以大肠杆菌质粒DNA的提取和重组为例阐述基因工程的基本步骤。

题目

以大肠杆菌质粒DNA的提取和重组为例阐述基因工程的基本步骤。

相似考题

1.基因工程操作的基本步骤()A.目的基因的获得B.重组DNA的形成C.重组DNA导入受体细胞D.筛选含有目的基因的受体细胞

2.下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A．限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子B．载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组1DNAC．除质粒外，λ噬菌体可作为重组DNA的载体D．筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行E．以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合

3.某一质粒载体如图6所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活 (Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。 (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述三种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是____；并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的，其原因是____。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有____的固体培养基。 (3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自____。

4.进行基因工程实验时，常用的技术有A．分子杂交技术B．DNA探针技术C．质粒重组技术D．基因调控技术

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  • 第1题：

    下列关于基因工程的叙述中，不正确的是（）

    • A、重组DNA是在体外进行的
    • B、基因工程又叫做重组DNA技术
    • C、基因工程是现代生物技术的核心
    • D、基因工程的受体细胞必须是大肠杆菌等原核生物

    正确答案:D

  • 第2题：

    基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（）

    • A、人工合成基因
    • B、制备重组DNA分子
    • C、转化受体细胞
    • D、目的基因的检测和表达

    正确答案:C

  • 第3题：

    基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（）

    • A、人工合成基因
    • B、制备重组DNA分子
    • C、目的基因导入受体细胞
    • D、目的基因的检测和表达

    正确答案:C

  • 第4题：

    在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指（）

    • A、大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶
    • B、噬菌体、质粒、DNA连接酶
    • C、限制酶、RNA连接酶、质粒
    • D、限制酶、DNA连接酶、质粒

    正确答案:D

  • 第5题：

    下列有关基因工程中运载体的说法，正确的是（）

    • A、在进行基因工程的操作中，作为运载体的质粒都是天然质粒
    • B、所有的质粒都可以作为基因工程中的运载体
    • C、质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子
    • D、作为运载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA分子进行鉴定和选择的标记基因

    正确答案:D

  • 第6题：

    以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它（）。


    正确答案:繁殖快、为单细胞生物、遗传物质相对较少

  • 第7题：

    用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的有（）

    • A、常用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒
    • B、DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
    • C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
    • D、导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达

    正确答案:B

  • 第8题：

    为了构建重组质粒pZHZ2，可利用限制酶E、F切割目的基因和质粒pZHZ1，然后用相应的酶连接下列叙述中错误的是（）

    • A、基因工程的核心就是构建重组DNA分子
    • B、质粒pZHZ2上存在RNA聚合酶结合的位点
    • C、重组质粒pZHZ2只能被限制酶G、H切开
    • D、质粒pZHZ1、pZHZ2复制时一定会用到DNA聚合酶

    正确答案:C

  • 第9题：

    何谓基因工程？阐述基因工程的基本操作过程。在一利用pBR322质粒和BamHⅠ构建“工程菌”的实验中，如何筛选含有目的基因的宿主细菌？


    正确答案: 基因工程是指人们利用分子生物学的理论和技术，自觉设计操纵改造和重建细胞的遗传核心——基因组，从而使生物体的遗传性状发生定向变异，以最大限度地满足人类活动的需要。基因工程的基本操作包括目的基因的取得，载体系统的选择，目的基因与载体重组体的构建，重组载体导入受体细胞，工程菌株的表达和检测等。
    大肠杆菌的pBR322质粒上有两个抗药性标记，即氨苄青霉素抗性和四环素抗性标记，限制酶BamHⅠ在该质粒上的插入点在四环素抗性基因上，当外源DNA片段插入后会引起四环素抗性基因失活。制备四环素平板、氨苄青霉素平板，将已转化的宿主细胞涂布，若在四环素平板上不能生长，在氨苄青霉素平板上能生长，则证明该菌已含有目的基因；若在两种平板上都能生长，则该菌不含目的基因。

  • 第10题：

    单选题
    在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“运载体”分别是指（）
    A

    大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶

    B

    噬菌体、质粒、DNA连接酶

    C

    DNA限制酶、RNA连接酶、质粒

    D

    DNA限制酶、DNA连接酶、质粒


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    以大肠杆菌质粒DNA的提取和重组为例阐述基因工程的基本步骤。

    正确答案： ①从细胞中分离出DNA；
    ②限制酶截取DNA片段；
    ③分离大肠杆菌中的质粒；
    ④DNA重组；
    ⑤用重组质粒转化大肠杆菌；
    ⑥培养大肠杆菌克隆大量基因。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    对于基因工程的叙述，下述哪一项是错误的？（　　）
    A

    需供体DNA

    B

    只有质粒DNA能被用作载体

    C

    也称基因克隆

    D

    重组DNA转化或转染宿主细胞

    E

    重组DNA需下一步纯化、传代和扩增


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    下列关于基因工程的叙述，错误的是（）

    • A、通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理质粒的DNA
    • B、DNA连接酶和载体是构建重组质粒必需的工具酶
    • C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
    • D、质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器

    正确答案:A,B,D

  • 第14题：

    基因工程的“四步曲”中未发生碱基互补配对的是（）

    • A、用PCR扩增抗病毒基因
    • B、将人的胰岛素基因与大肠杆菌质粒结合，形成重组质粒
    • C、将重组质粒导入受体细胞
    • D、抗病毒基因的表达

    正确答案:C

  • 第15题：

    对人类糖尿病的基因治疗研究大致步骤如下，由此可知（） ①提取目的基因 ②将目的基因与质粒结合为重组质粒 ③将重组质粒导入大肠杆菌 ④重组质粒在菌体内增殖 ⑤分离重组质粒，提取目的基因 ⑥将目的基因与某种病毒结合为重组DNA ⑦将重组DNA导入人体有基因缺陷的细胞 ⑧目的基因的检测和表达

    • A、过程①目的基因应来自患者本人
    • B、过程④是为了修饰基因
    • C、过程②、⑥在细胞内进行
    • D、目的基因导入不同受体细胞目的不同

    正确答案:D

  • 第16题：

    用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述错误的是（）

    • A、常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
    • B、载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
    • C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
    • D、导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达

    正确答案:B

  • 第17题：

    利用转基因大肠杆菌可合成人体的蛋白质。下列叙述不正确的是（）

    • A、常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
    • B、DNA连接酶和DNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
    • C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
    • D、导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达

    正确答案:B

  • 第18题：

    以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。切割和连接DNA分子所使用的酶分别是（）和（）。


    正确答案:限制性核酸内切酶(限制酶)；DNA连接酶

  • 第19题：

    以大肠杆菌为例综述生物DNA复制的主要过程。


    正确答案: 大肠杆菌的复制过程分为四个阶段。自然界的绝大多数DNA分子都是以超螺旋形式存在的，而且DNA分子的二级结构又是以双股链形成的螺旋结构。
    第一阶段是解链（亲代DNA分子超螺旋构像变化及双螺旋的解链，展现复制的模板）；
    第二阶段是复制的起始阶段（priming），有引物primer RNA进行，从原点开始向一个一到两个方向进行，形成复制叉5’-3’方向的合成；
    第三阶段为DNA链的延长，在引物RNA合成的基础上，进行DNA链的5’-3’方向合成，前导链连续地合成出一条长链，随从链合成出许多片段。去除RNA引物后，片段间形成了空隙。DNA链又继续合成填补了空隙，使各个片段靠近，随后各个片段连接成一个长链；
    第四阶段，为终止阶段，复制叉进行到一定部位就停止前进了，终止位大约在起始原点对位，最后前导链与随从链分别与各自的模板形成两个子代DNA分子，至此复制就完成了。

  • 第20题：

    在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“运载体”分别是指（）

    • A、大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶
    • B、噬菌体、质粒、DNA连接酶
    • C、DNA限制酶、RNA连接酶、质粒
    • D、DNA限制酶、DNA连接酶、质粒

    正确答案:D

  • 第21题：

    单选题
    关于基因工程的叙述，不正确的是（　　）。
    A

    需供体DNA

    B

    只有质粒DNA能被用作载体

    C

    也称基因克隆

    D

    重组DNA转化或转染宿主细胞

    E

    重组DNA需下一步纯化、传代和扩增


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    简述重组DNA（基因工程）的主要步骤 。

    正确答案： 重组DNA的主要步骤主要包括以下四个基本步骤：
    （1）目的基因的获得；
    （2）目的基因与载体分子在体外进行连接反应，形成重组体；
    （3）将人工重组的DNA分子导入能进行正常复制的寄主细胞，从而得到复制；
    （4）重组体分子的转化子克隆的选择和筛选。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    关于基因工程的叙述，下列哪项是错误的？（　　）
    A

    也称基因克隆

    B

    只有质粒DNA能被用作载体

    C

    需供体DNA

    D

    重组DNA转化或转染宿主细胞

    E

    重组需进一步纯化、传代和扩增


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

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