在固定容积的PCR反应体系中，加入越多的模版，PCR反应的效果就会越好。（）

题目

在固定容积的PCR反应体系中，加入越多的模版，PCR反应的效果就会越好。（）

相似考题

1.简述标准的PCR反应体系。

2.进行PCR扩增DNA时反应体系应加入什么物质?

3.PCR反应的必需成分不包括A.dNTPB.RNA聚合酶C.DNA聚合酶D.DNA模版E.引物

4.有关RT－PCR技术的叙述正确的是()A、该反应的最初起始模板不是DNAB、需要先进行PCR反应，再进行逆转录C、在进行PCR反应时模板不是cDNAD、合成的终产物是基因组DNA

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  • 第1题：

    PCR方法扩增DNA片段是，在反应中除了用该DNA片段作为模板外，尚需加入_____________、_____________ 和_____________。


    答案：
    解析：
    耐热Taq酶 引物 dNTP

  • 第2题：

    PCR反应中如模版的GC含量较高，应缩短变性时间。（）


    正确答案:错误

  • 第3题：

    PCR反应的特异性与（）直接相关。

    • A、模版的质量
    • B、DNA聚合酶的质量
    • C、引物的特异性
    • D、退火温度

    正确答案:A,B,C,D

  • 第4题：

    理想的PCR反应中，模版以______速率扩增。（）

    • A、2n
    • B、4n
    • C、×2
    • D、×3

    正确答案:A,C

  • 第5题：

    荧光定量PCR结果中样品的Ct值受下列哪些因素的影响（）。

    • A、阈值设定
    • B、模版的起始浓度
    • C、PCR反应的循环数
    • D、引物的扩增效率

    正确答案:A,B,D

  • 第6题：

    在PCR反应中，整个核酸模版被扩增。（）


    正确答案:错误

  • 第7题：

    什么是PCR，请试述PCR技术的原理，以及PCR的反应过程？


    正确答案:P.CR就是聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction）。
    原理：双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。
    反应过程：首先。双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子；然后，加入到反映混合物中的引物和模板DNA的特定末端相结合；戒指，DNA聚合酶以单链DNA为模板，利用反应混合物中的三种核苷三磷酸，在引物的3’-OH端合成新生的DNA互补链。

  • 第8题：

    双脱氧链末端终止法测序反应中除PCR反应体系成份外，还加入了（）。

    • A、DNA聚合酶
    • B、dNTP
    • C、dNDP
    • D、ddNTP
    • E、ddNDP

    正确答案:D

  • 第9题：

    问答题
    PCR反应中对于加入的dNTP有什么要求？

    正确答案： 1.dNTP应具有一定浓度：50-200μmol/L，不得低于10-15。浓度过高会抑制Taq酶活性，较低浓度可降低错误掺入；高浓度dNTPs易产生错误掺入，而浓度过低会导致产量过低；
    2.标准PCR中包含四种等摩尔浓度的脱氧核苷三磷酸，否则会诱导聚合酶错误掺入而降低产率、提前终止反应；
    3.不能反复冻融，否则会降解。
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    下列关于PCR的叙述哪一个是不正确的？ （）
    A

    是Mullis于1984年发明的一种体外扩增DNA的技术

    B

    根据DNA复制的基本原则，反应体系中需加入RNA聚合酶以合成引物

    C

    在PCR反应体系中，需要特定的引物、dNTP、镁离子等

    D

    需要模板DNA即扩增的DNA片段


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    简述PCR反应体系主要包括哪些组分。

    正确答案： P.CR反应组分：
    ①模板（特定序列的DNA分子）。
    ②两个特异寡核苷酸片段-引物primer，这一对引物位于欲扩增DNA区的两侧，与靶序列两端互补。
    ③耐热DNA聚合酶Taq酶以及酶的缓冲液-buffer。
    ④4种脱氧核糖核苷酸dNTP。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    多选题
    PCR反应体系中，需要的成分为：（）
    A

    DNA模板

    B

    引物

    C

    dNTP

    D

    DNA聚合酶


    正确答案： C,D
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    简述PCR反应体系主要包括哪些组分。
    P.CR反应组分：
    ①模板（特定序列的DNA分子）。
    ②两个特异寡核苷酸片段-引物primer，这一对引物位于欲扩增DNA区的两侧，与靶序列两端互补。
    ③耐热DNA聚合酶Taq酶以及酶的缓冲液-buffer。
    ④4种脱氧核糖核苷酸dNTP。
    略

  • 第14题：

    以下关于PCR的说法错误的是（）

    • A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶
    • B、应用PCR技术可以进行定点突变
    • C、PCR的引物必须完全和模板互补配对
    • D、PCR反应中，仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增

    正确答案:C

  • 第15题：

    RNA可直接作为PCR反应的模版。（）


    正确答案:错误

  • 第16题：

    PCR中阳性对照没有出现的原因包括（）。

    • A、反应体系配制出错
    • B、阳性对照失效
    • C、反应体系中组分失效
    • D、漏加

    正确答案:A,B,C,D

  • 第17题：

    _________可作为PCR反应的模版。（）

    • A、RNA
    • B、质粒
    • C、DNA
    • D、cDNA

    正确答案:B,C,D

  • 第18题：

    PCR反应中对于加入的dNTP有什么要求？


    正确答案: 1.dNTP应具有一定浓度：50-200μmol/L，不得低于10-15。浓度过高会抑制Taq酶活性，较低浓度可降低错误掺入；高浓度dNTPs易产生错误掺入，而浓度过低会导致产量过低；
    2.标准PCR中包含四种等摩尔浓度的脱氧核苷三磷酸，否则会诱导聚合酶错误掺入而降低产率、提前终止反应；
    3.不能反复冻融，否则会降解。

  • 第19题：

    简述PCR反应体系，实验中注意的问题。


    正确答案:1.PCR原理：PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。
    包括3个步骤：
    （1）DNA变性：加热使靶DNA双链解离成两条单链。
    （2）引物与靶DNA退火：降低温度至适当水平，促使两个引物根据碱基互补的原理分别结合至靶DNA的两条链的3’末端。
    （3）引物延伸：在DNA聚合酶催化下，引物沿着靶DNA3’末端向5’末端延伸（引物延伸是5’→3’方向）。新合成DNA在新一轮变性解离后形成更多的模版与引物退火，在DNA聚合酶催化行，合成新一轮的靶DNA。每一轮DNA的合成均以所有DNA为模版，靶DNA数量呈指数增加。
    2.注意问题：引物
    （1）引物长度：15~30bp，常用为20bp
    （2）引物扩增跨度：以200~500bp为宜，特点条件下课扩增至10kb
    （3）引物碱基：G+C含量以40~60%为宜，太少扩增效果不佳，太多易出血非特异性条带；ATGC最后随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸成串排列
    （4）避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异性扩增条带
    （5）引物3’末端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对
    （6）引物中有货最好加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点
    （7）引物特异性：引物与核苷酸序列数据库的其他序列无明显同源性
    （8）引物量： 每条引物浓度0.1~1μmol或10~100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，过高引起错配和非特异性扩增，增加引物之间形成聚体的机会
    P.CR循环次数：循环次数觉得PCR扩增程度。主要取决于模版DNA的浓度。一般的循环次数在30~40次，次数越多，非特异性产物量亦随之增多
    设立对照：PCR反应应设立阳性和阴性对照，是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合理的一个重要参考指标。

  • 第20题：

    以下PCR叙述不正确的是（）

    • A、PCR技术已发展到既能定性又能定量
    • B、与PCR不同的是LCR，需两对相邻的寡核苷酸引物
    • C、在RT-PCR的反应体系中先加入病毒RNA分子作为模板合成cDNA
    • D、病毒核酸检测阳性，即说明标本中或病变部位一定有活病毒
    • E、基因芯片技术一次性可完成大量样品DNA序列的检测和分析

    正确答案:D

  • 第21题：

    单选题
    双脱氧链末端终止法测序反应中除PCR反应体系成份外，还加入了（）。
    A

    DNA聚合酶

    B

    dNTP

    C

    dNDP

    D

    ddNTP

    E

    ddNDP


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    简述PCR反应体系，实验中注意的问题。

    正确答案： 1.PCR原理：PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。
    包括3个步骤：
    （1）DNA变性：加热使靶DNA双链解离成两条单链。
    （2）引物与靶DNA退火：降低温度至适当水平，促使两个引物根据碱基互补的原理分别结合至靶DNA的两条链的3’末端。
    （3）引物延伸：在DNA聚合酶催化下，引物沿着靶DNA3’末端向5’末端延伸（引物延伸是5’→3’方向）。新合成DNA在新一轮变性解离后形成更多的模版与引物退火，在DNA聚合酶催化行，合成新一轮的靶DNA。每一轮DNA的合成均以所有DNA为模版，靶DNA数量呈指数增加。
    2.注意问题：引物
    （1）引物长度：15~30bp，常用为20bp
    （2）引物扩增跨度：以200~500bp为宜，特点条件下课扩增至10kb
    （3）引物碱基：G+C含量以40~60%为宜，太少扩增效果不佳，太多易出血非特异性条带；ATGC最后随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸成串排列
    （4）避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异性扩增条带
    （5）引物3’末端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对
    （6）引物中有货最好加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点
    （7）引物特异性：引物与核苷酸序列数据库的其他序列无明显同源性
    （8）引物量： 每条引物浓度0.1~1μmol或10~100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，过高引起错配和非特异性扩增，增加引物之间形成聚体的机会
    P.CR循环次数：循环次数觉得PCR扩增程度。主要取决于模版DNA的浓度。一般的循环次数在30~40次，次数越多，非特异性产物量亦随之增多
    设立对照：PCR反应应设立阳性和阴性对照，是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合理的一个重要参考指标。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    PCR反应体系中的耐热酶是（　　）。
    A

    B

    C

    D

    E


    正确答案： B
    解析： PCR反应体系主要由寡核苷酸(引物)、4种dNTP、Taq DNA聚合酶（耐热）、靶序列DNA和PCR反应缓冲液体系组成。

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