简述用细胞培养进行流感病毒分离培养的操作步骤。
题目
简述用细胞培养进行流感病毒分离培养的操作步骤。
相似考题
参考答案和解析
正确答案:
1）细胞传代：细胞按常规方法消化后，稀释，分装T25小瓶，37℃温箱培养。
2）标本接种：长成单层的细胞瓶，倒掉营养液，用Hank，s洗3遍，每瓶接种标本1ml，34℃吸附1小时，加入维持液（含胰酶、不含小牛血清）6ml，每份标本接种2瓶，同时做正常细胞对照。
3）标本培养：接种标本的细胞瓶，放34℃培养7天，隔日镜下观察一次。
4）标本收获：细胞颗粒增多，变圆，最后脱落，也可呈网状。出现细胞病变者用豚鼠血球进行血凝素测定，细胞病变明显时收获，无病变及血凝阴性的标本盲传，仍为阴性时报告阴性。
2）标本接种：长成单层的细胞瓶，倒掉营养液，用Hank，s洗3遍，每瓶接种标本1ml，34℃吸附1小时，加入维持液（含胰酶、不含小牛血清）6ml，每份标本接种2瓶，同时做正常细胞对照。
3）标本培养：接种标本的细胞瓶，放34℃培养7天，隔日镜下观察一次。
4）标本收获：细胞颗粒增多，变圆，最后脱落，也可呈网状。出现细胞病变者用豚鼠血球进行血凝素测定，细胞病变明显时收获，无病变及血凝阴性的标本盲传，仍为阴性时报告阴性。
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第1题：
从几种细胞混合的培养中，分离出单细胞，使之成为克隆，这类细胞培养称为（）。
- A、原代细胞培养
- B、二倍体细胞培养
- C、传代细胞培养
- D、克隆培养
- E、悬浮培养
正确答案:D -
第2题：
简述胚胎培养的操作步骤。
正确答案: 1.取子房
2.常规表面消毒
3.解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚
4.固体培养 -
第3题：
关于流感病毒检测的描述，不正确的是（）
- A、甲型流感病毒易变异
- B、流感病毒初次分离接种于鸡胚羊膜腔
- C、流感病毒对脂溶剂敏感
- D、不能及时送检的标本应置4℃低温保存
- E、细胞培养首选Hela细胞
正确答案:D,E -
第4题：
简述采用鸡胚进行流感病毒分离培养的操作步骤。
正确答案: 1）标本接种：
①选9～11日龄鸡胚，用验蛋器检查后，弃去死胚及发育不好的鸡胚，在照卵灯上画出气室及胚胎位置。
②鸡胚气室朝上，75%酒精消毒后，在气室端近胚胎处用钻孔器钻一个小孔，用无菌尖吸管向小孔内加1滴无菌液体石蜡，使胚胎更清晰。
③用1ml注射器吸取处理过的标本，以10～20角度插入鸡胚颚下胸前，在羊膜腔内接种0.2ml，再将针头稍后退，于尿囊腔内接种0.2ml，每份标本接种3个鸡胚。
④接种后用胶布封口，放34℃温箱孵育72h。
2）收获：
①收获前将鸡胚放4℃冰箱过夜。
②70%酒精消毒鸡胚气室部分，用镊子去掉气室部的蛋壳。
③用眼科镊子小心撕破壳膜及尿囊腔，将鸡胚轻轻推向一侧。
④用毛细管吸取尿囊液，装入小试管内。
⑤将羊膜提起呈伞状，将毛细管插入，吸取羊水。
⑥在有机板上每个鸡胚的尿囊液和羊水各加2滴及等量1%鸡血球，摇匀，室温放置45分钟后看结果。出现凝集为阳性，用血凝试验测定效价，如滴度低或阴性则混合每份标本的收集液，盲传二代，仍为阴性可报告结果为阴性。 -
第5题：
简述植物细胞培养的特点。
正确答案:①产率高；
②周期短；
③易于管理，减轻劳动强度；
④产品质量高。 -
第6题：
动物细胞培养的操作步骤包括（）。 ①分离出单个细胞 ②继代培养 ③将分散的细胞转入特殊培养基中 ④在二氧化碳培养箱中保温培养请排出正确顺序
- A、①③④②
- B、①②③④
- C、①④②③
- D、②③①④
正确答案:A -
第7题：
问答题简述细胞培养方法的主要步骤及其应用。正确答案： 体外细胞培养技术的一般过程是：①准备工作，包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。②取材：在无菌环境／从机体取出某种组织细胞，经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接人培养器血中，这一过程称为取材。如果是细胞株的扩大培养，则无取材这一过程。③培养：将取得的组织细胞接人培养瓶或培养板中的过程称为培养。如进行组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如进行分散细胞的培养，一般应在接种于培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接种于培养器皿并直接加入培养基。细胞种于培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。解析： 暂无解析 -
第8题：
问答题简述分离与鉴定流感病毒常用的实验室检验步骤及结果判定。正确答案： 分离流感病毒最常用的是鸡胚接种法.取可疑流感患者急性期咽漱液或鼻咽拭子Hanks洗涤液，加入抗生素后，接种于10～20日龄鸡胚羊膜腔，35℃孵育3天后，分别收集羊水和尿囊液，进行血凝试验并测定其滴度.如血凝试验阳性者，在分别以亚型特异性血凝抗体进行血凝抑制试验2，鉴定其流感病毒的型别、亚型和毒株。如血凝试验为阴性者，应在鸡胚上再盲传1～2代，血凝试验仍为阴性者，才能报告接种分离流感病毒为阴性。解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题请按实验要求，用组织分离法进行平菇的菌种分离，写出操作步骤和应注意的问题？正确答案： 1、分离步骤：
①、选种菇：选择优良的种菇作为分离材料，要求外观典型、大小适中、无病虫害、八成熟、1~2茬的子实体。
②、种菇消毒：用无菌水冲洗后，用75%的酒精棉球迅速擦拭表面消毒。
③、取接组织：取消毒过的刀片从菌柄或菌盖中部纵切、撕开，挑取菌盖与菌柄交界处的一小块组织（火柴头大小），接种到PDA斜面培养基中部。
3-5天后，接种块上产生白色绒毛状菌丝。
④、培养：25-28摄氏度培养3-5天后，接种块上产生白色绒毛状菌丝时，在接种箱或净化工作台上，用接种针将菌丝移接到斜面试管内，培养满了即为平菇母种。
２、注意事项：
①、种菇选择大小适中、无病虫害、八成熟、1~2茬的子实体。
②、种菇消毒消毒要彻底。
③、取接组织动作要快，组织块宜小不宜大。
④、培养温度严格控制。解析： 暂无解析 -
第10题：
单选题分离鉴定流感病毒最常用的方法是（）A小鼠接种
B兔接种
C鸡胚接种
D细胞培养
E组织器官接种
正确答案： B解析： 暂无解析 -
第11题：
多选题关于流感病毒检测的描述，不正确的是（）A甲型流感病毒易变异
B流感病毒初次分离接种于鸡胚羊膜腔
C流感病毒对脂溶剂敏感
D不能及时送检的标本应置4℃低温保存
E细胞培养首选Hela细胞
正确答案： D,C解析： 不能及时送检的病毒标本应置-70℃保存；细胞培养应首选狗肾传代细胞。 -
第12题：
问答题简述采用鸡胚进行流感病毒分离培养的操作步骤。正确答案： 1）标本接种：
①选9～11日龄鸡胚，用验蛋器检查后，弃去死胚及发育不好的鸡胚，在照卵灯上画出气室及胚胎位置。
②鸡胚气室朝上，75%酒精消毒后，在气室端近胚胎处用钻孔器钻一个小孔，用无菌尖吸管向小孔内加1滴无菌液体石蜡，使胚胎更清晰。
③用1ml注射器吸取处理过的标本，以10～20角度插入鸡胚颚下胸前，在羊膜腔内接种0.2ml，再将针头稍后退，于尿囊腔内接种0.2ml，每份标本接种3个鸡胚。
④接种后用胶布封口，放34℃温箱孵育72h。
2）收获：
①收获前将鸡胚放4℃冰箱过夜。
②70%酒精消毒鸡胚气室部分，用镊子去掉气室部的蛋壳。
③用眼科镊子小心撕破壳膜及尿囊腔，将鸡胚轻轻推向一侧。
④用毛细管吸取尿囊液，装入小试管内。
⑤将羊膜提起呈伞状，将毛细管插入，吸取羊水。
⑥在有机板上每个鸡胚的尿囊液和羊水各加2滴及等量1%鸡血球，摇匀，室温放置45分钟后看结果。出现凝集为阳性，用血凝试验测定效价，如滴度低或阴性则混合每份标本的收集液，盲传二代，仍为阴性可报告结果为阴性。解析： 暂无解析 -
第13题：
请按实验要求，用组织分离法进行平菇的菌种分离，写出操作步骤和应注意的问题？
正确答案:1、分离步骤：
①、选种菇：选择优良的种菇作为分离材料，要求外观典型、大小适中、无病虫害、八成熟、1~2茬的子实体。
②、种菇消毒：用无菌水冲洗后，用75%的酒精棉球迅速擦拭表面消毒。
③、取接组织：取消毒过的刀片从菌柄或菌盖中部纵切、撕开，挑取菌盖与菌柄交界处的一小块组织（火柴头大小），接种到PDA斜面培养基中部。
3-5天后，接种块上产生白色绒毛状菌丝。
④、培养：25-28摄氏度培养3-5天后，接种块上产生白色绒毛状菌丝时，在接种箱或净化工作台上，用接种针将菌丝移接到斜面试管内，培养满了即为平菇母种。
２、注意事项：
①、种菇选择大小适中、无病虫害、八成熟、1~2茬的子实体。
②、种菇消毒消毒要彻底。
③、取接组织动作要快，组织块宜小不宜大。
④、培养温度严格控制。 -
第14题：
下列适用于流感病毒分离的方法是（）。
- A、鸡胚和MDCK细胞培养
- B、组织培养
- C、厌氧培养
- D、C02培养
- E、动物接种
正确答案:A -
第15题：
用菌组织分离制母钟的主要操作步骤？
正确答案: 1）选择优良新鲜菇体；
2）环境用具严格消毒，进行无菌操作；
3）菇体表面严格消毒；
4）菌内组织块分离，经纵切、横切分离切取菌肉0.5cm2小块；
5）在无菌条件下，将切下的小块用接种针挑放到培养基上；
6）培养，置适宜温度下培养7-14天，菌丝长满试管斜面即可。 -
第16题：
细胞培养的基本培养操作技术包括：（），（），（）。
正确答案:培养细胞的取材与分离；体外培养细胞的纯化；细胞的冻存与复苏 -
第17题：
简述植物细胞培养与微生物细胞培养的不同之处。
正确答案:植物细胞培养与微生物的区别：
1.细胞的大小：植物细胞一般比微生物细胞大；
2.细胞块的形状：植物细胞为块状，而微生物细胞有球状、杆状、螺旋状等；
3.培养液的黏度：植物细胞培养液有一定的黏度；
4.需氧量：植物细胞培养的耗氧量比微生物细胞的好氧量少；
5.植物细胞的Kla值比微生物培养的Kla值小得多；
6.植物细胞对剪切力敏感；
7.植物细胞培养需CO2和光照。 -
第18题：
单选题动物细胞培养的操作步骤包括（）。 ①分离出单个细胞 ②继代培养 ③将分散的细胞转入特殊培养基中 ④在二氧化碳培养箱中保温培养请排出正确顺序A①③④②
B①②③④
C①④②③
D②③①④
正确答案： A解析： 暂无解析 -
第19题：
问答题简述植物细胞培养与微生物细胞培养的不同之处。正确答案： 植物细胞培养与微生物的区别：
1.细胞的大小：植物细胞一般比微生物细胞大；
2.细胞块的形状：植物细胞为块状，而微生物细胞有球状、杆状、螺旋状等；
3.培养液的黏度：植物细胞培养液有一定的黏度；
4.需氧量：植物细胞培养的耗氧量比微生物细胞的好氧量少；
5.植物细胞的Kla值比微生物培养的Kla值小得多；
6.植物细胞对剪切力敏感；
7.植物细胞培养需CO2和光照。解析： 暂无解析 -
第20题：
问答题简述胚胎培养的操作步骤。正确答案： 1.取子房
2.常规表面消毒
3.解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚
4.固体培养解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题简述用细胞培养进行流感病毒分离培养的操作步骤。正确答案： 1）细胞传代：细胞按常规方法消化后，稀释，分装T25小瓶，37℃温箱培养。
2）标本接种：长成单层的细胞瓶，倒掉营养液，用Hank，s洗3遍，每瓶接种标本1ml，34℃吸附1小时，加入维持液（含胰酶、不含小牛血清）6ml，每份标本接种2瓶，同时做正常细胞对照。
3）标本培养：接种标本的细胞瓶，放34℃培养7天，隔日镜下观察一次。
4）标本收获：细胞颗粒增多，变圆，最后脱落，也可呈网状。出现细胞病变者用豚鼠血球进行血凝素测定，细胞病变明显时收获，无病变及血凝阴性的标本盲传，仍为阴性时报告阴性。解析： 暂无解析 -
第22题：
单选题流感病毒分离培养中，最敏感而特异的方法是（）.A细胞培养
B含血的培养基
C鸡胚接种
D动物接种
E以上都不是
正确答案： B解析： 流感病毒分离培养中，最敏感而特异的方法是鸡胚接种。 -
第23题：
问答题病毒的分离培养方法包括____、____和细胞培养。正确答案：解析：