参考答案和解析
正确答案:用骨髓瘤细胞与经特定抗源免疫刺激的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖,又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此,单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术。
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  • 第1题:

    下列关于单克隆抗体的局限性叙述,错误的是

    A.单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制它的应用范围
    B.单克隆抗体不能用于凝集反应
    C.单克隆抗体能用于沉淀反应
    D.反应强度不如多克隆抗体
    E.制备技术复杂,费时费工

    答案:C
    解析:
    单克隆抗体不能用于沉淀反应和凝集反应。

  • 第2题:

    单克隆抗体技术是植物细胞工程技术。()


    正确答案:错误

  • 第3题:

    试述制备单克隆抗体的原理是什么?用到的动物细胞工程技术手段有哪几种?单克隆抗体的特点有哪些?


    正确答案:单克隆抗体的原理:要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一,得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性,也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性,用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群,可制备一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。
    手段:(1)灌注悬浮培养:连续灌注新的培养基,同时连续排出旧的培养液了,使细胞在一个相对稳定的环境中生长和繁殖,可提高细胞密度10倍以上
    (2)贴壁细胞培养:由于大部分动物细胞无细胞壁,进行细胞培养时必须附在固体或半固体表面上培养,在固体载体表面上生长,并扩成一单层,称为单层培养法
    (3)固定化细胞培养:采用载体使整个细胞固定化
    单克隆抗体的特点:
    (1)单克隆抗体是针对单一抗原决定的化学结构完全相同的单一抗体,其特异性强,与其对应抗原的亲和力高度均一
    (2)制备时无需将抗原纯化,适于由未纯化的抗原大量制备。
    (3)杂种瘤细胞株可冷冻于液氮中长期保存,所以单克隆抗体可以重复稳定的制备,不会因批号的不同而产生差异,只要使用来自同样杂交瘤的单克隆抗体,就能够以同一标准比较各研究室的数据。

  • 第4题:

    标记免疫技术的发展与标记技术、单克隆抗体技术和分子生物学技术的发展紧密联系的。( )


    正确答案:正确

  • 第5题:

    简述单克隆抗体的技术。


    正确答案:将免疫脾(淋巴)细胞与骨髓瘤细胞在融合剂存在下进行融合,进而进行选择、筛选和克隆的建立等。杂交瘤细胞克隆的后代能在体外培养并合成大量氨基酸顺序相同的单克隆抗体。

  • 第6题:

    单克隆抗体技术


    正确答案:用骨髓瘤细胞与经特定抗源免疫刺激的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖,又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此,单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术。

  • 第7题:

    简述利用杂交瘤技术进行单克隆抗体大规模生产的技术步骤与要点。


    正确答案: 1.亲本细胞的准备(致敏B淋巴细胞、骨髓瘤细胞的准备)
    2.细胞融合形成杂交瘤细胞
    3.杂交瘤细胞的筛选(采用HAT(含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤A.和胸腺嘧啶核苷(T))选择性培养基)
    4.可分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞的筛选:对每个含有杂交瘤细胞集落的生长孔中的上清液进行抗体检测,筛选出能够稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交细胞。检测方法:放射免疫测定、酶联免疫技术测定等
    5.杂交瘤细胞的克隆化培养:有限稀释法或软琼脂平板法66、最常用的杂交瘤细胞杂交瘤细胞克隆方法有那些?(有限稀释法或软琼脂平板法)

  • 第8题:

    Western印迹技术能从多克隆抗体中检测出单克隆抗体。


    正确答案:正确

  • 第9题:

    目前制备单克隆抗体的技术主要为()

    • A、瘤细胞培养技术
    • B、脾细胞培养技术
    • C、杂交瘤技术
    • D、质粒转染
    • E、流式细胞术

    正确答案:C

  • 第10题:

    杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤。


    正确答案: ①细胞的选择与培养
    ②细胞融合试验
    ③单克隆抗体检测
    ④克隆化培养
    ⑤杂交瘤细胞的鉴定
    ⑥单克隆抗体的大量制备
    ⑦单克隆抗体的鉴定
    ⑧单克隆抗体的纯化

  • 第11题:

    问答题
    试述制备单克隆抗体的原理是什么?用到的动物细胞工程技术手段有哪几种?单克隆抗体的特点有哪些?

    正确答案: 单克隆抗体的原理:要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一,得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性,也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性,用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群,可制备一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。
    手段:(1)灌注悬浮培养:连续灌注新的培养基,同时连续排出旧的培养液了,使细胞在一个相对稳定的环境中生长和繁殖,可提高细胞密度10倍以上
    (2)贴壁细胞培养:由于大部分动物细胞无细胞壁,进行细胞培养时必须附在固体或半固体表面上培养,在固体载体表面上生长,并扩成一单层,称为单层培养法
    (3)固定化细胞培养:采用载体使整个细胞固定化
    单克隆抗体的特点:
    (1)单克隆抗体是针对单一抗原决定的化学结构完全相同的单一抗体,其特异性强,与其对应抗原的亲和力高度均一
    (2)制备时无需将抗原纯化,适于由未纯化的抗原大量制备。
    (3)杂种瘤细胞株可冷冻于液氮中长期保存,所以单克隆抗体可以重复稳定的制备,不会因批号的不同而产生差异,只要使用来自同样杂交瘤的单克隆抗体,就能够以同一标准比较各研究室的数据。
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    单选题
    制备单克隆抗体采用的技术是(  )。
    A

    淋巴细胞杂交瘤技术

    B

    酵母双杂交技术

    C

    酵母单杂交技术

    D

    基因定点突变技术


    正确答案: B
    解析:
    单克隆抗体技术是在体细胞融合技术基础上发展起来的。A项,骨髓瘤细胞在体外可以连续传代,而脾细胞是终末细胞,不能在体外繁殖。将小鼠的骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞融合,则融合细胞既具有肿瘤细胞无限繁殖的特性,又具有淋巴细胞分泌针对该抗原的高特异性的抗体-单克隆抗体,同时也克服了免疫淋巴细胞不能在体外繁殖的缺点,融合的细胞称为淋巴细胞杂交瘤。

  • 第13题:

    基因诊断的主要技术有


    A.核酸分子杂交技术
    B. PCR技术
    C.生物芯片技术
    D.单克隆抗体技术

    答案:A,B,C
    解析:

  • 第14题:

    请回答下列有关单克隆抗体的问题:单克隆抗体与普通血清抗体相比较,具有()的特点。其诱导融合的常用方法()、()、()在单克隆抗体的制备过程中,运用的技术手段是()、()。


    正确答案:特异强、灵敏度高;PEG;灭活病毒;离心电激等;细胞培养;细胞融合

  • 第15题:

    建立杂交瘤技术的目的是制备对抗原特异的单克隆抗体。( )


    正确答案:正确

  • 第16题:

    制备单克隆抗体的常用技术是()

    • A、DNA重组技术
    • B、超速离心技术
    • C、B淋巴细胞杂交瘤技术
    • D、原位杂交技术
    • E、免疫细胞化学技术

    正确答案:C

  • 第17题:

    单克隆抗体相关的技术包括()

    • A、细胞融合
    • B、细胞培养
    • C、核移植

    正确答案:A,B

  • 第18题:

    杂交瘤技术制备单克隆抗体是根据三个原则,即____________________、______________、_____________________。


    正确答案:淋巴细胞产生抗体的克隆学说;杂交瘤细胞保持双方亲代细胞的特性;利用代谢缺陷机制筛选杂交瘤细胞

  • 第19题:

    试述淋巴细胞杂交瘤技术的基本原理?其基本技术步骤要点?单克隆抗体的有哪些应用?


    正确答案:(1)杂交瘤技术的基本原理:
    ①两类细胞
    骨髓瘤细胞
    可以在体外培养生长,而且比正常细胞生长繁殖快;其可以从患骨髓瘤的小鼠体内获得,不会产生抗体。
    脾B淋巴细胞
    经抗原致敏分化后会分泌相应单一的均匀的特异性抗体。
    ②将上两类各具功能的细胞融合在一起,培养成既能产生单一抗体,又能在体外快速生长的杂交瘤细胞。
    (2)其基本技术步骤要点:
    B.淋巴细胞的制备、骨髓瘤细胞的制备、选择培养基、细胞融合、杂交瘤细胞的选育、检测抗体、杂交瘤细胞的克隆、单克隆抗体生产。
    (3)单克隆抗体的有哪些应用:
    ①作为亲合层析的配体
    ②作为生物治疗的导向武器
    ③作为免疫抑制剂
    ④在免疫学基础研究方面

  • 第20题:

    简述单克隆抗体技术的基本原理。


    正确答案: 1975年,KÖhler和Milstein首创了B淋巴细胞杂交瘤细胞和单克隆抗体技术。其基本原理是:使小鼠免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞,每一个杂交瘤是用一个B细胞融合而产生的克隆。这种细胞既保持了骨髓瘤细胞大量无限增殖的特性,又继承了免疫B细胞合成分泌特异性抗体的能力。将这种融合成功的杂交瘤细胞株体外扩增或接种于小鼠腹腔内,则可从上清液或腹水中获得单克隆抗体。用这种方法制备的抗体具有结构高度均一,特异性强,无交叉反应等特点。

  • 第21题:

    简述单克隆抗体的主要技术路线。


    正确答案: 单克隆抗体的制备:①动物免疫与亲本细胞的选择;②细胞融合:淋巴细胞杂交瘤的制备;③杂交瘤细胞的筛选:有限稀释法等;④单克隆抗体的制备和冻存;⑤单克隆抗体的纯化
    亲本细胞的选择:①骨髓瘤细胞:一般不分泌抗体,能在体外无限繁殖和连续继代培养,且为HGPRT-(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)或TK-(胸腺嘧啶核苷激酶)缺陷。多用BALB/C小鼠的骨髓瘤细胞。②淋巴细胞:经过免疫处理的淋巴细胞,多用大鼠或小鼠。③免疫方法:对细胞或微生物抗原可直接注射如小鼠体内,可溶性蛋白抗原可与等量的福氏完全佐剂混合乳化后,注入到动物体内。
    细胞融合:将免疫脾细胞和小鼠骨髓细胞以2:1或10:1的比例混匀于50ml锥形离心管内,1200rpm离心;10分钟,尽量吸净上清液,用手指轻击管壁,使管底沉淀的细胞铺展成薄层,在室温条件下边轻轻振摇离心管边在60秒钟内逐滴加入50%的PEG0.5ml,随后静置90秒,再于5分钟内边振摇边逐滴加入5-10ml不含血清的培液或盐水缓冲液,以终止PEG的作用,再静置10分钟。
    HAT培养基筛选杂交瘤细胞:细胞团块分散后,加HAT溶液,即可加入有饲养细胞的96孔塑料培养板内每孔0.1ml,用HAT选择性培养时隔4-5天换液,8-10天后可以选择检测。
    HAT选择系统:HAT是含一定浓度次黄嘌呤(H)、氨基喋呤A.及胸腺嘧啶核苷(T)的一种选择性培养基,其中三种成分与细胞DNA合成有关。

  • 第22题:

    单选题
    生物技术在动物检疫中的应用不包括哪个()
    A

    单克隆抗体技术

    B

    多克隆抗体技术

    C

    核酸探针技术

    D

    聚合酶链反应技术


    正确答案: D
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    单选题
    下列关于体外分析中使用单克隆抗体的说法,哪种是错误的()。
    A

    目前单克隆抗体主要利用杂交瘤技术获得

    B

    单克隆抗体只针对抗原中的一个特定决定簇

    C

    单克隆抗体的使用提高了RIA的交叉反应率

    D

    单克隆抗体有助于制备高纯度的抗原

    E

    可以无限量的提供高度均一的抗体


    正确答案: D
    解析: 目前,较多的是采用杂交瘤技术制备McAb。单克隆抗体只是针对抗原中的一个特定的决定簇,克服了多克隆抗体对众多的抗原类似物存在交叉反应的不足,具有更高的特异性。利用McAb高度特异的特点,制备理想的亲和层析柱,可获得高纯度的抗原,而高纯度的抗原又可制备出高效抗血清、优良的标记物和更精确的标准品。可以无限量地提供具有高度均一性的抗体。

  • 第24题:

    单选题
    创立单克隆抗体技术(  )。
    A

    B

    C

    D

    E


    正确答案: B
    解析: 暂无解析