复制起始位点,又含有酵母菌染色体DNA着丝点,端粒和复制起始位点的序列,以及合适的选择标记基因,可在转化的酵母菌细胞内,按染色体DNA复制的形式复制重组DNA,容纳外源DNA片段的能力比前3种载体大得多。

  • 第13题:

    数据压缩有哪些类型?各有什么特点?


    正确答案: 数据压缩方法种类繁多,可以分为无损压缩和有损压缩两大类。无损压缩利用数据的统计冗余进行压缩,可完全恢复原始数据而不产生任何失真,但压缩比较小,一般广泛用于不允许产生失真的压缩情况:有损压缩利用某些变换尽可能地去掉数据之间的相关性,但会带来不可恢复的损失和误差,也叫不可逆压缩,广泛应用于语音、图像和视频数据的压缩。

  • 第14题:

    理想的基因工程载体应具备的特征有哪些?常见基因载体有哪些?


    正确答案: 特征:
    ①在宿主细胞内独立、稳定地自我复制。外源DNA插入其DNA之后,仍保持稳定复制能力和遗传特性。
    ②易于从宿主细胞中分离,并进行纯化。
    ③在DNA序列中有限制性内切酶单一酶切位点—位于DNA复制非必需区,在这些位点上插入外源DNA不影响载体自身DNA复制。
    ④有能直接观察的表形特征(报告基因),插入外源DNA后,这些特征可作为重组DNA选择标记。
    常见的基因载体:
    细菌质粒载体、农杆菌质粒载体、λ噬菌体载体、柯氏质粒载体和病毒载体等。

  • 第15题:

    问答题
    痘病毒作为基因工程载体疫苗的载体的优点有哪些?

    正确答案: 痘病毒作为基因工程载体疫苗的载体的优点:
    (1)具有很好的安全性;
    (2)宿主细胞类型范围宽;
    (3)外源基因包装容量大;
    (4)在细胞质中复制、转录、翻译了RNA核加工、转移等的特殊要求;
    (5)外源基因表达高;
    (6)耐热性强,易获得高效价的培养。
    解析: 暂无解析

  • 第16题:

    问答题
    常用的噬菌体载体有哪些?各有什么特点?

    正确答案: λ噬菌体:λ噬菌体是温和噬菌体,注入的DNA整合到大肠杆菌染色体中,与染色体一起复制,在某种营养或环境胁迫条件下,整合的λ噬菌体DNA被切割出来,进入裂解循环。λ噬菌体是一种线状双链分子,其中大约20kb对于整合/切割过程极为关键,称整合/切割(I/E)区域。构建核基因文库来时,将这20kbDNA片段去掉,强迫重组λ噬菌体进入裂解循环。
    M13载体:M13载体是一种细丝状的特异性大肠杆菌噬菌体—单链噬菌体载体。可插入外源DNA而不影响噬菌体增殖。M13感染细菌后呈双链复制型(RF)DNA。允许包装大于病毒单位长度的外源DNA;感染细菌后复制环状DNA经包装形成噬菌体颗粒,分泌到细胞外而不溶菌。这些特性便于分离单链DNA,且在产生大量的单链DNA中,含有外源DNA序列。可用于DNA序列分析、制备杂交探针、定点突变等。
    解析: 暂无解析

  • 第17题:

    问答题
    参与大肠杆菌DNA复制的酶及蛋白质因子有哪些?各有什么作用?

    正确答案: ①DNA聚合酶:催化新链合成催化脱氢核苷酸之间的聚合
    ②引物酶:催化RNA引物合成
    ③解螺旋酶:解开DNA双链
    ④拓扑异构酶:理顺DNA链
    ⑤单链DNA结合蛋白:维持DNA处于单链状态
    ⑥DNA连接酶:连接DNA链内接口
    解析: 暂无解析

  • 第18题:

    问答题
    理想的基因工程载体应具备的特征有哪些?常见基因载体有哪些?

    正确答案: 特征:
    ①在宿主细胞内独立、稳定地自我复制。外源DNA插入其DNA之后,仍保持稳定复制能力和遗传特性。
    ②易于从宿主细胞中分离,并进行纯化。
    ③在DNA序列中有限制性内切酶单一酶切位点—位于DNA复制非必需区,在这些位点上插入外源DNA不影响载体自身DNA复制。
    ④有能直接观察的表形特征(报告基因),插入外源DNA后,这些特征可作为重组DNA选择标记。
    常见的基因载体:
    细菌质粒载体、农杆菌质粒载体、λ噬菌体载体、柯氏质粒载体和病毒载体等。
    解析: 暂无解析